基于学生视角探索药物毒理学教学改革模式

药物毒理学作为一门综合性强的课程,在临床药学本科生教育中具有十分重要的地位。近年来,越来越多的高校在药学生中开展药物毒理学这门课程,随后出现了许多关于药物毒理学教学改革的模式,其目的为了让药学生在有限的学时中掌握药物毒理学知识。文章基于学生视角,结合课堂多种教学模式进行教学改革的探索,以此提高学生学习的主动性和兴趣性,为药物毒理学课程教学改革提供参考。

柴胡总皂苷的大鼠体内代谢特征谱研究

目的研究柴胡总皂苷在大鼠体内的代谢情况,分析其发挥药效的关键成分。方法首先基于UPLC-MS/MS技术,建立柴胡总皂苷提取物化学成分特征谱,对其总体皂苷类成分进行鉴定分析;进一步采用离体外翻肠囊、肝门静脉取血和腹主动脉取血的方法,比较大鼠肠吸收成分、肠代谢的入血成分和肝代谢的血中成分的化学成分特征谱,筛选柴胡皂苷类成分体内发挥药效的关键成分。结果本研究共鉴定出柴胡总皂苷提取物中52种柴胡皂苷类成分,其中只能通过肠道直接吸收入血的成分有16种,只能通过肠道菌群和肝脏代谢的成分有3种,既能直接通过肠道吸收入血又能通过肠道菌群代谢和肝代谢而吸收的成分有3种;通过比较3个代谢特征谱发现,乙酰柴胡皂苷E、柴胡皂苷元A、柴胡皂苷元G、柴胡皂苷A、柴胡皂苷B_(2)、柴胡皂苷元C可能是柴胡皂苷类成分体内发挥药效的关键成分。结论通过柴胡总皂苷提取物在离体外翻肠囊法、肝门静脉取血和腹主动脉取血的化学成分特征谱分析,初步探讨了柴胡皂苷发挥药效的关键成分,为深入研究柴胡皂苷类成分药效物质提供新的依据。

基于指纹图谱与多指标含量测定的黔产香榧假种皮质量控制研究

目的建立黔产香榧假种皮的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱及多指标含量测定方法,为黔产香榧假种皮的资源利用提供科学依据。方法采用Agilent Eclipse Plus C 18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm);以甲醇(A)-0.06%醋酸-水溶液(B)为流动相,梯度洗脱;流速1.0 mL/min;检测波长是230、255、270、330 nm;柱温30℃;进样量5μL。结果18批香榧假种皮指纹图谱相似度均大于0.995,共确定18个共有峰,指认了苯甲酸和金松双黄酮。对样品中的苯甲酸、异鼠李素、芹菜素、金松双黄酮和异银杏素5种化学成分进行含量测定和方法学考察,包括专属性、线性、精密度、重复性和稳定性,均符合要求;平均回收率在96.98%~101.08%,RSD≤1.57%。香榧假种皮中该5种化学成分的含量分别为(56.49~110.91、183.14~418.64、69.81~104.91、105.59~197.17、270.36~400.22)μg/g。结论本研究所建立的HPLC指纹图谱和多指标含量测定的方法准确可行,可作为黔产香榧假种皮质量评价的一种有效手段。

基于指纹图谱与多指标含量测定的黔产香榧种子质量控制研究

目的建立黔产香榧种子高效液相色谱(HPLC)的指纹图谱及多指标含量测定方法,为黔产香榧种子的质量控制与开发提供依据。方法采用Agilent Eclipse Plus C 18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm);以乙腈(A)-0.06%醋酸-水溶液(B)为流动相,梯度洗脱;流速1.0 mL/min;检测波长280 nm;柱温30℃;进样量15μL。结果20批香榧种子指纹图谱相似度均大于0.983,共确定5个共有峰,指认了没食子酸和绿原酸。对样品中的没食子酸和绿原酸2种化学成分进行含量测定与方法学考察,包含专属性、线性、精密度、重复性和稳定性,均符合要求;平均回收率在97.75%~98.82%,RSD≤1.62%。香榧种子中该2种化学成分的含量分别为33.25~97.00μg/g和1072.28~1279.56μg/g。结论本研究所建立黔产香榧种子的HPLC指纹图谱和多指标含量测定的方法准确可行,可作为黔产香榧种子质量评价的一种有效手段。

液质联用和网络药理学用于复方斑蝥胶囊治疗原发性肝癌的机制研究

目的基于液质联用(LC-MS)技术分析中药复方制剂斑蝥胶囊的化学成分,进一步结合网络药理学探索复方斑蝥胶囊治疗原发性肝癌的作用机制。方法采用UPLC-Q-TOF技术,鉴定复方斑蝥胶囊中的主要化学成分,采用TCMSP数据库检索化学成分的作用靶标;在GeneCards数据库中获取原发性肝癌的疾病靶标,取交集获取复方斑蝥胶囊抗原发性肝癌靶标,并采用STRING平台进行蛋白质相互作用分析,筛选其核心靶标;DAVID平台进行KEGG通路富集分析并预测其潜在作用机制;采用Cytoscape3.6.0进行可视化;采用Discovery Studio2016对关键成分与关键靶标进行分子对接。结果本研究共鉴定出复方斑蝥胶囊内59种化学成分,可作用173个原发性肝癌靶标,PPI分析发现活性成分29个,核心靶标24个,涉及20条信号通路。分子对接结果验证槐角苷、野黄芩苷等19种成分与CASP3、RB1、AR及RELA等有较好的结合活性。复方斑蝥胶囊可通过p53 signaling pathway、TNF signaling pathway、NOD-like receptor signaling pathway、T cell receptor signaling pathway等信号通路发挥作用。结论该研究初步揭示复方斑蝥胶囊治疗原发性肝癌的有效成分及其作用机制,对于指导临床精准用药及复方斑蝥胶囊质量控制标志物的筛选、抗原发性肝癌活性成分的发现提供参考。

基于指纹图谱及多成分含量测定的黔产金钗石斛花质量控制研究

目的建立黔产金钗石斛花高效液相色谱(HPLC)的指纹图谱、总黄酮及多成分含量测定方法。方法采用Agilent Eclipse Plus C_(18)色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm);以乙腈(A)-0.06%醋酸-水溶液(B)为流动相,梯度洗脱;流速1.0 mL/min;检测波长280 nm;柱温30℃。结果14批金钗石斛花指纹图谱相似度均大于0.954,共标定13个共有峰,指认了甘草苷、山柰酚-3-葡萄糖鼠李糖苷和异槲皮苷3个成分,其含量分别为1.4407~3.2287、5.9434~10.1619和1.2188~2.9090 mg/g。14批样品的总黄酮含量为0.054~0.082 g/g。聚类分析(HCA)发现冻干和烘干样品存在差异。结论本研究所建立的HPLC多成分含量测定和指纹图谱的方法准确可行,可作为黔产金钗石斛花质量评价的一种有效手段。

复方钩藤口服液的制备及其对小鼠睡眠的改善

本研究采用正交试验优化复方钩藤口服液的制备工艺,并评价其改善小鼠睡眠的作用。结果表明,优化后的制备工艺为加12倍水提取药材3次,每次2.5 h,以70%乙醇醇沉24 h后浓缩即得。改善小鼠睡眠实验中,高(16 g/kg·BW)、中(8 g/kg·BW)、低(4 g/kg·BW)三个剂量组对小鼠均无直接睡眠作用;与空白对照组相比,中、高剂量组可显著延长戊巴比妥钠诱导的小鼠睡眠时间(P<0.05),而三个剂量组均能显著协同阈下剂量的戊巴比妥钠提高小鼠的入睡率(P<0.05),以及协同巴比妥钠显著缩短小鼠的睡眠潜伏期(P<0.05)。实验结果表明优化的复方钩藤口服液制备工艺稳定、可行,复方钩藤口服液具有改善小鼠睡眠的功能。

复方钩藤口服液的质量标准研究

目的建立复方钩藤口服液的质量标准。方法采用薄层色谱法(TLC)对复方钩藤口服液中的钩藤、天麻、酸枣仁进行定性鉴别;采用高效液相色谱法(HPLC)对复方钩藤口服液中的钩藤碱进行含量测定,色谱柱Agilent Eclipse Plus-C18;流动相为乙腈-0.05%冰醋酸缓冲液(加三乙胺调节pH为7.5),梯度洗脱;流速1.0 mL/min;检测波长243 nm;柱温为25℃;进样量20μL。采用高效液相色谱法(HPLC)对复方钩藤口服液中的天麻素进行含量测定,色谱柱Agilent ZORBAX SB-Aq;流动相为乙腈-水(3∶97,V/V);流速1.0 mL/min;检测波长220 nm;柱温为30℃,进样量20μL。结果口服液中3种指标成分的对照品与样品在相同位置显相同颜色斑点,阴性对照无干扰。钩藤碱和天麻素分别在0.92~18.40μg/mL(r=0.9992)、13.25~265.00μg/mL(r=0.9998)范围内线性关系良好;精密度、稳定性、重复性实验的RSD均小于≤3.0%;定量限分别为0.92、1.33μg/mL,检测限分别为0.18、0.26μg/mL;平均加样回收率分别为98.91%、99.50%(RSD=0.50%,1.02%)。结论本研究建立的复方钩藤口服液的质量标准准确可靠,可用于复方钩藤口服液的质量控制。

微柱离心-HPLC法测定半乳糖化去甲斑蝥素脂质体的包封率

采用SephadexG-50微柱离心法结合HPLC法测定了半乳糖化胆固醇配体修饰去甲斑蝥素脂质体(Gal-NCTD-Lips)的包封率,并进行质量评价。当离心力为1000 r/min,离心时间为1 min,Gal-NCTD-Lips上样量为0.2 mL时,微柱离心法能有效分离脂质体和游离药物。在所建立的色谱条件下,去甲斑蝥素在0.03~0.18 mg/mL范围内线性关系良好(r=0.9994),高、中、低三种浓度的加样回收率分别为98.5%、98.9%、97.9%,包封率为51.06%±2.65%(n=5)。3种浓度的凝胶微柱的加样回收率分别为101.8%、99.25%、101.1%,RSD分别为1.69%、1.95%、1.40%,结果显示该方法准确、快速,能用于Gal-NCTD-Lips包封率的测定。

山银花提取物泡腾片的制备及质量评价

本研究采用正交试验优选山银花提取物泡腾片的处方工艺,并建立其质量评价的方法。优化后的制备工艺为山银花提取物干膏粉4.5%,崩解剂碳酸氢钠24%,酒石酸16%,黏合剂聚乙烯吡咯烷酮(K30)9%,润滑剂聚乙二醇60005%,矫味剂阿斯巴甜1.5%。采用高效液相色谱法测定泡腾片中绿原酸的含量,每片泡腾片中含绿原酸不低于2.0mg,崩解时限,重量差异、硬度、脆碎度检查符合规定。结果表明山银花泡腾片处方组成合理,制备方法简便可行,质量可控。

半乳糖化胆固醇配体修饰去甲斑蝥素脂质体的制备及表征

以半乳糖和胆固醇氯甲酸酯为底物,通过化学反应合成半乳糖-胆固醇偶联物,并经1H NMR、13C NMR和HRMS确证了产物的结构。以此为配体,采用薄膜超声分散法制备半乳糖化胆固醇配体修饰的去甲斑蝥素脂质体,通过单因素试验和正交设计优化处方。结果所得优化工艺为:磷脂与半乳糖化胆固醇的质量比3∶1,药脂比1∶12,溶胀时间30 min。优化脂质体的包封率为(50.75±1.61)%,载药量为(7.85±2.16)%,平均粒径为(128.4±5.7)nm,平均ζ电位(-22.78±1.80)mV;与去甲斑蝥素溶液相比,优化脂质体的体外释放呈现出一定的缓释特征。