高校科研实验室安全管理现状分析及整改措施

高校实验室是培养创新型人才的重要基地,同时也是高校安全隐患存在较多的场所。实验室的安全管理是教育系统安全工作的重点,也是不可逾越的红线,实验室安全是校园安全稳定和师生生命安全的重要保障。文章从实验室安全管理的现状、安全问题的原因分析以及整改措施3个方面进行探讨,旨在让安全从理论变成实际,切实保证高校科研实验室安全运行。

异功散通过调控脑水液代谢改善APP/PS1转基因小鼠的学习记忆能力

目的观察异功散对APP/PS1小鼠学习记忆能力的影响,并从调控脑水液代谢系统探讨异功散抗痴呆的作用机制。方法将3月龄雄性APP/PS1转基因小鼠及同龄同背景野生型C57BL/6小鼠随机分为4组(8只/组):对照组、模型组、多奈哌齐(1.67 mg/kg)组、异功散(7.5 g/kg)组。灌胃给予各组对应药物1次/d,1月后采用Morris水迷宫实验考察小鼠的学习记忆能力;HE染色观察海马皮层组织病理形态学变化;免疫组化染色、硫磺素S染色观察脑内淀粉样蛋白斑块数量变化;ELISA法检测脑组织和血清Aβ_(1-40)和Aβ_(1-42)含量;伊文思蓝法检测血脑屏障(BBB)通透性变化;免疫荧光共定位考察AQP4在星型胶质细胞上极化情况;Western blotting观察血管内皮钙黏蛋白(VE-cadherin)、闭锁连接蛋白1(ZO-1)、闭合蛋白(Occludin)、β-淀粉样前体蛋白(APP)、β-分泌酶(BACE1)、胰岛素降解酶(IDE)、低密度脂蛋白受体相关蛋白1(LRP1)、晚期糖基化终末产物受体(RAGE)、水通道蛋白4(AQP4)蛋白表达情况。结果与对照组比较,APP/PS1小鼠第5天的逃避潜伏期显著延长(P<0.001),平台象限停留时间降低(P<0.05);海马和皮层神经细胞变性或坏死细胞数量增加且病理评分升高(P<0.001);Aβ阳性斑块明显升高以及硫磺素S荧光强度明显增强(P<0.05);脑组织和血清Aβ_(1-40)、Aβ_(1-42)含量升高(P<0.05);BBB通透性增加(P<0.01),RAGE蛋白表达上调(P<0.01)而VE-cadherin、LRP1、ZO-1、Occludin、AQP4蛋白表达下调(P<0.05),且AQP4在GFAP阳性细胞上表达的数量减少(P<0.05)。与模型组比较,异功散组小鼠第5天的逃避潜伏期缩短(P<0.001),平台象限停留时间增加(P<0.05)且平均游泳速度加快(P>0.05);海马和皮层神经细胞变性或坏死细胞数量减少且病理评分降低(P<0.01);Aβ阳性斑块减少以及硫磺素S荧光强度减弱(P<0.05);脑组织和血清Aβ_(1-40)、Aβ_(1-42)含量降低(P<0.05);维持了BBB通透性(P<0.01),RAGE蛋白表达下调(P<0.05),而VE-cadherin、LRP1、ZO-1、Occludin、AQP4蛋白表达上调(P<0.05),且AQP4在GFAP阳性细胞上表达的数量明显增加(P<0.01)。结论异功散能够通过改善APP/PS1小鼠脑内神经细胞损伤、Aβ病变,调控脑水液代谢系统相关蛋白表达而改善学习记忆变化。

基于TNF-α/TNFRs信号探讨党参异功散防治阿尔兹海默病的作用机制

目的探讨党参异功散对D-半乳糖诱导的阿尔兹海默病(AD)小鼠学习记忆能力的影响及其作用机制。方法(1)通过网络药理学方法分析得到党参异功散治疗AD的潜在作用靶点,对潜在作用靶点进行蛋白互作(PPI)网络分析,然后通过Cytoscape软件的CentiScaPe插件分析出关键靶点,并对其进行KEGG通路富集分析。(2)将雄性KM小鼠随机分为空白组、模型组、安理申组(1.5 mg·kg^(-1))及党参异功散高(7.5 g·kg^(-1))、低(3.75 g·kg^(-1))剂量组,每组8只。除空白组外,其余各组小鼠颈背部皮下注射200 mg·kg^(-1)D-半乳糖复制AD小鼠模型,每天1次,连续30 d;同时给药组每天以相应剂量药物灌胃(10 mL·kg^(-1)),每天1次,连续30 d。给药第26天至第30天进行Morris水迷宫实验,检测小鼠学习记忆能力。采用HE染色法观察小鼠海马组织病理变化,并进行海马受损神经细胞病理评分;免疫荧光法检测小鼠海马组织胶质纤维状酸性蛋白(GFAP)、离子钙结合适配器分子1(IBA1)及突触素(Synaptophysin)的表达;ELISA法测定小鼠海马及皮层组织中谷氨酸、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素10(IL-10)、转化生长因子α(TGF-α)、TGF-β水平;Western Blot法检测小鼠海马及皮层组织中肿瘤坏死因子受体1(TNFR1)、肿瘤坏死因子受体2(TNFR2)蛋白表达水平。结果(1)共得到党参异功散治疗AD的潜在作用靶点187个,关键靶点38个,涉及107条与AD疾病相关的信号通路,包括神经TNF信号通路、PI3K-Akt信号通路、MAPK信号通路、IL-17信号通路等。(2)与空白组比较,模型组小鼠的第5天逃避潜伏期显著延长(P<0.01),穿越平台象限次数及停留时间明显减少(P<0.05);海马神经细胞排列紊乱,部分细胞缺失,细胞间隙变大,并可见细胞核固缩、变性或死亡,病理评分显著升高(P<0.01);海马组织的GFAP、IBA1阳性表达面积比显著升高(P<0.01),Synaptophysin阳性表达面积比显著降低(P<0.01);脑组织中谷氨酸、TNF-α、TGF-α、TGF-β含量均显著升高(P<0.01),IL-10含量显著降低(P<0.01);脑组织TNFR1蛋白表达明显上调(P<0.05),TNFR2蛋白表达显著下调(P<0.01)。与模型组比较,党参异功散高、低剂量组小鼠穿越平台象限次数及停留时间明显增加(P<0.05,P<0.01);海马神经细胞排列相对整齐、紧密,结构清晰,偶见个别神经细胞变性或死亡,病理评分明显降低(P<0.05,P<0.01);海马组织的GFAP、IBA1阳性表达面积比显著降低(P<0.05,P<0.01),Synaptophysin阳性表达面积比显著升高(P<0.01);脑组织中谷氨酸、TNF-α、TGF-α含量均显著降低(P<0.01),IL-10含量显著升高(P<0.01);党参异功散高剂量组小鼠第5天的逃避潜伏期显著缩短(P<0.01),脑组织TNFR1蛋白表达明显下调(P<0.05),TNFR2蛋白表达明显上调(P<0.05);党参异功散低剂量组小鼠脑组织中TGF-β含量显著降低(P<0.01)。结论党参异功散能够提高D-半乳糖诱导AD小鼠的学习记忆能力,并改善海马组织病理损伤,其作用机制可能与调控脑内TNF-α/TNFRs信号减轻神经炎症反应有关。

基于CX3CL1介导的炎症反应研究淫羊藿苷对缺氧诱导的肺动脉高压小鼠的作用

目的研究淫羊藿苷改善缺氧性肺动脉高压(hypoxic pulmonary hypertension,HPH)作用与趋化因子C-X3-C基元配体1(chemokine C-X3-C motif ligand 1,CX3CL1)介导的炎症反应的关系。方法将40只C57BL/6J雄性野生型(wide type,WT)小鼠随机分为对照组、WT模型组和WT+淫羊藿苷(10、20 mg/kg)组,20只雄性CX3CL1-/-小鼠分为CX3CL1-/-模型组和CX3CL1-/-+淫羊藿苷(20 mg/kg)组。除对照组外,各组均于含氧量为10%的低氧环境中连续饲养21 d,于低氧饲养7 d后ig淫羊藿苷2周。采用小动物超声仪检测小鼠肺动脉血流速度和右心室血流动力学,测量右心室肥厚指数(right ventricular hypertrophy index,RVHI);采用苏木素-伊红(HE)和Masson染色观察小鼠肺小动脉重构情况;采用ELISA法检测小鼠血清中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)水平;采用Western blotting检测小鼠肺组织CX3CL1和核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)通路相关蛋白表达情况。结果与对照组相比,WT模型组小鼠肺动脉血流速度明显降低(P<0.05),RVHI显著增大(P<0.05),右心室收缩末期直径、收缩末期容积和每博输出量升高(P<0.05),右心室短轴缩短率和射血分数降低(P<0.05),肺小动脉重构明显。与WT模型组相比,淫羊藿苷能够增加WT小鼠肺动脉血流速度(P<0.05),降低RVHI、右心室收缩末期直径、收缩末期容积和每博输出量(P<0.05),升高右心室短轴缩短率和射血分数(P<0.05),肺小动脉重构明显改善,同时,淫羊藿苷降低血清IL-1β和TNF-α水平以及肺组织CX3CL1蛋白表达水平(P<0.05),抑制NF-κB通路相关蛋白表达水平(P<0.05)。与WT模型组相比,CX3CL1-/-模型组小鼠肺动脉血流速度、肺小动脉重构、右心室血流动力学均有改善(P<0.05),血清IL-1β和TNF-α水平降低(P<0.05)。敲除CX3CL1-/-后,淫羊藿苷(20 mg/kg)对HPH小鼠的改善作用减弱甚至消失。结论淫羊藿苷能够通过抑制CX3CL1介导的炎症反应改善小鼠HPH。