KAI1基因对胃癌细胞体外生长及迁移的影响

目的通过基因转染改变胃癌细胞中KAI1基因表达量,进一步观察KAI1基因对胃癌细胞体外生长及迁移能力的影响。方法将人胃癌细胞BGC823分为过表达KAI1的实验组(BGC823-OE组)、空载体的阴性对照组(BGC823-NC组)及空白组(BGC823-Ctrl组);同时将人胃癌细胞MKN28分为沉默KAI1的实验组(MKN28-OE组)、空载体的阴性对照组(MKN28-NC组)及空白对照组(MKN28-Ctrl组),并建立稳定转染细胞株;采用Western blot和RT-PCR技术检测两种稳转细胞株中KAI1蛋白和mRNA相对表达量;四唑盐比色法(MTT)检测两种稳转细胞株的体外增殖情况;Transwell实验检测两种稳转细胞株体外迁移情况;流式细胞术检测两种稳转细胞株细胞周期变化。结果慢病毒感染72 h后两种胃癌细胞OE组和NC组观察到大量荧光表达,加药筛选扩增后成功构建稳转细胞株。BGC823-OE组的KAI1 mRNA和蛋白相对表达量高于BGC823-NC组及BGC823-Ctrl组(P<0.05),而MKN28-OE组的KAI1 mRNA和蛋白相对表达量低于MKN28-NC组及MKN28-Ctrl组(P<0.05)。BGC823-OE组24、48、72h的相对增殖率低于BGC823-NC组及BGC823-Ctrl组(P<0.05),而MKN28-OE组24、48、72h的相对增殖率高于MKN28-NC组及MKN28-Ctrl组(P<0.05)。BGC823-OE组细胞迁移数目、S期占比均少于BGC823-NC组及BGC823-Ctrl组(P<0.05),而MKN28-OE组迁移数目、S期占比均多于MKN28-NC组及MKN28-Ctrl组(P<0.05)。结论成功构建过表达KAI1基因的人胃癌细胞BGC823细胞株和沉默KAI1基因的人胃癌细胞MKN28细胞株;KAI1基因对不同胃癌细胞体外生长、迁移能力有负向调控作用。

淫羊藿苷通过上调PPARα/γ信号通路改善无高脂饮食SHR单纯性脂肪肝

目的探讨淫羊藿苷(ICA)对无高脂饮食自发性高血压大鼠(SHR)单纯性脂肪肝的影响,并基于过氧化物酶体增殖物激活受体α/γ(PPARα/γ)信号通路研究其可能的作用机制。方法将SPF级28只14周龄雄性SHR随机均分为模型组(SHR组)和ICA低剂量组(10 mg/kg,ICA-L组)、中剂量组(20 mg/kg,ICA-M组)、高剂量组(40 mg/kg,ICA-H组),经灌胃(Irrigation,ig)给予ICA混悬液每日一次至26周龄。此外,SPF级7只14周龄的雄性魏-凯二氏大鼠(Wistar-Kyoto rats,WKY)作为空白对照组(WKY组)。WKY组和SHR组大鼠均ig等体积双蒸水。HE染色观察每组大鼠肝脏病理变化、脂肪染色观察每组大鼠肝脏脂滴变化;蛋白质印迹法检测肝组织PPARα、PPARγ蛋白的表达。结果与WKY组相比,SHR组可见部分肝细胞水肿,胞浆疏松化,肝血窦狭窄,胞浆中存在大小不等染成桔黄色的脂肪滴,以中央静脉周围的细胞最为明显;PPARα、PPARγ蛋白表达明显下调(P<0.05)。与SHR组比较,ICA-M、ICA-H组大鼠肝脏组织上述病理变化均有所改善;ICA-M、ICA-H组PPARα、PPARγ蛋白表达均明显上调(P<0.05)。结论ICA具有改善无高脂饮食SHR单纯性脂肪肝的作用,其机制至少可能与抑制肝脏PPARα/γ的表达有关。