工程化间充质干细胞来源外泌体在靶向递送抗肿瘤药物中的应用与问题

背景:间充质干细胞来源外泌体具有免疫原性低且肿瘤归巢能力强等优点,在靶向递送药物方面备受关注。但外泌体在到达靶细胞前易被体内循环迅速清除,此外,由于外泌体表面性质和摄取机制复杂,其靶向性并不十分明显,需要一定的工程化策略提高递送效率。目的:通过综述间充质干细胞来源外泌体工程化修饰的不同策略,了解提高外泌体递送效率的相关机制、临床前应用和面临的问题,为进一步临床应用提供理论依据。方法:检索中国知网、维普、万方、PubMed数据库从建库至2024年的相关文献,检索词为“间充质干细胞,外泌体,工程化外泌体,靶向递送,抗肿瘤药物”和“mesenchymal stem cells,exosomes,engineered exosomes,targeted delivery,antineoplastic agents”,筛选工程化间充质干细胞来源外泌体靶向递送抗肿瘤药物的文献,共计纳入85篇文献进行综述分析。结果与结论:(1)间充质干细胞来源外泌体的工程化修饰复杂多样,可通过显著增强外泌体对器官或组织靶向能力,增加血液循环中停留时间,以及降低外泌体中促肿瘤分子的表达,以此达到提高外泌体递送效率的效果;(2)间充质干细胞外泌体在目前的抗肿瘤治疗研究中递送传统和新型药物具有巨大前景;(3)当前仍然存在一些安全问题不能将其转化在临床中,未来的研究将进一步改进和深入研究递送机制,有望开发出更为高效和安全的治疗策略。

省级重点实验室细胞工程技术平台产学研用开放共享的实践探索

以细胞工程及其治疗学研究为特点的省级重点实验室,在科研、人才培养和社会服务中,形成了3个具有特色和优势的研究方向,拥有科研能力强的管理和专业技术团队,建立了较为完善的先进科研平台和平台开放管理机制。在长期坚持产学研用开放共享的过程中,实验室不断强化先进平台建设和技术水平提升;在贯彻国家有关细胞制剂研发政策与法规的同时,加强体系建设与规程的落实;通过基础学科与临床学科的融合发展,积极推进产学研用结合,通过科研基本技能培训和学术、技术交流,提升科研效益和科技产出质量,坚持“三级管理”,推进科研“学术带头人负责制”与平台技术“技术负责人负责制”,以临床需求为纽带,促进学科群发展与合作共赢,通过新兴交叉学科建设与研究方向交叉,促进前沿科学研究、临床技术孵化、产业资源存储、干细胞新药研发与高层次人才培养的协调发展。因此,面向创新型国家建设和高质量发展的新形势和新要求,本文旨在分享省级重点实验室细胞工程技术平台开放共享20年的主要管理和运行经验,并结合“产学研用”案例,提供学科交叉、协同创新的服务医疗需求的实践探索与思考。

间充质干细胞及细胞外囊泡治疗肺纤维化的现状与未来

背景:尽管在临床上采取了一系列的治疗措施,肺纤维化的治疗仍然面临着挑战。在近年的研究中,间充质干细胞及其细胞外囊泡作为一种新兴的治疗策略引起了广泛关注,被认为可能是治疗肺纤维化的有希望的手段。目的:综述间充质干细胞及其细胞外囊泡在肺纤维化治疗方面的应用,以期全面了解其治疗机制、疗效评估和面临的问题,为未来进一步研究和临床应用提供参考和指导。方法:中文检索词为“间充质干细胞”“间充质干细胞细胞外囊泡”“肺纤维化”;英文检索词为“mesenchymal stem cells”“mesenchymal stem cell extracellular vesicles”“pulmonary fibrosis”,检索中国知网和PubMed电子期刊数据库,通过人工阅读排除重复文献等,最终纳入112篇文献,重点对58篇中英文文献进行归纳总结。结果与结论:①间充质干细胞及其细胞外囊泡可以通过多种机制抑制纤维化过程,如调节炎症反应、抑制成纤维细胞增殖和促进受损组织修复,临床试验的初步结果也显示出一定的治疗效果,包括改善患者的肺功能和生活质量。②然而,间充质干细胞及其细胞外囊泡治疗肺纤维化仍面临一些挑战。在治疗过程中需要解决细胞迁移和组织内定位等问题,以其能够准确到达受损肺组织。另外,长期安全性问题也有待进一步研究改进。对于其转化医学发展,细胞采集、细胞分离、细胞培养、细胞收获和细胞鉴定等标准化程序还需要被细化。③尽管面临这些挑战,但通过科研工作者和医务人员的共同努力,这些问题有望得到逐步解决。未来,可以通过优化治疗方案和探索个体化治疗进一步提高治疗效果。同时,深入研究间充质干细胞及其细胞外囊泡的治疗机制,有望开发出更为高效和安全的治疗策略。

羊膜间充质干细胞经PGE2/EP2途径调节类风湿关节炎患者T细胞免疫

目的探讨人羊膜间充质干细胞(AMSCs)调节类风湿性关节炎(RA)患者T细胞免疫的作用与涉及PGE2/EP2途径的机制。方法含RA患者自体血浆的培养基非接触共培养AMSCs与RA患者外周血来源T细胞,实验分为T细胞组、AMSCs组、共培养组和EP2组,流式细胞术检测T细胞亚群和炎症因子,ELISA法检测PGE2和IL-6,Western blot检测PI3K、Akt及其磷酸化蛋白水平。结果AMSCs降低RA患者T细胞增殖数量和Th17细胞比例,增高Treg细胞比例和Treg/Th17比值,减少共培养上清液IL-17含量,这些效应可被40 nmol/L的EP2受体拮抗剂AH6809所阻断。与AMSC组相比,共培养组细胞培养上清液中IL-1β、IL-6和IL-8的含量明显降低,EP2受体拮抗剂组与共培养组比较无明显差异。AMSCs增加T细胞p-PI3K蛋白水平,降低p-AKT蛋白水平,EP2受体拮抗剂只逆转AMSCs对p-AKT蛋白的下调。结论AMSCs抑制RA患者T细胞增殖、上调Treg/Th17和下调IL-17分泌的作用机制涉及激活PGE2/EP2途径。

贵州省7个民族群体的遗传关系比较研究

目的基于15个常染色体短串联重复序列(STR)基因座,探究贵州汉族与苗族与5个不同民族人群的遗传关系。方法通过15个STR基因座的等位基因频率数据,应用Arlequin v3.5软件计算各基因座的遗传分化系数Fst及P值,应用Phylip 3.695软件计算7个群体的Nei’s遗传距离,应用TBtools软件进行可视化热图和聚类分析;基于Nei’s遗传距离,分别采用MEGA 7.0和SPSS 26.0软件构建系统发生树和主成分分析。结果遗传分化系数Fst及P值显示,贵州汉族或苗族群体分别与布依、水、仡佬、侗和土家族5个群体比较,遗传分化程度都较低(Fst分别介于0.00002~0.02567和0.0002~0.0377),但是汉族与苗族群体比较时显示出相对较高的遗传分化程度(Fst介于0.00111~0.01861)。Fst及P值、Nei’s遗传距离、热图、系统发生树和主成分分析的结果均显示,贵州汉族与仡佬族、侗族和土家族的遗传关系最近,与水族和布依族的遗传关系相对较远,与苗族的遗传关系最远。且苗族与布依、水、仡佬、侗和土家族5个民族之间遗传关系较远。结论贵州汉族与苗族群体之间遗传差异最大,而苗族与布依族、水族、仡佬族、侗族和土家族5个少数民族之间遗传差异均较大。

糖尿病皮肤慢性创面无细胞治疗的进展与问题

背景:糖尿病皮肤溃疡是糖尿病的难治并发症之一,发生后迁延不愈。以往研究发现,间充质干细胞具有组织修复和炎症免疫调节能力,并且相关研究表明间充质干细胞可能主要是通过旁分泌效应分泌各种细胞因子和外泌体等,发挥组织与创面修复作用。因而可使用生长因子、间充质干细胞条件培养基及外泌体等治疗糖尿病皮肤慢性创面,以直接或间接机制对伤口愈合产生积极影响。目的:总结生长因子、条件培养基和外泌体等促进糖尿病皮肤慢性创面修复的相关机制、应用效果,以及无细胞治疗在当前研究的局限性。方法:由第一作者检索PubMed及Web of Science数据库中收录的相关文献,检索词为“Diabetes,Diabetic foot,Diabetic foot ulcers,Chronic wound,Mesenchymal stem cells,Cell-free,Exosomes,Growth factors,Conditioned mediums,Wound healing,Tissue repair,Angiogenesis,Regeneration,Biomaterial”,文献检索时限为2005年1月至2022年2月,经过阅读并筛选整理,选择与综述内容相符的文献,最终确定整理出75篇文献进行综述。结果与结论:①间充质干细胞条件培养基、外泌体和生长因子可通过不同机制改善局部微环境,促进慢性创面的愈合;②通过条件培养基、外泌体和生长因子与新兴的组织工程生物学材料(如细胞支架、水凝胶等)相结合,可使其发挥更强的促进慢性创面愈合的作用;③基于间充质干细胞条件培养基、外泌体、生长因子的无细胞疗法是促进慢性创面修复的极有前景的治疗策略,要实现由临床前研究转化到临床研究,确保其用于患者治疗的安全性,还需要进行更多的研究,以查明相应的治疗作用机制。

干细胞衍生的外泌体在肝脏疾病治疗中的作用

肝脏容易受多种病因影响发生肝损伤,严重情况下可引起其合成、解毒、代谢和生物转化等功能发生障碍,当前针对肝衰竭、失代偿性肝硬化等终末期肝病仍缺乏高效的临床治疗手段。近年来间充质干细胞的临床疗效已被证实,基于干细胞外泌体的相关治疗成为研究热点。本文介绍了干细胞外泌体治疗的优势、机制研究进展、临床前研究现状等。从目前研究结果来看,干细胞衍生的外泌体治疗肝脏疾病具有良好应用前景,但临床前研究仍需进一步深入,临床研究有待开展。

miR-505通过靶向核因子-κB调控脂多糖诱导的巨噬细胞活性研究

目的:探讨究微小RNA 505(miR-505)通过靶向调控核因子-κB(NF-κB)对小鼠巨噬细胞(RAW264.7)活性的影响。方法:通过生物信息学方法预测miR-505和NF-κB潜在的结合位点,扩增NF-κB基因的3’端非编码区,同时对结合位点进行突变,将野生型(WT)及突变型(MUT)序列克隆至pSicheck2载体中,进行双荧光素酶报告实验。利用Liposome 3000将miR-505 mimics及inhibitor转染至RAW264.7细胞中,逆转录聚合酶链反应(Real-time PCR)及Western blot实验检测miR-505、NF-κB的表达。用脂多糖(LPS)及miR-505共处理RAW264.7细胞,采用CCK-8实验检测细胞的活力,ELISA检测炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)的表达。结果:双荧光素酶结果表明miR-505可与NF-κB的3’UTR端结合,且miR-505与NF-κB的表达呈负相关。CCK8结果提示miR-505可抑制LPS对RAW264.7细胞的毒性作用;ELISA结果表明miR-505可抑制LPS作用下炎症因子TNF-α和IL-6的分泌。结论:miR-505可通过靶向作用NF-κB基因以抑制TNF-α和IL-6的分泌,并降低LPS对RAW264.7细胞的损伤。

半乳糖凝集素-9(Gal-9)介导的免疫调节作用在肝脏疾病中的研究进展

半乳糖凝集素-9(Gal-9)是能够特异性识别、结合半乳糖苷的半乳糖凝集素家族成员之一。近年研究发现,Gal-9在肝脏中高水平表达,有助于维持肝内免疫稳态并在多种肝脏疾病中发挥生物学功能。本文综述了Gal-9的免疫调节功能及其在不同肝脏疾病中的作用。Gal-9在不同肝脏疾病中通过多种途径发挥重要的生物学功能,基于对Gal-9具体免疫调节机制和功能的研究,有助于发现Gal-9在肝脏疾病中的治疗作用。

hsa-miR-181a-5p靶基因预测及生物信息学分析

目的对hsa-miR-181a-5p进行系统的生物信息学分析,预测hsa-miR-181a-5p的靶基因、基因功能及信号通路,并对其进行生物学功能注释。方法利用数据库对hsa-miR-181a-5p基因定位,分析其序列保守性和在人类组织器官中的表达情况;利用数据库进行靶基因预测分析;并将预测交集靶基因进行GO功能分析及KEGG通路富集分析和蛋白间相互作用(PPI)网络分析;最后利用A549细胞进行hsa-miR-181a-5p转染实验,进行转录组测序同步验证生物信息学预测结果。结果发现基因定位于人类基因组chr1、chr9染色体,成熟序列在物种间具有高度保守性。3个数据库交集靶基因有483个,包含PTEN、MAPK8、AKT3等基因,其分布在胞浆等细胞组分,执行蛋白质结合等生物功能,并参与信号转导等生物学过程。靶基因富集于MAPK、PI3K-Akt、胰岛素抵抗、癌症中的miRNA等信号通路,其编码的蛋白间形成复杂网络图。实验后转录组测序结果验证了生信分析的准确性,对预测及富集结果提供了有力支撑。结论hsa-miR-181a-5p在多种生物学过程发挥重要作用,尤其是在神经系统疾病、血液免疫系统疾病以及癌症的发生发展中其将成为相关疾病发生机制和防治研究的新靶点。

肠道菌群对溃疡性结肠炎患者Th17/Treg平衡的调节作用

溃疡性结肠炎(UC)发病机制涉及遗传、免疫和环境等因素。辅助性T细胞17(Th17)和调节性T细胞(Treg)在UC发展过程中起相互拮抗的作用,二者之间的免疫失衡促进了UC的进展。肠道菌群失调是免疫失调,肠道微生物群作为影响Th17/Treg平衡的重要因素受到研究关注,UC患者存在肠道菌群失衡、微生物代谢物的改变、免疫失衡等机体稳态破坏。因此,通过调整肠道微生物群来纠正Th17/Treg失衡可能是治疗UC的新方法。

肝脏类器官在肝脏疾病模型与移植治疗中的应用潜力

背景:肝脏类器官对阐明肝脏疾病的确切病理机制及对肝脏疾病的治疗具有重要的意义。目的:总结目前国内外该领域的基础研究,回顾以往肝脏类器官的构建、疾病建模和移植治疗的重要研究进展,探讨肝脏类器官联合组织工程技术的应用前景。方法:检索PubMed数据库及中国知网数据库收录的相关文献,英文检索词为“liver,organoids,liver diseases”,中文检索词为“肝,类器官,肝脏疾病”,主要检索时限为2018年4月至2024年4月,通过人工阅读排除重复文献等,最终纳入94篇文献进行归纳分析。结果与结论:①肝脏类器官构建的种子细胞主要集中于成体细胞和多能干细胞,通过辅助各种细胞因子参与信号引导作用和细胞外基质提供3D微环境,促进类器官的产生,但是整体成熟度不高,有望通过结合组织工程技术改善这一问题;②体外疾病建模方面主要在简单疾病和单基因遗传病领域研究较多,类器官高度保留患者遗传特性,有望通过结合CRISPR-Cas9基因矫正和其他新兴技术模拟更复杂的肝脏疾病并阐明更深层次的病理机制;③体内移植治疗方面,肝脏类器官能够安全有效的植入,表现出惊人的肝功能替代潜力及组织再生能力,并且还可能通过与其他组织工程材料结合达到治疗目的。

间充质干细胞线粒体转移治疗修复组织损伤的作用

背景:间充质干细胞因其众多优点被应用于多种疾病治疗,线粒体转移是间充质干细胞疗法的重要机制之一。目的:综述间充质干细胞通过线粒体转移在各类组织损伤中发挥的作用。方法:由第一作者以“stem cells,mitochondrial transfer,cell communication,rescue and repair,tissue injury”为英文关键词,以“干细胞,线粒体转移,细胞通讯,修复,组织损伤”为中文关键词,检索2008至2019年期间收录在PubMed、中国知网、万方数据库中的文献,纳入间充质干细胞的线粒体转移作用和机制及治疗组织损伤相关的文献,排除重复与相关性弱的文献,对64篇文献进行总结分析。结果与结论:间充质干细胞被应用于如脑卒中、心肌梗死、急性肾功能衰竭等多种疾病治疗,线粒体转移作为干细胞治疗的一种新机制被人们广泛关注,已被认为是组织损伤的潜在疗法;线粒体转移已发现由隧道管形成、间隙连接、微囊泡、细胞融合和分离等不同模式介导,但线粒体转移在组织损伤中的具体机制还未完全阐明,其在组织损伤修复中的具体作用也有待进一步了解。

间充质干细胞在类风湿性关节炎治疗中的免疫调节作用

背景:间充质干细胞拥有强大的抗炎和免疫调节功能,有关其治疗类风湿性关节炎的实验研究已经深入开展,其可能成为临床治疗类风湿性关节炎的新方法,但具体的分子机制有待阐明。目的:为更好地理解间充质干细胞治疗类风湿性关节炎的分子机制,进一步补充间充质干细胞对炎症性关节炎保护作用方面的最新进展,探讨间充质干细胞移植治疗类风湿性关节炎效果的差异,期待这些成果能为开发精准化靶点治疗类风湿性关节炎的药物提供新思路。方法:检索PubMed、Elsevier、CNKI和万方数据库,查阅2008至2019年期间国内外有关类风湿性关节炎与间充质干细胞的文献。检索词分别为“类风湿性关节炎,间充质干细胞”和“mesenchymal stem cells,rheumatoid arthritis”。最后选择55篇文献纳入结果分析。结果与结论:类风湿性关节炎发病机制涉及多种免疫细胞的增殖、分化及多种炎症因子的失衡。间充质干细胞具有免疫调节功能,且对类风湿性关节炎具有明显治疗效果,在抑制T细胞增殖、上调Treg细胞比例、抑制B细胞功能和减少B细胞数量、影响树突状细胞成熟、诱导M2型巨噬细胞产生、抑制M1型巨噬细胞活化方面有重要作用。

间充质干细胞临床前研究启示:间充质干细胞的细胞功能与JAK/STAT信号通路的关系

背景:间充质干细胞是一种多能干细胞,具有强大的促进组织修复以及免疫调节功能,已成为再生医学领域重要的种子细胞来源。JAK/STAT信号通路作为许多细胞因子共用的信号通路,对间充质干细胞自身及其靶细胞功能均可产生广泛影响。目的:简述JAK/STAT信号通路与间充质干细胞的细胞功能关系的研究进展,为理解间充质干细胞功能变化的信号通路机制提供重要参考,并为相关间充质干细胞临床前研究提供理论借鉴。方法:以"间充质干细胞、JAK/STAT信号通路、组织分化、免疫调节"为中文检索词,以"mesenchymal stem cell,JAK/STAT,cell differentiation,immunomodulation"为英文检索词,检索万方数据、中国知网及PubMed数据库2001-2021年发表的相关文献,最终纳入48篇文献进行综述分析。结果与结论:间充质干细胞能通过细胞外分泌,影响靶细胞的JAK/STAT信号通路,产生逆转失调微环境的效应。间充质干细胞的成骨分化、免疫调节、适应性变化及归巢作用均与JAK/STAT信号通路相关:(1)在成骨分化上,成骨相关细胞因子激活JAK/STAT信号通路后,间充质干细胞可向成骨细胞分化;(2)在免疫调节上,JAK/STAT信号通路调控间充质干细胞表达相应表面抗原或释放细胞因子的表达,促进特定类型免疫细胞增殖;(3)在适应性变化上,JAK/STAT信号通路调控间充质干细胞使其在体内或体外培养环境拥有更高存活率;(4)在归巢作用上,JAK/STAT信号通路可调控间充质干细胞顺着释放趋化因子的靶细胞方向进行迁移。

间充质干细胞治疗脊髓损伤:细胞治疗及联合新药和生物材料

背景:脊髓损伤治疗主要为改善损伤部位炎症微环境以及神经功能的再生和修复。间充质干细胞具有体外易扩增、可多向分化及抑制继发性炎症、免疫调节等特性,使得对包括脊髓损伤在内的各种难治性组织损伤性疾病进行间充质干细胞移植治疗成为一种极有潜力的细胞治疗方式。目的:简述近年来间充质干细胞治疗脊髓损伤的临床前和临床研究,并提出间充质干细胞在试验研究中面临的问题和发展方向。方法:以“间充质干细胞,脊髓损伤,细胞移植,免疫调节,联合治疗,生物材料”和“mesenchymal stem cells,spinal cord injury,cell transplantation,immunomodulation,combination therapy,biomaterial”作为检索词,检索万方数据库、中国期刊全文数据库(CNKI)及PubMed数据库2000至2020年发表的相关文献。结果与结论:①不同来源的间充质干细胞在动物模型及临床试验中可发挥抗炎、诱导轴突及神经元再生的作用,有效改善受损部位的神经功能;②间充质干细胞来源外泌体在脊髓损伤动物模型中表现出免疫调节、促血管新生等作用;③为更大程度发挥间充质干细胞的潜能,进行细胞预处理、联合新药或联合生物材料等是间充质干细胞治疗脊髓损伤的研究方向。

炎症因子干预影响间充质干细胞的免疫调控特性

背景:间充质干细胞拥有强大的免疫调节能力,主要表现在调控免疫细胞的增殖、分化和功能状态,调节炎症因子的分泌等。间充质干细胞的免疫调节能力受炎症因子调控,依据微环境中炎症因子的种类、水平,间充质干细胞的免疫调节功能也会发生变化。目的:综述炎症因子影响间充质干细胞免疫调控特性的研究进展。方法:应用计算机检索PubMed数据库、Elsevier数据库、CNKI数据库,中文检索关键词或主题词为"间充质干细胞,免疫调节,可塑性,干扰素γ,转化生长因子β,白细胞介素17,白细胞介素35,前列腺素E2",英文检索关键词为"mesenchymal stem cells,immune regulation,plasticity,interferon gamma,transforming growth factor beta,interleukin17,interleukin 35,prostaglandin E2"。纳入炎症因子干预影响间充质干细胞免疫调控特性的相关文献。结果与结论:采用干扰素γ、转化生长因子β、白细胞介素17、白细胞介素35和前列腺素E2干预或预处理后,间充质干细胞的生物学特性随之改变,不但可重塑组织微环境、影响炎症反应,而且可重建免疫平衡,进而治疗疾病或缓解疾病进展。针对炎症、免疫反应的不同,在疾病的不同阶段进行合理的个体化、差异化治疗,都有望进一步提高间充质干细胞对免疫炎症性疾病的治疗效果。

低氧预处理人羊膜间充质干细胞的生物学特征

背景:干细胞移植治疗为许多疑难疾病带来了希望,但移植细胞存活数量少及分泌功能差,很难发挥治疗效用,致使该技术在临床应用受阻。低氧预处理可有效改善植入细胞的增殖活性、抗凋亡能力、分泌功能等生物学特性,因而,低氧预处理的人羊膜间充质干细胞有望在组织损伤修复中发挥更好的治疗作用。目的:探讨低氧预处理对人羊膜间充质干细胞生物学特征的影响。方法:利用机械法和酶消化法分离人羊膜间充质干细胞并传至第3代,将其低氧预处理(体积分数为3%O2)48 h,设置常氧(体积分数为21%O2)对照组,通过CCK-8及Edu增殖实验检测两组人羊膜间充质干细胞增殖活性及DNA合成率。将两组细胞用无血清培养基培养24 h后,Annexin V-FITC/PI实验检测细胞凋亡情况,收集上清液,采用血管生成蛋白芯片(Proteome Profiler)检测上清液中分泌的血管生成相关因子水平。结果与结论:低氧预处理不影响人羊膜间充质干细胞的干细胞特性,能提高人羊膜间充质干细胞的增殖活性;在无血清培养条件下,低氧预处理使人羊膜间充质干细胞的抗凋亡作用得到增强,同时分泌了更多量的血管相关生成因子。

miR⁃30b在低氧环境中调控兔骨髓间充质干细胞成软骨分化

目的针对软骨缺损难以自行修复的临床难题,探讨miR⁃30b调控兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)成软骨分化中的作用及潜在机制,为软骨修复提供新思路。方法密度梯度离心法分离BMSCs;流式细胞术和双向诱导分化实验鉴定细胞;CCK⁃8和Western blot检测细胞在不同CoCl_(2)浓度下增殖能力和HIF⁃1α表达变化情况;构建稳定表达miR⁃30b的细胞株,Western blot检测其靶基因SOX9和Wnt/β⁃catnein信号通路的表达;在低氧环境中成软骨诱导分化,21 d后Western blot和免疫组化染色检测CollagenⅡ与SOX9的表达。结果流式检测和双向分化实验结果显示细胞高表达CD29和CD34,低表达CD44和CD45,同时具有良好的分化能力。CCK⁃8结果表明CoCl2溶液诱导的低氧环境可促进BMSCs增殖(P<0.05),且低氧可促进细胞表达HIF⁃1α。稳定表达miR⁃30b的细胞在低氧环境中成软骨诱导21 d后,免疫组化和Western blot结果显示CollagenⅡ与SOX9的表达较对照组、空载组及低氧组均明显下调(P<0.01)。结论miR⁃30b能降低BMSCs在低氧环境中成软骨分化,为表观遗传学调控干细胞修复软骨缺损提供参考。

人参皂苷Rg1对CD133^+和CD34^+脐血造血干细胞增殖分化的影响

目的观察人参皂苷Rg1(ginsenosides Rg1, Rg1)对CD133^+和CD34^+人脐血造血干细胞(human umbilical cord blood hemopoietic stem cells, hUCB-HSCs)增殖、分化的影响。方法密度梯度离心及免疫磁珠法,富集、分选CD133^+和CD34^+ hUCB-HSCs,流式细胞术检测分选细胞纯度,0.1、0.3和3μmol/L的Rg1处理培养的hUCB-HSCs 14 d,显微镜下观察细胞形态,计数集落和细胞数。结果免疫磁珠分选所得CD133^+、CD34^+hUCB-HSCs的纯度分别为>90%和>80%,3个浓度的Rg1均不同程度的增加细胞数量,Rg1可促进CD133^+和CD34^+ hUCB-HSCs细胞增殖,增加爆式红系集落形成单位、粒-单集落形成单位集落生成(P<0.05),Rg1对两种HSCs增殖的数量及向红系细胞分化的影响相似,但使CD34^+hUCB-HSCs向粒系和单核系细胞分化的作用明显强于CD133^+hUCB-HSCs。结论 Rg1促进CD133^+和CD34^+ hUCB-HSCs增殖及向红系细胞分化的作用相当,但促CD34^+ hUCB-HSCs向粒单系细胞分化的作用更强。