医学院校开展植物细胞工程探究性实验的探索

植物细胞工程实验是医学院校生物工程专业学生的一门专业必修课。传统教学中存在学时少、与实际应用联系不紧密等特点。本文就目前所进行的实验课程改革进行总结,并对未来课程改革方向提出展望,以期为植物细胞工程实验在医学院校生物工程专业更好地开展提供参考。

蛋白质二硫键异构酶a3的表达纯化、活性测定与小分子抑制剂的筛选

目的 通过大肠杆菌表达并纯化蛋白质二硫键异构酶a3(PDIA3)为筛选其小分子抑制剂奠定基础。方法 通过RT-PCR获得PDIA3基因,构建重组质粒pET28a-PDIA3,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,Ni-NTA树脂亲和层析获得PDIA3,SDS-PAGE鉴定纯度,酶标仪测定活性,Specs商业化合物库虚拟筛选PDIA3的抑制物,胰岛素比浊法对抑制物进行抑酶活性测定。结果 克隆序列与基因库序列一致。获得的纯化PDIA3比活力为4.17 U/mg,PDIA3具有催化二硫键断裂的能力,筛选到的化合物去甲氧基姜黄素和41974954对PDIA3有抑制作用。结论 成功表达并纯化出PDIA3,筛选到的去甲氧基姜黄素和化合物41974954对PDIA3有抑制作用,为PDI蛋白抑制剂和抗血栓药物的研发奠定了基础。