羊膜间充质干细胞经PGE2/EP2途径调节类风湿关节炎患者T细胞免疫

目的探讨人羊膜间充质干细胞(AMSCs)调节类风湿性关节炎(RA)患者T细胞免疫的作用与涉及PGE2/EP2途径的机制。方法含RA患者自体血浆的培养基非接触共培养AMSCs与RA患者外周血来源T细胞,实验分为T细胞组、AMSCs组、共培养组和EP2组,流式细胞术检测T细胞亚群和炎症因子,ELISA法检测PGE2和IL-6,Western blot检测PI3K、Akt及其磷酸化蛋白水平。结果AMSCs降低RA患者T细胞增殖数量和Th17细胞比例,增高Treg细胞比例和Treg/Th17比值,减少共培养上清液IL-17含量,这些效应可被40 nmol/L的EP2受体拮抗剂AH6809所阻断。与AMSC组相比,共培养组细胞培养上清液中IL-1β、IL-6和IL-8的含量明显降低,EP2受体拮抗剂组与共培养组比较无明显差异。AMSCs增加T细胞p-PI3K蛋白水平,降低p-AKT蛋白水平,EP2受体拮抗剂只逆转AMSCs对p-AKT蛋白的下调。结论AMSCs抑制RA患者T细胞增殖、上调Treg/Th17和下调IL-17分泌的作用机制涉及激活PGE2/EP2途径。

干细胞衍生的外泌体在肝脏疾病治疗中的作用

肝脏容易受多种病因影响发生肝损伤,严重情况下可引起其合成、解毒、代谢和生物转化等功能发生障碍,当前针对肝衰竭、失代偿性肝硬化等终末期肝病仍缺乏高效的临床治疗手段。近年来间充质干细胞的临床疗效已被证实,基于干细胞外泌体的相关治疗成为研究热点。本文介绍了干细胞外泌体治疗的优势、机制研究进展、临床前研究现状等。从目前研究结果来看,干细胞衍生的外泌体治疗肝脏疾病具有良好应用前景,但临床前研究仍需进一步深入,临床研究有待开展。

MSCs治疗早发性卵巢功能不全的免疫调节作用及PGE2/EP潜在机制

早发性卵巢功能不全(POI)严重影响女性的生殖健康。其发病机制与药物、免疫和遗传等多因素相关,而T细胞免疫失衡是自身免疫性POI和炎症性卵巢损伤的重要致病机制,目前采用的雌激素替代治疗虽能缓解POI部分临床症状,但缺乏有效修复卵巢功能的措施。近年的研究表明,间充质干细胞(MSCs)移植已成为改善POI临床症状、恢复卵巢组织结构与功能及垂体-性腺轴激素平衡的新方法,颇具临床应用前景。前列腺素E2(PGE2)通过与其受体(receptor, EP)结合,不但参与多种免疫细胞和炎症反应调节,还可影响血流量、分泌、生殖细胞和MSCs的功能和发育。PGE2可能与其他炎症因子相似,是免疫授权调节MSCs功能活性的关键分子。本文综述了MSCs治疗POI的作用和机制,重点涉及T细胞免疫与PGE2/EP调节机制的研究进展。

人脐带间充质干细胞上调Nrf2信号改善衰老小鼠睾丸功能

目的探讨人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUCMSCs)移植对氧化损伤衰老小鼠睾丸功能的影响及分子机制。方法共纳入18只6~8周SPF级C57BL/C雄性小鼠,完全随机分组法分为3组,对照组:小鼠注射等量生理盐水;模型组:颈背部皮下注射D-半乳糖连续9周,造模第4周末,每只小鼠尾静脉注射生理盐水;hUCMSCs组:颈背部皮下注射D-半乳糖连续9周,造模第4周末,每只小鼠尾静脉注射hUCMSCs。9周后,称取小鼠体质量和睾丸重量,计算睾丸指数,酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测小鼠血清睾酮水平、睾丸组织丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)含量。肉眼观察睾丸外观,苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察睾丸组织病理学变化,实时荧光定量聚合酶链反应和Western blotting分别检测核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)信号转导相关基因和蛋白表达。结果模型组小鼠睾丸指数[(0.64±0.05)%]较对照组[(0.81±0.13)%,P=0.006]降低,睾丸体积缩小,生精小管完整性破坏,生精细胞和精子减少,间质稀疏;血清睾水平[(4.10±0.67)μg/L]、睾丸组织SOD活性[(48.87±6.40)U/mg Prot]较对照组[(5.71±0.81)μg/L,P=0.002;(78.53±9.70)U/mg Prot,P=0.001]均降低,而MDA含量[(1.11±0.19)nmol/mg Prot]较对照组[(0.77±0.07)nmol/mg Prot,P=0.001]增加。Keap1 mRNA和蛋白表达量较对照组均增高(P=0.006,P=0.043),Nrf2、SOD和NQO1 mRNA表达量较对照组减少(P=0.002,P<0.001,P=0.001),Nrf2、HO-1蛋白表达量较对照组均明显降低(P=0.011,P=0.021)。与模型组比较,hUCMSCs组小鼠睾丸指数[(0.79±0.03)%,P=0.010]增高;睾丸组织结构较为清晰、完整,生精小管各级生精细胞和精子及间质细胞较丰富;血清睾酮水平[(5.24±0.21)μg/L,P=0.028]及睾丸组织SOD活性[(79.47±14.32)U/mg Prot,P=0.001]增高,MDA含量[(0.77±0.08)nmol/mg Prot,P=0.001]降低;Nrf2、SOD和NQO1 mRNA表达量均增高(P=0.024,P=0.037,P=0.005),Keap1 mRNA表达量减少(P=0.044),Nrf2、HO-1蛋白表达量均增高(P=0.009,P=0.012),Keap1蛋白表达量降低(P=0.035)。hUCMSCs组小鼠睾丸指数、血清睾酮、SOD活性及MDA含量都与对照组差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论hUCMSCs明显改善氧化损伤所致衰老小鼠睾丸结构和功能损伤,其作用机制与上调Nrf2信号转导及其相关下游抗氧化活性SOD、HO-1蛋白表达,减少Keap1介导的Nrf2降解有关。