遵义市习水县虫草属药用真菌的菌株分离与鉴定

目的:对遵义习水县虫草属药用真菌的菌株进行分离与鉴定,为进一步开发利用虫草奠定基础。方法:以遵义习水县所采集到的虫草属子实体为研究对象,采用组织分离法分离虫草菌株并纯化,ITS基因序列鉴定结合子实体标本鉴定分离的纯培养物。结果:从遵义习水共得到6株虫草属药用真菌菌株,编号56b-1、SW57b两株菌株为高雄山虫草(Cordyceps takaomontana Yakush.&Kumaz);编号67、CZ270、SL215三株菌株为蝉花(Cordyceps cicadae(Miq.)Massee);编号SL219为爪哇虫草(Cordyceps javanica(Bally)Kepler, B.Shrestha&Spatafora)。结论:遵义习水县野生虫草属药用真菌资源丰富。

海洋放线菌Streptomyces koyangensis SCSIO 5802中多烯大环内酯类抗生素candicidin生物合成基因簇的分析鉴定

目的从一株深海放线菌S.koyangensis SCSIO 5802中分析鉴定多烯大环内酯类抗生素candicidin的生物合成基因簇,并推导其生物合成途径。方法①利用PCR-targeting方法对负责abyssomicin类化合物的聚酮合酶abmB1进行同框缺失,并利用HPLC-MS对获得的突变株SCSIO 5802A代谢产物进行分析以鉴定其它新型化合物;②利用生物信息学方法对S.koyangensis SCSIO 5802的全基因组序列进行注释分析,以寻找candicidin的生物合成基因簇;③结合candicidin结构特征、基因簇内生物合成基因的功能以及I型聚酮化合物的生物合成原理,对其生物合成途径进行推导;④利用阿普拉抗性基因片段对candicidin生物合成基因簇中的聚酮合酶基因canD进行替换突变,以确定基因簇的正确性。结果 abmB1基因的同框缺失突变株SCSIO 5802A不生产abyssomicins类化合物,从该突变株中鉴定了一类之前未发现的多烯大环内酯类化合物candicidins;利用生物信息学鉴定了candicidin生物合成基因簇,并对其生物合成途径进行了推导;对聚酮合酶基因canD进行抗性替换突变获得的突变株SCSIO 5802AC不生产candicidins类化合物,确认了该基因簇的正确性。结论本研究将为利用组合生物合成的方法获得candicidin新结构衍生物以及基于基因组信息的新型天然产物挖掘奠定了基础。

贵州都匀一种聚筛蕊地衣粗多糖的提取及抑菌活性初探

目的对采自贵州都匀斗篷山景区的一种枝状地衣聚筛蕊进行粗多糖的提取并开展抑菌活性研究,为寻找聚筛蕊地衣天然抗菌成分及该地衣的开发利用提供依据。方法通过形态学对地衣进行鉴定;用水提醇沉法提取地衣的粗提物,用苯酚-硫酸法测定粗提物的含量;通过琼脂平板打孔法评价该粗提物对10种供试菌株的抗菌活性。结果该地衣经形态学特征鉴定为聚筛蕊Cladia aggregate(Sw.) Ny1.;在料液比1∶30(m:v)、温度80℃、次数3次、时间为3 h的条件下,粗多糖含量为19.64 mg/g;抑菌实验结果显示该粗多糖提取物对10种供试菌均不显示抑菌活性。结论首次开展都匀斗篷山景区一种聚筛蕊地衣的粗多糖提取及抗菌活性研究,为该物种的开发利用提供科学依据。

20(S)-羟基乙酸喜树碱酯中间体的制备

目的本研究旨在制备20(S)-羟基乙酸喜树碱酯中间体,该中间体可以与其他抗肿瘤药物发生偶联反应进而合成得到一系列双靶点抗肿瘤药物。方法以喜树碱和苄氧乙酸为原料,在4-二甲氨基吡啶和N,N'-二异丙基碳二亚胺催化剂存在下合成20(S)-羟基乙酸喜树碱酯中间体产物。结果通过两步反应成功合成20(S)-羟基乙酸喜树碱酯中间体,并对第二步的反应条件进行了筛选优化;结果表明,用10%Pd/C/H 2/二氯甲烷的条件完成制备目标中间体,产物收率较高且副产物少。结论本文设计的方法不仅可以成功合成目标产物,且副反应少、目标产物收率较高。

半乳糖化胆固醇配体修饰去甲斑蝥素脂质体的制备及表征

以半乳糖和胆固醇氯甲酸酯为底物,通过化学反应合成半乳糖-胆固醇偶联物,并经1H NMR、13C NMR和HRMS确证了产物的结构。以此为配体,采用薄膜超声分散法制备半乳糖化胆固醇配体修饰的去甲斑蝥素脂质体,通过单因素试验和正交设计优化处方。结果所得优化工艺为:磷脂与半乳糖化胆固醇的质量比3∶1,药脂比1∶12,溶胀时间30 min。优化脂质体的包封率为(50.75±1.61)%,载药量为(7.85±2.16)%,平均粒径为(128.4±5.7)nm,平均ζ电位(-22.78±1.80)mV;与去甲斑蝥素溶液相比,优化脂质体的体外释放呈现出一定的缓释特征。