酪氨酸激酶抑制剂治疗P230慢性髓系白血病临床疗效观察

目的:观察酪氨酸激酶抑制剂(TKI)治疗e19a2转录本(P230)慢性髓系白血病(CML)慢性期患者的疗效。方法:收集2008年7月至2019年12月11例P230 CML慢性期患者临床资料,初诊时进行血常规、骨髓细胞学、染色体和BCR-ABL定性和定量检测,接受TKI治疗后,定期通过实时定量PCR方法检测外周血BCR-ABL(P230)/ABL评估分子学反应。结果:来自国内6家医院11例患者中男性7例,女性4例,中位年龄为46(19-56)岁。11例患者均处于慢性期,4例先接受伊马替尼(400 mg,qd)治疗的患者,由于在规定的时间界点未达到最佳分子学反应或出现ABL激酶区突变,其中3例改为尼洛替尼(400 mg,bid)治疗,1例改为达沙替尼(100 mg,qd)治疗,之后均在1年内获得主要分子学反应。另外5例使用尼洛替尼(300 mg,bid)、2例使用达沙替尼(100 mg,qd)作为一线治疗的患者在6个月内获得了主要分子学反应。结论:对伊马替尼不耐受或疗效不佳的P230 CML患者,二代TKI可使其达到更深层次分子学反应,且能在更短时间达到主要分子学反应。

尾静脉注射THP-1细胞构建急性髓系白血病NOD/SCID小鼠模型及其鉴定

目的:应用THP-1细胞构建NOD/SCID小鼠白血病模型。方法:将18只3-4周龄的雌性NOD/SCID小鼠,随机分为对照、模型A和模型B 3组(每组6只)。接种前连续2 d每只小鼠给予腹腔注射环磷酰胺2 mg/(kg·d),预处理后于24 h内接种细胞。模型组分别经尾静脉接种对数生长期THP-1细胞悬液1×10^7/只(A组)、5×106/只(B组),对照组鼠尾静脉注射等剂量生理盐水。观察一般情况,预处理前、接种细胞后7、14、21和28 d及处死时进行血常规检测、外周血白细胞分类,濒死前处死取材,组织切片病理检查。结果:模型组小鼠分别于接种细胞d 7和d 10开始出现竖毛、萎靡少动等现象,与对照组比较,模型A和B 2组小鼠体重于接种细胞21 d后明显下降(P<0.01),建模28 d后模型组白细胞数明显升高,差异有统计学意义(P<0.01),其中以接种1×10^7/只的模型A组最为显著。病理组织切片结果提示,模型组小鼠脾脏均可见白血病细胞弥漫性浸润。免疫组织化学结果提示,白血病细胞抗人CD13结果阳性,证实模型建立成功。结论:NOD/SCID小鼠经腹腔注射CTX预处理后,每只小鼠尾静脉注射THP-1细胞1×10^7或5×10^6个均可成功构建急性髓系白血病动物模型,符合急性髓系白血病的生物学特点,高浓度成瘤更快。

PTEN基因在急性T淋巴细胞白血病患者中的表达水平及临床价值

目的:研究急性T淋巴细胞白血病患者PTEN基因表达水平及临床意义。方法:选取自2014年1月-2018年5月在本院接受治疗的T-ALL患者124例,同时选取120例健康体检者作为对照组,收集受试者骨髓后分离单个核细胞,通过RT-PCR检测PTEN基因表达水平,采用Western blot检测PTEN蛋白表达水平,Kaplan-Meier法对T-ALL患者进行生存分析,Cox多因素分析患者预后的独立影响因素,并研究PTEN基因水平与T-ALL患者临床特征的相关性及其预后价值。结果:T-ALL患者的PTEN基因相对水平(0.19±0.06)显著低于健康者(P<0.05)。PTEN表达水平与T-ALL患者的白细胞计数(r=0.993)及外周血幼稚细胞(r=0.996)呈显著相关关系。PTEN基因表达水平与T-ALL患者的性别、年龄、LDH水平、Hb水平及血小板数无相关性。中危组、标危组及高危组患者PTEN蛋白表达水平显著低于对照组(P<0.05);高危组患者PTEN蛋白表达水平显著低于其它各组(P<0.05)。PTEN基因高表达组的OS及DFS均高于PTEN低表达组(P<0.05)。Cox多因素回归分析表明,白细胞计数及PTEN基因是OS独立影响因素(P<0.05);血小板计数及PTEN基因是DFS独立影响因素(P<0.05)。结论:PTEN基因水平与T-ALL患者预后相关,预后较好的患者PTEN基因水平较高。

主动载药方式石斛碱脂质体的制备研究

目的:石斛碱具有退热、止痛作用,还可降低心率、血压,减慢呼吸,使血糖中度升高,同时还可解巴比妥中毒。但石斛碱难溶于水、生物利用度低,限制了其在临床方面的应用。脂质体有靶向性,缓释性,降低药物毒性和提高药物稳定性等特点,运用主动载药方式将提高脂质体的稳定性、包封率。本次试验旨在探究石斛碱脂质体的制备,为石斛碱制备脂质体剂型提供参考依据。方法:乙醇加热回流提取石斛碱,经减压蒸馏浓缩,冷冻干燥、重结晶得到石斛碱。乙醇注入-超声分散法制备空白脂质体,pH梯度法主动载药方式包封药物。结果:柱分离度为0.72,包封率为96.7%,在透射电镜下观察其形态粒径,为分布均匀的圆球形,平均粒径约为20~50 nm。结论:在制备石斛碱脂质体时,采用主动载药方式能得到质粒均一,包封率较高,稳定性较好地脂质体。

NAP、NLR及CD64在肿瘤化疗合并细菌感染患者早期诊断的意义

目的探讨中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)、中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)及中性粒细胞表面(CD64)在肿瘤化疗合并细菌感染患者早期诊断的意义。方法选取2016年1月-2018年12月我院收治的200例肿瘤化疗后合并感染患者进行回顾性分析。应用流式细胞仪检测中性粒细胞表面CD64指数,全自动五分类细胞分析仪测定中性粒细胞与淋巴细胞比值,测定人NAP。结果真菌组、细菌组和病毒组患者体内NAP、NLR及CD64水平比较,细菌组患者NAP、NLR及CD64水平最高,真菌组、细菌组和病毒组患者体内NAP、NLR及CD64阳性检出的单独检出率明显低于三指标的联合检测率,差异具有统计学意义(均P<0.05)。真菌组、细菌组和病毒组患者体内NAP、NLR及CD64的联合检出率、灵敏度、特异性、阳性预测值和阴性预测值明显高于各指标的单独检出。结论NAP、NLR及CD64联合诊断在肿瘤化疗合并细菌感染患者的早期诊断中具有重要意义,特异性强,灵敏度高。

金钗石斛总生物碱脂质体对胃癌SGC-7901细胞的影响

目的探讨金钗石斛总生物碱脂质体对胃癌SGC-7901细胞增殖、凋亡和侵袭的影响及其作用机制。方法分别用0.2、0.4、0.6、0.8和1.0 mg/mL金钗石斛总生物碱脂质体作用于SGC-7901细胞24、48和72 h,采用MTT检测细胞增殖情况,流式细胞计数法检测细胞凋亡情况,Transwell检测细胞侵袭情况,蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和Caspase-3表达水平。结果采用不同浓度金钗石斛总生物碱脂质体作用于SGC-7901细胞后,细胞的增殖抑制率增加,差异均有统计学意义,均P<0.05。0.2、0.4和0.6 mg/mL金钗石斛总生物碱脂质体作用于SGC-7901细胞48 h后,细胞凋亡率分别为(6.23±0.60)%、(15.00±2.31)%和(24.10±1.50)%,对照组为(2.87±0.55)%,差异有统计学意义,均P<0.05;细胞侵袭数分别为44±4、32±5和22±4,对照组为57±6,差异有统计学意义,均P<0.05;凋亡相关蛋白Bax和Caspase-3表达水平明显升高(均P<0.05),Bcl-2表达水平明显降低,P<0.05。结论金钗石斛总生物碱脂质体能够明显抑制胃癌SGC-7901细胞增殖、促进细胞凋亡和抑制细胞侵袭,其作用机制可能与Bcl-2/Bax/Caspase-3信号通路有关,金钗石斛总生物碱脂质体可能成为胃癌治疗的药物。