甘草甜素对喉癌Hep-2细胞侵袭和迁移的影响及机制研究

目的:探究甘草甜素(Gly)对喉癌Hep-2细胞侵袭和迁移的影响及作用机制。方法:体外培养正常人喉黏膜上皮细胞和喉癌Hep-2细胞,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法和蛋白印迹实验检测微小RNA-205-5p(miR-205-5p)、沉默信息调节因子2相关酶3(SIRT3)mRNA和蛋白表达水平。将喉癌Hep-2细胞分为对照组、Gly低浓度组、Gly中浓度组、Gly高浓度组、Gly高浓度+空载质粒组、Gly高浓度+miR-205-5p抑制剂组。各组给予相应浓度的Gly干预或转染对应质粒培养48 h。Transwell实验和划痕实验分别检测各组Hep-2细胞侵袭和迁移能力。RT-qPCR法和蛋白印迹实验检测各组Hep-2细胞miR-205-5p、SIRT3 mRNA和蛋白表达水平。双荧光素酶报告基因实验分析miR-205-5p与SIRT3的靶向关系。结果:与人喉黏膜上皮细胞比较,喉癌Hep-2细胞miR-205-5p水平降低,SIRT3 mRNA和蛋白水平升高(均P<0.05)。与对照组比较,Gly低、中、高浓度组穿膜细胞数和划痕愈合率、SIRT3 mRNA和蛋白水平依次降低,miR-205-5p水平依次升高(均P<0.05)。与Gly高浓度组和Gly高浓度+空载质粒组比较,Gly高浓度+miR-205-5p抑制剂组穿膜细胞数和划痕愈合率、SIRT3 mRNA和蛋白水平升高,miR-205-5p水平降低(均P<0.05)。miR-205-5p可靶向调控SIRT3表达。结论:Gly能够抑制Hep-2细胞侵袭和迁移,其机制可能与上调miR-205-5p表达,进而靶向下调SIRT3表达有关。

喉癌患者手术治疗后复发的危险因素分析

目的 探讨喉癌患者手术治疗后复发的危险因素。方法 选取2014年1月至2017年12月在河北邯郸市中心医院行手术治疗的喉癌患者,收集一般资料、既往病史、手术相关指标、实验室检查结果等临床资料,以喉癌是否复发为研究终点,随访截止时间为2022年12月31日,采用单因素和多因素logistic回归分析喉癌术后复发的危险因素。结果 共纳入103例患者,其中21例(20.4%)手术治疗后复发,82例(79.6%)未复发。Logistic回归分析显示,肿瘤分期T4期(OR=37.357,95%CI 5.482~254.571,P<0.001)和N2期(OR=11.335,95%CI 1.065~120.647,P=0.044)是喉癌患者手术治疗后复发的危险因素,而术后放疗为其保护因素(OR=0.125,95%CI 0.024~0.662,P=0.014)。结论 肿瘤分期T4期和N2期是喉癌患者术后复发的危险因素,而术后放射治疗是其保护因素;对于高危患者术后应密切随访,必要时可联合放射治疗以降低复发率。

IDO1和IL-10在喉鳞状细胞癌组织中的表达及其与临床病理特征和预后的关系研究

目的探讨喉鳞状细胞癌(LSCC)组织中吲哚胺2,3-双加氧酶1(IDO1)和白细胞介素-10(IL-10)的表达及其与临床病理特征和预后的关系。方法选取2015年7月—2017年7月邯郸市中心医院行喉部肿瘤切除术治疗,且术中病理确诊为LSCC的患者89例,留取LSCC组织及癌旁组织标本各89份。比较LSCC组织及癌旁组织中IDO1、IL-10的表达情况,以及LSCC患者不同临床病理特征间IDO1、IL-10表达的差异。绘制Kaplan-Meier生存曲线,比较生存时间和生存率。采用Cox多因素风险回归模型分析LSCC患者预后的影响因素。结果LSCC组织中IDO1、IL-10表达阳性率与癌旁组织比较,差异有统计学意义(P<0.05),LSCC组织高于癌旁组织。不同TNM分期、分化程度、淋巴结转移、远处转移的LSCC患者IDO1、IL-10表达阳性率比较,差异有统计学意义(P<0.05);不同性别、年龄、肿瘤位置的LSCC患者IDO1、IL-10表达阳性率,差异无统计学意义(P>0.05)。IDO1、IL-10阳性患者的生存时间短于IDO1、IL-10阴性患者(P<0.05)。Cox多因素风险回归模型分析结果显示,TNM分期较高[R^R=1.351(95%CI:1.055,1.730)]、分化程度较低[R^R=0.734(95%CI:0.562,0.959)]、淋巴结转移[R^R=1.448(95%CI:1.095,1.915)]、远处转移[R^R=1.246(95%CI:1.035,1.500)]、IDO1阳性表达[R^R=1.575(95%CI:1.156,2.146)]、IL-10阳性表达[R^R=1.771(95%CI:1.250,2.508)]是LSCC患者预后的影响因素(P<0.05)。结论LSCC组织中IDO1、IL-10阳性表达率异常升高,且与患者的临床病理特征及预后密切相关,可能是导致LSCC病情加重、预后不佳的重要分子机制之一。

25-(OH)-D_(3)、Hcy、E_(2)在良性阵发性位置性眩晕患者中的水平及临床意义

目的分析25羟维生素D_(3)[25-(OH)-D_(3)]、同型半胱氨酸(Hcy)、雌二醇(E_(2))在良性阵发性位置性眩晕(BPPV)患者中的水平及临床意义。方法选取该院2019年1月至2021年1月收治的BPPV患者128例作为BPPV组,另外选取在该院体检的健康志愿者75例作为健康组,采用化学发光法测定25-(OH)-D_(3)、E_(2)水平,免疫散射法测定Hcy水平,分析25-(OH)-D_(3)、Hcy、E_(2)在健康组与BPPV组及不同疾病严重程度组的水平。结果与健康组比较,BPPV组25-(OH)-D_(3)、E_(2)水平降低,Hcy水平升高(P<0.05)。受试者工作特征(ROC)曲线结果显示,25-(OH)-D_(3)、Hcy、E_(2)3项联合较单项检测诊断BPPV的ROC曲线下面积更大(P<0.05)。25-(OH)-D_(3)、E_(2)水平降低,Hcy水平升高及过度劳累为BPPV发生的危险因素(P<0.05)。相关性分析结果显示,25-(OH)-D_(3)与Hcy呈负相关(r=-0.527,P=0.001);25-(OH)-D_(3)与E_(2)呈正相关(r=0.530,P=0.001);Hcy与E_(2)呈负相关(r=-0.660,P=0.001)。结论25-(OH)-D_(3)、E_(2)水平在BPPV患者中降低,Hcy水平升高,且与患者疾病严重程度相关,可作为评估患者疾病严重程度的指标。

喉癌组织中转录活性因子4和血管内皮生长因子的表达变化及其意义

目的观察喉癌组织中转录活性因子4(ATF4)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达变化,探讨二者的表达与患者淋巴管生成、淋巴结转移及预后的关系。方法取60例喉癌患者的癌组织及癌旁组织,采用免疫组织化学SP法检测ATF4和VEGF,采用D2-40标记组织中淋巴管内皮细胞,分析癌组织中ATF4和VEGF表达与喉癌患者临床病理特征的关系,采用Spearman相关分析喉癌组织中ATF4、VEGF与微淋巴管密度(LMD)之间的相关性。患者均随访3年,绘制生存曲线,采用LogRank检验比较不同ATF4、VEGF表达水平的喉癌患者生存率。结果喉癌组织中ATF4、VEGF阳性表达率高于癌旁组织(P均<0.05)。有淋巴管浸润、有淋巴结转移、TNM分期为Ⅲ+Ⅳ期的喉癌患者喉癌组织中ATF4、VEGF阳性表达率高于无淋巴管浸润、无淋巴结转移、TNM分期为Ⅰ+Ⅱ期的喉癌患者(P均<0.05)。喉癌组织中ATF4阳性表达者LMD高于ATF4阴性表达者,VEGF阳性者LMD高于VEGF阴性表达者。喉癌组织中ATF4、VEGF表达与LMD呈正相关(P均<0.01)。截止随访日期,存活41例,死亡19例,存活率68.33%。喉癌组织ATF4阴性、VEGF阴性患者的生存率高于ATF4阳性、VEGF阳性患者(P均<0.05)。结论喉癌组织中ATF4、VEGF表达升高,二者与患者TNM分期、淋巴管生成、淋巴结转移和预后相关。

白芍总苷对喉癌Hep-2细胞增殖、侵袭、迁移及PI3K/Akt/GSK3β信号通路的影响

目的研究白芍总苷(TGP)对喉癌Hep-2细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响,并初步探究磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/糖原合成酶激酶3β(GSK3β)信号通路在此过程中的作用。方法体外培养喉癌Hep-2细胞,设对照组、25μg/mL TGP组、50μg/mL TGP组、100μg/mL TGP组,采用不同浓度TGP(0、25、50、100μg/mL)作用后,分别采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)、Transwell法、划痕实验检测喉癌Hep-2细胞增殖活力、侵袭能力、迁移能力,蛋白免疫印迹法检测喉癌Hep-2细胞中PI3K/Akt/GSK3β信号通路相关蛋白表达水平。结果与对照组相比,25、50、100μg/mL TGP组喉癌Hep-2细胞增殖活力、侵袭能力、划痕闭合率和磷酸化PI3K(p-PI3K)、磷酸化Akt(p-Akt)、磷酸化GSK3β(p-GSK3β)蛋白表达水平显著降低(P<0.05),均呈现浓度依赖性(P<0.05)。结论TGP能够抑制喉癌Hep-2细胞增殖、侵袭、迁移,其机制可能与抑制PI3K/Akt/GSK3β信号通路表达有关。

多索茶碱联合匹多莫德对阻塞型睡眠呼吸暂停低通气综合征患者氧化应激反应的影响

目的:探讨多索茶碱联合匹多莫德对阻塞型睡眠呼吸暂停低通气综合征患者氧化应激反应的影响。方法:选取2020年邯郸市中心医院收治的阻塞型睡眠呼吸暂停低通气综合征患者130例,按随机数字表法分为对照组和研究组,各65例。两组患者均采取常规治疗,对照组患者联合多索茶碱治疗,研究组患者在对照组的基础上加用匹多莫德治疗。评估两组患者的临床疗效及不良反应。比较两组患者治疗前后白日嗜睡程度、睡眠呼吸障碍最长时间、睡眠呼吸暂停低通气指数(AHI)、平均血氧饱和度(MSaO_(2))、最低血氧饱和度(LSaO_(2))、丙二醛(MDA)及血清超氧化物歧化酶(SOD)水平。结果:研究组患者治疗后的总有效率(96.92%,63/65)较对照组(89.23%,58/65)显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,研究组患者白日嗜睡程度改善情况显著优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者治疗后的睡眠呼吸障碍最长时间显著短于治疗前,AHI和MDA均显著低于治疗前,SOD、LSaO_(2)、MSaO_(2)显著高于治疗前,且研究组患者上述指标显著优于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。研究组、对照组患者的不良反应发生率分别为4.62%(3/65)、1.54%(1/65),差异无统计学意义(P>0.05)。结论:多索茶碱联合匹多莫德治疗阻塞型睡眠呼吸暂停低通气综合征患者的疗效和安全性均较高,不仅能有效改善患者氧化应激反应及血氧饱和度,同时还能改善其睡眠呼吸障碍程度。

喉癌组织中ATF4、RPL41表达变化及意义

目的探讨喉癌组织中转录激活因子4(ATF4)、核糖体蛋白L41(RPL41)表达变化及意义。方法选取120例喉癌患者,收集术中切除的喉癌组织及其癌旁组织(距肿瘤组织边缘>3 cm),用免疫组化法检测组织中ATF4、RPL41蛋白表达,分析ATF4、RPL41蛋白表达与患者临床病理特征的关系;Spearman法分析ATF4蛋白与RPL41蛋白表达的相关性;对患者进行随访,用Kaplan-Meier法分析ATF4、RPL41蛋白表达与患者预后的关系。结果与癌旁组织比较,喉癌组织中ATF4蛋白阳性表达率高,RPL41蛋白阳性表达率低(P均<0.05)。喉癌组织中ATF4蛋白与RPL41蛋白表达呈负相关(r_(s)=-0.809,P<0.05)。ATF4蛋白阳性表达率与喉癌淋巴结转移、TNM分期有关,RPL41蛋白阳性表达率与喉癌组织分化程度、TNM分期有关(P均<0.05)。ATF4蛋白表达阳性的喉癌患者5年生存率低于阴性患者,RPL41蛋白表达阳性的喉癌患者5年生存率高于阴性患者,比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论喉癌组织中ATF4呈高表达,而RPL41呈低表达;ATF4表达与肿瘤TNM分期、淋巴结转移和预后有关,RPL41表达与肿瘤TNM分期、组织分化程度及预后有关。

大蒜素对人喉癌Hep-2细胞增殖、凋亡的影响

目的研究大蒜素(Allitridi)对人喉癌Hep-2细胞增殖、凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法分别以不同浓度大蒜素(25、50、100 mg·L^(-1))和顺铂(1.8 mg·L^(-1))干预对数生长期人喉癌Hep-2细胞,药物干预24 h后经Hoechst染色后利用倒置显微镜观察细胞的形态,采用MTT比色法测定大蒜素对Hep-2细胞的增殖抑制作用,采用FCM测定细胞周期分布、检测细胞凋亡率;采用RT-PCR检测Bax、Bcl-2 mRNA表达水平,Western-blot检测caspase-3蛋白表达。结果大蒜素各组和顺铂1.8mg·L^(-1)组人喉癌Hep-2细胞较空白对照组出现不同程度损伤,以大蒜素100 mg·L^(-1)组损伤最为严重;大蒜素(50、100 mg·L^(-1))组和顺铂1.8 mg·L^(-1)组人喉癌Hep-2细胞增殖抑制率显著升高,细胞周期G0/G1期显著增长、G2/M期显著缩短,细胞凋亡数量明显增多、凋亡率显著升高,凋亡相关基因bcl-2 mRNA表达显著下调而Bax mRNA显著上调、Bax/bcl-2表达比值显著升高,促凋亡蛋白caspase-3表达显著上调,上述均差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论大蒜素对人喉癌Hep-2细胞生长具有抑制作用,其机制可能与大蒜素能够阻滞人喉癌Hep-2细胞周期进程、抑制细胞增殖并促进其凋亡有关。

盐酸曲唑酮联合BiPAP通气对阻塞性睡眠呼吸暂停患者血清PPAR-γ、YKL-40、vWF水平的影响

目的观察盐酸曲唑酮联合无创性气道双水平正压(noninvasive bi-level positive airway pressure,BiPAP)通气对阻塞性睡眠呼吸暂停(obstructive sleep apnea hypopnea syndrome,OSAHS)患者血清过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator activated receptor-γ,PPAR-γ)、甲壳质酶蛋白(chitinase protein,YKL-40)、血管性血友病因子(von willebrand factor,vWF)水平的影响。方法选取OSAHS患者162例,根据计算机随机分组,分为对照组和研究组,各81例。对照组给予BiPAP通气治疗,研究组给予盐酸曲唑酮联合BiPAP通气治疗,两组均治疗40 d。对比两组疗效、匹兹堡睡眠质量量表(Pittsburgh sleep quality scale,PSQI)评分、OSAHS患者专用生活质量量表-Calgary生活质量指数(Calgary quality of life index,SAQLI)评分、呼吸暂停低通气指数(apnea hypopnea index,AHI)、最低血氧饱和度(lowest oxygen saturation,LSaO_(2))、平均血氧饱和度(mean oxygen saturation,MSaO_(2))、血清PPAR-γ、YKL-40、vWF水平和不良反应发生率。结果治疗后,研究组的临床总有效率明显优于对照组(P<0.05)。治疗后,研究组PSQI评分低于对照组,SAQLI评分高于对照组(P<0.05)。治疗后,研究组AHI低于对照组,LSaO_(2)、MSaO_(2)高于对照组(P<0.05)。治疗后,研究组血清PPAR-γ、YKL-40、vWF水平低于对照组(P<0.05)。两组不良反应总发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论盐酸曲唑酮联合BiPAP通气治疗OSAHS患者,可帮助患者症状改善,通过改善患者睡眠质量而提高其生活质量,同时还可下调血清PPAR-γ、YKL-40、vWF水平。

微小RNA-107调控内质网应激对喉癌Hep-2细胞癌增殖及凋亡的影响

目的探讨微小RNA(miR-107)调控内质网应激对喉癌Hep-2细胞增殖和凋亡的影响。方法将miR-107类似物和阴性对照片段转染至对应组细胞中,以未转染组作为空白组。采用荧光定量PCR(RT-PCR)检测各组Hep-2细胞中miR-107相对表达量,用蛋白质印迹法(Westernblotting)检测各组Hep-2细胞中的内质网应激有关蛋白即蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)及活化转录因子4(ATF4)蛋白的表达,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定Hep-2细胞的增殖能力,用流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果三组转染细胞miR-107相对表达量差异有统计学意义(χ^(2)=11.50,P<0.05)。其中mimics组miR-107的相对表达量为(15.32±1.94),与mimics组相比较,NG组、空白组miR-107相对表达量均降低(P<0.05)。三组转染细胞的PERK和ATF4蛋白表达水平均差异有统计学意义(F=70.35、13.77,P<0.05)。其中mimics组PERK和ATF4蛋白的相对表达量为(0.53±0.07)和(0.75±0.06),与mimics组相比较,NG组和空白组的PERK和ATF4蛋白相对表达量均降低(P<0.05)。MTT分析结果显示,三组细胞的增殖能力差异有统计学意义(F=21.44、28.38、59.14,P<0.05)。其中mimics组Hep-2细胞增殖能力在12、24、36 h时分别为(0.15±0.01)、(0.33±0.03)和(0.47±0.04),与mimics组比较,在12、24、36 h后NG组、空白组Hep-2细胞增殖能力均有显著升高(P<0.05)。三组转染细胞的细胞凋亡率比较差异有统计学意义(F=102.32,P<0.05)。其中mimics组Hep-2细胞凋亡率为(10.18±0.93),与mimics组相比较,NG组和空白组的细胞凋亡率均降低(P<0.05)。结论上调miR-107的表达能够抑制Hep-2细胞的增殖,促进Hep-2细胞凋亡,内质网应激可能在其中有重要作用。

UHRF1mRNA在喉鳞状细胞癌组织中的表达及临床意义

目的探讨UHRF1mRNA在喉鳞状细胞癌组织中的表达及临床意义。方法选取喉鳞状细胞癌患者80例,术中均留取喉鳞癌组织和癌旁正常组织,利用实时荧光聚合酶链反应法定量检测喉鳞癌和癌旁正常组织中UHRF1mRNA表达。结果UHRF1mRNA在喉鳞癌组织中的相对表达量为1.85±0.16,明显高于癌旁正常组织中的1.17±0.13(P<0.01);喉鳞癌组织中UHRF1mRNA相对表达量与病理学分级、T分期和淋巴结转移有关(P<0.05)。结论UHRF1mRNA在喉鳞状细胞癌组织中高表达且与多种因素相关。

黑色素瘤抗原在消化道喉癌中的表达及临床评价

目的:探讨黑色素瘤抗原在消化道喉癌中的表达及临床评价。方法:选取88例喉癌患者作为研究对象,用间接免疫荧光技术,从蛋白水平观察和比较MAGE-A3在喉癌、癌旁组织中的表达。结果:MAGE-A3荧光绿色染色表明其主要表达于癌细胞胞质,癌组织染色呈斑状、块状、线装、絮状等,有时其中弥散着强染色的颗粒。而癌旁黏膜内仅见极弱的可疑的荧光染色颗粒。癌旁黏膜中MAGE-A3蛋白表达率为5.56%,喉癌中MAGE-A3蛋白表达率为51.92%。MAGE-A3在癌组织中的表达与癌旁黏膜相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:MAGE-A3在消化道喉癌中有较高表达。MAGE-A3蛋白表达的差异可以为喉癌的靶向免疫治疗奠定理论基础。

WAVE2在消化道喉鳞状细胞癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨WAVE2在消化道喉鳞状细胞癌组织中的表达及临床意义。方法:选取55例喉鳞状细胞癌患者作为研究对象,采用免疫组织化学方法检测55例患者消化道中喉癌组织中WAVE2蛋白的表达;采用Westernblot检测WAVE2蛋白在喉癌组和癌旁黏膜组织中的表达情况。结果:55例喉癌组织中有32例发现有WAVE2蛋白阳性表达,阳性表达率为58.2%;有23例喉癌组织中未见WAVE2蛋白表达,阴性表达率为41.8%。且喉癌组织中WAVE2蛋白表达显著高于癌旁黏膜组织(P<0.05)。WAVE2蛋白表达与临床分期、肿瘤大小和淋巴结转移等临床病理特征有显著相关性。结论:WAVE2在消化道喉鳞状细胞癌组织中高表达且与多种临床病理特征相关。

喉部分切除术联合术后放疗治疗喉癌的临床效果观察

分析喉部分切除术联合术后放疗治疗喉癌的效果。方法:选取我院收治的64例喉癌患者为试验样本,所有病例均来自2018年6月至2020年10月,以抽签法分组,对照组32例应用喉部分切除术治疗,研究组32例应用喉部分切除术联合放疗治疗,对比两组患者治疗效果、并发症发生率、术后3个月生活质量。结果:研究组患者治疗总有效率(93.75%)高于对照组(71.88%),并发症发生率(9.38%)低于对照组(34.38%),术后3个月生活质量评分高于对照组,统计学分析显示P<0.05。结论:对喉癌患者应用喉部分切除术联合术后放疗治疗可取得很好的效果,且并发症较少,还有助于提升患者生活质量。