迷迭香二萜芬提取物对肺纤维化大鼠肺组织TGF-β_1及其信号通路分子mRNA表达的影响

目的探讨迷迭香二萜芬提取物(diterpene phenol extract of Rosmarinus Officinalis,DERO)调控肺纤维化肺胶原代谢失衡的作用机制。方法 50只健康SD大鼠,随机分为生理盐水组(NS组)、博莱霉素肺损伤组(BLM组)及DERO低、中、高剂量[50、100、200mg/(kg·d)]组(分别简称为DERO1、2、3组),每组10只,通过博莱霉素一次性气管内滴入复制肺纤维化大鼠模型,并在肺损伤修复过程中予DERO灌胃干预,于第29天早上取大鼠肺组织,运用组织芯片,进行HE、胶原纤维染色及免疫组化、原位杂交,分别检测肺组织有核细胞数、胶原蛋白、Ⅰ型胶原(typeⅠcollagen,Collagen-Ⅰ)和转化生长因子βⅡ型受体(transforming growth factor-beta typeⅡreceptor,TGFβRⅡ)、Smad4mRNA的表达,应用实时荧光定量RT-PCR技术检测转化生长因子beta1(transforming growth factor-beta1,TGF-β1)mRNA的表达。结果与NS组比较,BLM组肺组织胶原沉积明显,炎症浸润程度较重(P<0.05,P<0.01),DERO1组与BLM组比较,两项指标差异无统计学意义(P>0.05),DERO2及DERO3组肺组织胶原沉积及炎症浸润程度皆明显减轻(P<0.05,P<0.01);与NS组比较,BLM组肺组织Collagen-Ⅰ、TGF-β1RⅡ、Smad4mRNA及TGF-β1 mRNA表达明显上调(P<0.05,P<0.01),与BLM组比较,DERO1组4项指标变化不明显(P>0.05),而DERO2及DERO3组,Collagen-Ⅰ、TGF-β1RⅡ及TGF-β1mRNA表达皆有明显下调(P<0.05,P<0.01),但两组Smad4mRNA下调不明显(P>0.05),与DERO1组比较,DERO2及DERO3组除Smad4mRNA外,余3项指标皆低于DERO1组(P<0.05),而DERO2组与DERO3组比较,4项指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论 DERO在肺纤维化胶原代谢失衡中具有调控作用,能抑制胶原纤维的过度沉积,尤其是Collagen-Ⅰ的过度沉积,其作用机制可能主要是通过抑制TGF-β1、TGFβRⅡmRNA表达的上调,从而干扰TGF-β-Smad信号通路对靶基因尤其是Ⅰ型前胶原靶基因的激活而实现的。