STING激动剂联合PD-1抗体通过激活T细胞的抗肿瘤活性抑制肺癌进展的研究

目的:探索STING激动剂联合PD-1抗体是否可以有效激活体内的T细胞,发挥抑制肺癌进展的作用。方法:通过CFSE检测T细胞的体外增殖情况;通过ELISA法检测T细胞的细胞因子分泌能力;利用小鼠皮下移植瘤模型验证STING激动剂联合PD-1抗体对肿瘤细胞的体内抑制作用;利用免疫荧光实验检测CD3+T细胞的肿瘤浸润情况;通过流式细胞术检测肿瘤浸润T细胞IFN-γ分泌情况;利用免疫组化法检测肿瘤组织中PD-1的表达水平。结果:STING激动剂可以在体外显著增强T细胞的增殖能力(P<0.0001)以及分泌IL-2(P<0.01)和IFN-γ(P<0.01)的能力;STING激动剂联合PD-1抗体显著抑制路易斯肺癌细胞LLC在小鼠体内的生长(P<0.0001);STING激动剂联合PD-1抗体可以显著增强肿瘤组织中CD3+T细胞的浸润情况(P<0.0001),增加肿瘤组织中IFN-γ阳性的T细胞比例(P<0.0001),同时还可以显著降低肿瘤组织中PD-1的表达水平(P<0.0001)。结论:STING激动剂联合PD-1抗体可以有效激活体内T细胞的抗肿瘤免疫应答,抑制肺癌荷瘤小鼠模型的肿瘤进展,该研究对在肺癌的临床治疗中实践这一联合疗法具有重要意义。

择期Ilizarov骨搬移技术治疗胫骨感染性骨缺损

目的探讨和总结择期Ilizarov外固定架辅助下骨搬移技术治疗胫骨感染性骨缺损的治疗方法及临床效果。方法我院自2011年11月至2014年1月择期采用Ilizarov环形外固定架辅助下骨搬移技术治疗胫骨感染性骨缺损患者17例,男13例,女4例;年龄20~59岁,平均36岁。受伤原因:9例交通事故,5例高处跌落,3例砸伤,均系开放性骨折,其中GustiloⅡ型1例,GustiloⅢA型5例,GustiloⅢB型7例,GustiloⅢC型4例;左侧5例,右侧12例;骨缺损部位在胫骨上段7例,中段6例,下段4例。骨延长-骨搬移前骨缺损长度6~10cm。感染创面清创后软组织缺损面积约3cm×4cm^7cm×9cm。一期手术清理创面:去除感染骨段、植入骨水泥链珠或以VSD及皮瓣覆盖创面控制感染;择期应用Ilizarov外固定架骨延长-骨搬移技术通过骨段输送或加压使骨缺损修复、重建。分析各项指标如骨缺损长度、携带外固定架时间等,并对患肢功能恢复程度进行评分。结果所有病例随访时间10~22个月,平均13.5个月。其中12例应用皮瓣患者术后均成活,余5例经游离植皮或换药愈合。胫骨骨段搬移或延长6~10cm,平均7cm;外固定架携带时间7~16个月,胫骨缺损均获得重建,平均11个月。根据Paley标准评价骨延长-骨搬移结果及功能,优13例,良3例,可1例,优良率94.1%。结论择期Ilizarov外固定架辅助下骨搬移技术治疗胫骨感染性骨缺损具有治疗周期短、并发症少等特点,同时重建肢体及矫正畸形,疗效满意,值得临床推广及应用。

限时禁食法控制冠心病患者体重和血脂的临床研究

目的限时禁食法是一种新的饮食疗法,可减轻体重和改善血脂异常,但对冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)患者的影响尚不清楚。本研究旨在探讨限时禁食对冠心病患者体重及血脂的影响。方法通过从我院公告征集冠心病患者154例,随机分为对照组(75例)和限时禁食组(79例),两组均给予12周的饮食干预后,进行人体测量(体重、脂肪量、无脂肪质量)及血脂分析。结果干预4周后,限时禁食组体重较干预前下降[(3.84±0.65)kg(5.16±0.9%)],对照组下降[(2.54±0.34)kg(3.50±0.5%)]。限时禁食组脂肪量较干预前下降[(1.6±0.65)kg(5.38±0.9%)],对照组下降[(1.10±0.34)kg(3.78±0.5%)]。12周后,限时禁食组体重下降[(3.48±0.67)kg(4.77±0.9%)],对照组下降[(2.19±0.65)kg(3.01±0.9%)]。其差异有统计学意义。干预4周后,限时禁食组三酰甘油较干预前下降[(0.64±0.05)mg/dl(23.6±0.9%)],对照组下降[(0.38±0.04)mg/dl(14.1±0.5%)]。12周后,限时禁食组下降[(0.59±0.07)mg/dl(21.8±0.9%)],对照组下降[(0.25±0.06)mg/dl(9.26±0.9%)],两组差异均有统计学意义。结论限时禁食法对冠心病患者是一种安全和可耐受的饮食方案,在较短时间内(4~12周)控制体重和改善血脂异常。限时禁食法对代谢相关疾病的预防作用需进一步研究证实。

骨搬移技术在胫骨感染性骨缺损及骨不连患者中的治疗效果

目的探究骨搬移技术在治疗胫骨感染性骨缺损及骨不连患者中的治疗效果。方法整群选取该院自2013年8月—2014年10月接收治疗的70例患者资料进行分析,依据患者入院治疗的先后顺序分为两组,每组35例。对照组采用常规的手术治疗方法,实验组则采用骨搬移技术进行治疗,对两组患者治疗效果等各项指标进行分析比较。结果实验组治疗总有效率为94.3%高于对照组(85.7%)(P<0.05);实验组的出血量为(100.5±6.8)m L,手术时间为(66.2±8.6)min,住院时间为(11.9±3.6)d,优于对照组(P<0.05);实验组,1例出现并发症低于对照组(9例)(P<0.05)。结论在临床工作中,采用骨搬移技术治疗胫骨感染性骨缺损及骨不连可取得较好的治疗效果,值得推广。

Galectin-3在人乳腺癌组织中的表达及对MCF-7细胞恶性生物学行为的影响

目的:探讨半乳凝集素-3(galectin-3)蛋白在人乳腺癌组织中的表达规律及沉默galectin-3基因后对乳腺癌MCF-7细胞迁移、侵袭和凋亡的影响。方法:收集2014年2月至2018年2月邢台市人民医院手术切除的15例乳腺癌患者癌组织及其癌旁组织,另外采集该医院和河北医科大学附属第四医院组织石蜡切片100份,利用Western blotting检测15例乳腺癌患者的癌组织及癌旁组织中galectin-3蛋白相对表达水平,用免疫组织化学法检测galectin-3蛋白在100例乳腺癌石蜡标本切片中的表达水平,并分析其表达与患者临床病理特征的关系。将galectin-3 siRNA转染至MCF-7细胞中,用qPCR法和Western blotting分别检测galectin-3 mRNA和蛋白的表达水平;用Transwell小室法和流式细胞术分别检测galectin-3基因沉默后对MCF-7细胞迁移、侵袭和凋亡的影响。结果:在乳腺癌组织中galectin-3蛋白表达水平显著高于癌旁组织(P<0.05);乳腺癌组织中galectin-3蛋白阳性表达率为67.00%,其表达水平在淋巴结转移、激素受体(ER、PR)阴性组中显著升高(均P<0.05),且随TNM分期和组织学分级的升高而升高(均P<0.05)。转染galectin-3 siRNA后,能显著降低MCF-7细胞galectin-3 mRNA和蛋白的表达水平、迁移和侵袭能力(均P<0.05),提高细胞的凋亡率(P<0.05)。结论:Galectin-3在乳腺癌组织中高表达,沉默galectin-3表达后抑制MCF-7细胞的迁移和侵袭、诱导细胞凋亡,可作为乳腺癌生物治疗的一个新靶点。

敲减NOB1基因表达对人结肠癌SW480细胞药物敏感性及侵袭和迁移能力的影响

目的:探讨通过小干扰RNA(small interfering RNA, siRNA)技术敲减NOB1基因表达对人结肠癌SW480细胞活力、药物敏感性、凋亡、细胞周期及侵袭和迁移能力的影响。方法:利用脂质体Lipofectamine 3000将NOB1 siRNA转染至SW480细胞,采用real-time PCR和Western blot检测转染后SW480细胞中NOB1 mRNA和蛋白表达的变化;采用MTT法检测敲减NOB1基因表达后SW480细胞活力及其对不同化疗药物(顺铂、5-氟尿嘧啶、奥沙利铂和卡培他滨)敏感性的变化;流式细胞术检测敲减NOB1基因表达对SW480细胞凋亡和周期的影响;Transwell方法检测敲减NOB1基因表达对结肠癌SW480细胞侵袭和迁移能力的影响。结果:转染NOB1 siRNA后,SW480细胞中NOB1的mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.05);与对照组和阴性对照siRNA组相比,NOB1 siRNA转染组的SW480细胞在24～72 h的细胞活力显著降低,顺铂、5-氟尿嘧啶、奥沙利铂和卡培他滨对该细胞的半数抑制浓度均显著降低,细胞凋亡率显著增加,细胞周期受到阻滞,细胞侵袭和迁移能力显著降低(P<0.05)。结论:NOB1 siRNA转染能够抑制结肠癌SW480细胞活力及侵袭和转移能力,并增强细胞对药物的敏感性,促进细胞凋亡。NOB1能够成为结肠癌诊断和治疗的新靶点。

过表达circRNA_LARP4对鼻咽癌细胞的肿瘤干细胞样特性和线粒体膜电位的影响

目的探讨过表达circRNA_LARP4(circ_LARP4)对鼻咽癌CNE2和5-8F细胞肿瘤干细胞样特性及线粒体膜电位的影响。方法鼻咽癌CNE2和5-8F细胞转染circ_LARP4过表达载体,qRT-PCR检测circ_LARP4过表达效率。克隆形成实验检测克隆形成率,肿瘤细胞成球实验检测成球数和成球直径,流式细胞术检测线粒体膜电位变化,试剂盒检测超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,Western blot检测Ki67、P21、八聚体结合转录因子4(octamer-binding transcription factor 4,OCT4)、Nanog、ABCG2、Bcl-2、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2-associated X,Bax)的蛋白表达水平。结果与Control组比较,circ_LARP4组CNE2和5-8F细胞中circ_LARP4表达水平显著上调(均P<0.05),克隆形成率显著降低(均P<0.05),成球率和成球直径显著减少(均P<0.05),线粒体JC-1红/绿荧光比显著降低(均P<0.05),Ki67蛋白水平显著下调,p21蛋白水平显著上调(均P<0.05),OCT4、Nanog和ABCG2蛋白水平显著降低(均P<0.05),Bax/Bcl-2显著增高(均P<0.05),SOD含量显著降低,MDA含量显著升高(均P<0.05)。通过Starbase 2.0和dbDEMC2初步筛选出circ_LARP4在鼻咽癌中的可能靶分子miR-135b-5p和miR-195-5p,并初步发现二者可以逆转circ_LARP4对细胞增殖干性和凋亡的影响(P<0.05)。结论过表达circRNA_LARP4能够降低鼻咽癌CNE2和5-8F细胞的肿瘤干细胞样特性及线粒体膜电位。

解聚素-金属蛋白酶17缺失对鼻咽癌细胞活性氧产生及线粒体功能的影响

目的探讨解聚素-金属蛋白酶17(a disintegrin and metalloprotease 17,ADAM17)缺失对鼻咽癌细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)产生及线粒体功能的影响。方法将3组ADAM17基因干扰质粒ADAM17 shRNA及空质粒ADAM17-shRNA-NC转染鼻咽癌细胞株(CNE1),RT-PCR及Western blot法检测干扰效率,选择干扰效果最好的shRNA进行后续试验。CCK-8法检测各组细胞增殖能力;克隆形成试验检测细胞生长情况;流式细胞术检测细胞凋亡情况和线粒体膜电位变化;荧光显微镜检测细胞线粒体氧化损伤产物ROS水平;丙二醛(malondialdehyde,MDA)试剂盒和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)试剂盒检测细胞氧化应激标志物MDA和SOD含量;Western blot法检测细胞线粒体损伤标记物Bax/Bcl-2、cleaved-caspase 9/caspase 9、cleaved-caspase 3/caspase 3、c-Myc的表达。结果ADAM17-shRNA2组干扰效果最好。与shRNA-NC组相比,ADAM17-shRNA2组细胞的增殖速率明显下降(t=8.964,P=0.036);形成的集落数明显减小(t=10.351,P=0.014);细胞凋亡数量明显增加(t=11.25,P=0.008);细胞内代表ROS水平的荧光强度明显增强;线粒体膜电位明显下降(t=9.233,P=0.013);SOD含量明显降低(t=7.233,P=0.034),MDA含量明显升高(t=7.415,P=0.038);细胞中Bax/Bcl-2、cleaved-caspase 9/caspase 9、cleaved-caspase 3/caspase 3的水平均明显升高(t分别为8.985、9.021和7.789,P分别为0.023、0.011和0.031),c-Myc蛋白表达水平明显减少(t=10.352,P=0.004)。结论干扰ADAM17基因表达通过促氧化诱导SOD水平下降,MDA水平升高,进而缓解细胞膜的氧化损伤;同时促进细胞线粒体ROS表达水平,降低线粒体膜电位,体外抑制细胞增殖,促进细胞凋亡。

瑞芬太尼联合丙泊酚对躁狂症患者电休克治疗后的再定向时间和认知功能的影响

目的:探究瑞芬太尼联合丙泊酚对躁狂症患者电休克治疗后的再定向时间和认知功能的影响。方法:招募2018年2月至2019年9月在本院就诊的150例躁狂症患者,将患者分为对照组和观察组,各75例。通过简易精神状态检查(MMSE)评分系统比较电休克疗法(ECT)后的认知障碍。通过杨氏躁狂量表(YMRS)评分系统比较躁狂症患者的狂躁严重程度。通过MMSE评分系统比较躁狂症患者ECT后的时间定向能力。通过无创血压和心电图监测患者ECT前后的平均动脉压和心率。结果:两组患者一般资料统计无差异(P>0.05)。观察组术后5小时无障碍率较对照组升高(P<0.05),观察组术后5小时出现严重认知障碍率较对照组降低(P<0.05),中度认知障碍率两组比较无差异(P>0.05)。ECT后5小时和24小时观察组与对照组的YMRS评分比较无差异(P>0.05)。ECT前,观察组时间定向评分与对照组比较无差异(P>0.05),ECT后,观察组时间定向评分较对照组升高(P<0.05)。ECT前和ECT后,观察组的平均动脉压和心率比较无差异(P>0.05)。结论:在接受ECT的躁狂患者中,瑞芬太尼补充丙泊酚诱导麻醉不影响ECT的疗效,并且能减少ECT后认知障碍的发生,缩短重定向时间。

白血病病人的心理特点及护理

白血病是造血系统中最常见的一种恶性疾病，俗称“血癌”。其特点为体内有大量白血病细胞广泛而无控制的增生，出现于骨髓和许多其他器官弄口组织，并进入外周血液中。主要临床表现为贫血、出血、感染，肝、脾、淋巴结肿大，骨痛等各组织浸润的表现。其发病除与病毒感染、放射、化学毒物等有关外，还与心理社会因素有关，另外，白血病患者，由于其发病突然，五年生存率低，不可避免的导致患者生理和心理活动的失衡，引起其心理上的冲突，呈现出各种不同的心理反应。