非小细胞肺癌中TNC、USP22和Ki-67的表达及临床意义

目的探讨非小细胞肺癌中TNC、USP22和Ki-67的表达及与临床病理特征的关系。方法采用RT-PCR和免疫组化SP法联合检测46例非小细胞肺癌组织和癌旁正常组织中TNC、USP22和Ki-67的表达。结果TNC蛋白主要表达于非小细胞肺癌巢周围细胞外基质、基膜,且与非小细胞肺癌淋巴结转移、分化程度和临床分期相关(P<0.05);USP22和Ki-67蛋白主要表达于非小细胞肺癌细胞胞核,且与非小细胞肺癌淋巴结转移、分化程度和临床分期呈正相关(P<0.05)。非小细胞肺癌中TNC、USP22和Ki-67 mRNA表达均增强(P<0.01)。结论TNC可抑制非小细胞肺癌的浸润、转移,USP22和Ki-67可作为非小细胞肺癌患者预后指标,联合检测TNC、USP22和Ki-67的表达,可为临床治疗非小细胞肺癌及预后判断等提供参考。

前列腺导管内癌的病理特征及临床意义

目的探讨前列腺导管内癌(IDC-P)的临床病理学特点、诊断及鉴别诊断。方法回顾性分析127例Gleason分级4级且Gleason评分8分的前列腺腺癌HE切片,对28例疑似IDC-P的病例采用免疫组织化学EnVison法标记P504s、CKH和p63,对符合IDC-P的病例进一步行PTEN、ERG及AR的表达,并同期比较含IDC-P及不含IDC-P的前列腺癌根治性病例的临床病理资料。结果 17例患者病理切片中含有IDC-P。组织学上IDC-P以筛状结构为主伴显著的细胞异型性,肿瘤细胞均表达P504 s,细胞周围基底细胞CKH及p63阳性。临床病理特点:含IDC-P病例患者的血清前列腺特异性抗原(PSA)水平为(131.98±64.56)ng/ml,高于不含IDC-P的前列腺腺癌患者(33.47±10.31)ng/ml,差异有统计学意义(t=2.670,P<0.05)。9例含IDC-P的前列腺腺癌与45例不含IDC-P的前列腺癌根治性切除标本对比,含IDC-P病例的精囊腺侵犯、盆腔淋巴结转移率、脉管内癌栓、前列腺外周纤维脂肪组织侵犯及手术切缘阳性率均高于非IDC-P病例组,差异有统计学意义(χ~2=4.811、12.150、5.400、3.972、9.334,P<0.05)。随访17例含IDC-P的前列腺癌患者,5例患者出现骨转移;78例不含IDC-P病例,6例患者出现骨转移。随访时间为2~16个月,含IDC-P的前列腺癌骨转移率高于非IDC-P的前列腺癌病例(χ~2=0.048,P<0.05),差异有统计学意义。结论在Gleason分级4级的前列腺腺癌病例中,CKH及p63免疫组织化学标记有助于识别IDC-P。由于IDC-P提示疾病进展快,预后差,需引起临床及病理医生的高度重视。

马钱子碱对IL-6诱导宫颈癌HeLa细胞生物学行为的影响

目的:探讨马钱子碱对IL-6诱导的宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移和侵袭的影响和可能机制。方法:马钱子碱作用于IL-6诱导的HeLa细胞后,细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞活力,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭,RT-qPCR检测miR-34a-5p表达,Western blot检测β-连环蛋白(β-catenin)表达。将miR-34a-5p模拟物、抑制物分别转染至HeLa细胞,检测上调或下调miR-34a-5p表达对IL-6处理的HeLa细胞活力、迁移侵袭及miR-34a-5p表达的影响。结果:马钱子碱作用于IL-6诱导的HeLa细胞后,细胞活力显著降低,迁移和侵袭细胞数显著减少,miR-34a-5p和β-catenin蛋白表达显著升高(P<0.05)。上调miR-34a-5p表达,IL-6诱导的HeLa细胞活力显著降低,迁移和侵袭细胞数显著减少(P<0.05)。下调miR-34a-5p表达,IL-6诱导的HeLa细胞活力显著提高,迁移和侵袭细胞数显著增多(P<0.05)。下调miR-34a-5p表达可降低马钱子碱对IL-6作用的HeLa细胞活力、迁移和侵袭及β-catenin表达的影响(P<0.05)。结论:马钱子碱可抑制IL-6对宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移和侵袭的促进作用,其机制可能与上调miR-34a-5p表达和抑制Wnt/β-catenin信号通路有关。

护士对静脉治疗规范知识认知现况及影响因素分析

目的调查遵义地区对卫生行业新标准《静脉治疗护理技术操作规范》的践行现状,了解护士对其知识的认知情况并分析其影响因素。方法利用问卷星,借助微信平台将"静疗规范"卫生行业标准实践现状调查问卷以链接形式发送于遵义地区护士,进行问卷调查。结果护士对"静疗规范"知识得分处于较低水平(30.67±8.83)分,其中护士对操作前评估内容的掌握情况最差,正确率为2.68%,其次是PVC穿刺注意事项正确率为11.71%,输血装置及附加装置更换时间正确率为12.74%。护士对于"静疗规范"的知晓率为40.69%,认为"静疗规范"对指导护理工作非常有帮助1 928人(63.78%),对"静疗规范"掌握程度非常熟练469人(15.51%)。多元逐步回归分析结果显示:职称、职务、医院等级、文化程度、护士对"静疗规范"指导护理工作质量是否有帮助的态度和护士对"静疗规范"的掌握熟练程度是"静疗规范"知识得分的影响因素。结论 "静疗规范"已实行4年已久,护士对"静疗规范"的知晓率及整体掌握程度仍不够,护理管理者需有针对性地制订培训方案,提高护士对静脉治疗知识及相关技能的知晓率及掌握程度,注重效果反馈和质量监督,重视静脉治疗护理专科队伍的建设。

自噬在阿尔兹海默病发病机制中的作用

阿尔茨海默病(Alzheimer’sdisease,AD)是一种起病隐匿、病程呈进行性发展的神经退行性疾病,其发病机制目前尚未明确。自噬是清除哺乳动物细胞中异常蛋白质聚集体的重要降解途径,其可通过清除变性或错误折叠的蛋白质、衰老或损伤的细胞器,从而维持细胞正常的稳态效应。本文对细胞自噬在AD中的作用进行了阐述,以期为发现AD的发病机制及治疗靶点提供新思路。

盐肤木叶药用成分影响因素的研究

目的探究影响盐肤木叶中药用成分的因素。方法本研究对盐肤木叶多酚的提取工艺进行了优化,采用福林法测定了不同采摘时间和不同老嫩程度的盐肤木叶片的总酚含量,并采用超高效液相色谱测定了不同老嫩程度的盐肤木叶片中的6种成分的含量。结果最优的工艺条件为料液比1∶100(g/mL),提取液80%甲醇,超声时间50 min;在5月中旬至9月中旬,不同植株盐肤木叶片的多酚含量在同一月份内无显著差异(P>0.05);而盐肤木叶片的7月采摘时间对其多酚含量集与其他采集时间存在显著差异影响(P<0.05),并在7至8月含量达到峰值为(11.45±0.78)%,之后呈下降趋势。表没食子儿茶素没食子酸酯、表儿茶素没食子酸酯和根皮苷的含量均随盐肤木叶龄的增加而降低,并且在嫩叶和老叶间存在显著差异(P<0.05),根皮苷含量随树龄增加而增加,而没食子乙酯随树龄增加而减少,并且3年期树跟1年期树所产叶2种成分存在显著差异(P<0.05)。结论7至8月盐肤木叶片的总酚积累量达到峰值;与中老叶相比,嫩叶中的表没食子儿茶素没食子酸酯、表儿茶素没食子酸酯和根皮苷的含量较高,与1年期树叶片比,3年期树叶片中的没食子乙酯含量较低而根皮苷含量更高。

姜黄素可缓解多囊卵巢综合征大鼠卵巢炎症状态并改善其功能

为探讨姜黄素对多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome, PCOS)大鼠模型血清性激素水平及组织中免疫因子IL-6、CRP、TNF-α表达的影响,将70只雌性SD大鼠随机分为正常组(10只)和造模组(60只)。造模成功后将其分为PCOS模型组、高、中、低药物治疗组,给予各组大鼠腹腔注射姜黄素,治疗结束后收集大鼠血清并分离卵巢进行检测,计算卵巢指数、大鼠体质量;采用血糖检测仪检测各组大鼠空腹血糖(fasting blood glucose, FBG)、空腹血清胰岛素(fasting serum insulin, FINS)和稳态模型胰岛素抵抗指数(homeostasis model assessment-insulin resistance index, HOMA-IR)水平;采用ELISA检测试剂盒检测血清性激素[卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone, FSH)、雌二醇(estradiol, E_(2))、黄体生成素(luteinizing hormone, LH)、孕酮(progesterone, P)、睾酮(testosterone, T)]水平及TNF-α、IL-6、CRP水平;采用免疫组织化学法检测卵巢组织中TNF-α和IL-6的表达。血清及组织学检测结果显示,药物治疗组与PCOS组相比血清中性激素及FBG、FINS、HOMA-IR水平得到改善(P<0.05);TNF-α、IL-6、CRP等炎性因子水平显著减少(P<0.05);PCOS组卵泡和卵巢颗粒层中TNF-α及IL-6表达水平显著高于正常组(P<0.05),药物干预后表达量显著降低(P<0.05)。研究提示,姜黄素对PCOS的炎症改善作用与其抑制TNF-α、IL-6和CRP的表达有关,可能通过此途径改善性激素水平并调节血糖水平。

宫颈癌腹腔镜微创手术的应用效果观察

目的观察宫颈癌腹腔镜微创手术的应用效果。方法选取2010年8月-2019年8月在遵义医科大学附属第三医院就诊的90例宫颈癌患者,随机分为腹腔镜微创手术组和传统开腹手术组,每组45例。比较两组患者的临床疗效、手术相关指标、术后病理结果、术后并发症发生率。结果腹腔镜微创手术组总有效率为93.3%,显著高于传统开腹手术组(68.9%)(P<0.05)。两组患者术中出血量、术后肛门排气时间、术后住院时间,术后宫颈深肌层浸润、盆腔淋巴结转移、宫旁累及、切缘阳性发生率,术后并发症发生率比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论宫颈癌腹腔镜微创手术的应用效果较传统开腹手术好。

长链非编码RNA THAP7-AS1通过调控METTL3介导的m^(6)A修饰影响胃癌细胞的糖酵解

目的:探究长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)THAP7-AS1通过影响甲基转移酶样3(methyltransferase like protein 3,METTL3)介导的N6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenosine,m^(6)A)修饰调控胃癌(gastric cancer,GC)细胞糖酵解的机制。方法:利用Gene Expression Profiling Interactive Analysis(GEPIA)数据库分析THAP7-AS1和METTL3 mRNA在GC组织中的表达水平及其与患者预后的关系;对遵义医科大学附属第三医院(遵义市第一人民医院)胃肠外科收集的80例GC患者的肿瘤组织及癌旁组织标本进行实时荧光定量PCR和蛋白印迹检测以验证GC组织中THAP7-AS1、METTL3 mRNA、GLUT1 mRNA和METTL3蛋白的表达水平,并分析THAP7-AS1的表达水平与患者临床病理特征间的关系;采用实时荧光定量PCR和蛋白印迹法在GES-1、BGC-823和SGC-7901细胞中验证THAP7-AS1、METTL3 mRNA、GLUT1 mRNA和METTL3蛋白的表达水平。通过慢病毒转染法敲减THAP7-AS1或过表达METTL3,并采用实时荧光定量PCR和蛋白印迹法检测不同处理对GC细胞METTL3 mRNA、GLUT1 mRNA和METTL3蛋白表达水平的影响;采用比色法和RNA甲基化免疫共沉淀(methylated RNA immunoprecipitation,MeRIP)-定量PCR(quantitative PCR,qPCR)法分别检测不同处理对GC细胞总RNA的m^(6)A修饰水平和GLUT1的m^(6)A修饰水平的影响;用糖酵解压力测试试剂盒检测不同处理对GC细胞的细胞外酸化率(extracellular acidification rate,ECAR)、葡萄糖摄取量和乳酸产量的影响;采用蛋白印迹法检测不同处理对GC细胞中METTL3、GLUT1、PKM2和LDHA蛋白表达水平的影响;采用EdU染色、细胞划痕实验和Transwell小室实验检测不同处理对GC细胞的增殖、迁移和侵袭能力的影响。最后构建裸鼠GC皮下移植瘤模型,通过检测移植瘤的体积、质量、肿瘤组织中THAP7-AS1及METTL3和GLUT1蛋白的表达水平来分析敲减THAP7-AS1表达对GC移植瘤生长的影响。结果:GEPIA数据库分析结果显示GC组织中THAP7-AS1和METTL3的表达水平高于正常胃组织,且THAP7-AS1和METTL3表达水平与患者的总生存期呈负相关(P<0.05);与癌旁组织(或正常胃粘膜上皮细胞)相比,GC组织(或GC细胞)中THAP7-AS1、METTL3 mRNA、GLUT1 mRNA和METTL3蛋白的表达水平显著升高,且THAP7-AS1的表达水平越高,GC患者的TNM分期越高、肿瘤分化程度越低、微血管越容易浸润且越容易发生淋巴结转移(P<0.05)。降低THAP7-AS1表达后,GC细胞中的METTL3 mRNA、GLUT1 mRNA和METTL3蛋白表达水平降低;总RNA和GLUT1的m^(6)A修饰水平降低;ECAR水平、葡萄糖摄取量及乳酸生成量降低;细胞EdU阳性率及划痕愈合率降低且侵袭细胞数减少;METTL3和糖酵解相关蛋白(GLUT1、PKM2和LDHA)的表达水平降低;而过表达METTL3可部分逆转低表达THAP7-AS1对GC细胞产生的这些影响(P<0.05)。在体内模型中,降低THAP7-AS1表达能显著抑制小鼠移植瘤的生长(P<0.05)。结论:lncRNA THAP7-AS1通过影响METTL3介导的m^(6)A修饰来调控GC细胞的糖酵解水平,进而影响GC细胞的增殖、迁移及侵袭。

蛋白激酶C-β抑制剂减轻大鼠肾移植物的炎性浸润及与磁共振成像的对应关系

目的通过制作大鼠肾移植模型,探讨蛋白激酶C-β(PKC-β)抑制剂对大鼠移植炎性反应的影响并观察与磁共振成像(MRI)的对应关系。方法将大鼠肾移植模型随机分为3组:同质移植组、异质移植组和异质移植PKC-β抑制剂组,每组10对。术后24 h行MRI检查,然后处死大鼠,取血标本用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测低氧诱导因子-1(HIF-1)和血红素氧合酶-1(HO-1)的mRNA表达量,取肾脏标本用免疫组织化学检测肾组织中白细胞介素(IL)-4、IL-8、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和单核细胞迁移抑制因子(MIF)的表达。组间比较采用单因素方差分析。结果MRI显示术后24 h大鼠移植肾在异质移植PKC-β抑制剂组冠状位扫描记录动脉自旋标记(ASL)及T1成像分别为[(294.19±42.13)ml/(min×100 g)、(1951.1±82.9)ms],显著高于异质移植组[(253.24±25.18)ml/(min×100 g)、(1842.1±79.6)ms],而低于同质移植组[(331.65±49.44)ml/(min×100 g)、(2047.6±89.3)ms],差异有统计学意义(F=42.323、95.445,P值均<0.01);血清中的HIF-1和HO-1在异质移植PKC-β抑制剂组水平[(1245.17±305.96)、(249.72±51.01)]分别高于异质移植组[(947.34±112.65)、(111.71±41.02)]和同质移植组[(1157.74±224.63)、(147.52±42.22)],差异有统计学意义(F=61.252、37.832,P值均<0.01);而肾组织中的IL-4、IL-8、MCP-1、MIF在异质移植PKC-β抑制剂组表达水平[(45.3±4.3)、(47.2±4.5),(37.7±3.6)、(31.2±3.0)]分别高于同质移植组[(19.4±2.6)、(19.6±2.5)、(17.4±2.1)、(16.7±2.5)],但低于异质移植组[(82.5±6.5)、(88.6±6.6)、(77.4±5.6)、(71.2±4.5)],差异有统计学意义(F=51.237、59.432、49.375、51.223,P值均<0.01)。结论PKC-β抑制剂通过减轻炎症浸润及产生保护因子来减轻肾移植后移植物损伤,与MRI检测结果呈对应关系。