呋塞米对脑出血模型大鼠PERK/eIF2α/CHOP通路及继发性脑损伤的影响

目的探讨呋塞米(FUR)对脑出血(ICH)大鼠RNA依赖的蛋白激酶样内质网激酶(PERK)/真核起始因子2α(eIF2α)/转录因子CCAAT增强子结合蛋白的同源蛋白(CHOP)通路及继发性脑损伤的影响。方法将大鼠分为假手术组、模型组(脑定位注射Ⅳ型胶原酶,建立ICH模型)、FUR低剂量组(FUR-L)、FUR中剂量组(FUR-M)、FUR高剂量组(FUR-H)、神经节苷脂组,每组18只。药物处理后,检测神经功能,对其进行Longa评分;测量大脑含水量;用Evans蓝外渗实验检测血脑屏障损伤;用HE染色检测海马神经元损伤;用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-6(IL-6)水平;用免疫印迹法检测大鼠脑组织PERK/eIF2α/CHOP通路相关蛋白p-PERK/PERK、p-eIF2α/eIF2α、CHOP表达。结果相比假手术组,模型组大鼠海马神经元变性坏死,皱缩变小,数目明显减少,呈现严重病理损伤,Longa评分、Evans蓝渗出量、大脑含水量、血清IFN-γ及IL-6水平、p-PERK/PERK、p-eIF2α/eIF2α、CHOP表达水平明显升高(P<0.05)。相比模型组,FUR-L、FUR-M、FUR-H组及神经节苷脂组大鼠海马神经元形态有不同程度恢复,病理损伤减轻,Longa评分、大脑含水量、Evans蓝渗出量、血清IFN-γ及IL-6水平、p-PERK/PERK、p-eIF2α/eIF2α、CHOP表达水平均降低(P<0.05)。结论FUR可下调PERK/eIF2α/CHOP通路蛋白表达,缓解脑水肿及海马神经元损伤,修复ICH模型大鼠神经功能。

天麻素注射液对蛛网膜下腔出血大鼠NF-κB/Bax/Caspase-3通路及神经元凋亡的影响

目的探讨天麻素注射液对蛛网膜下腔出血(Subarachnoid hemorrhage, SAH)大鼠核转录因子-κB/B细胞淋巴瘤-2基因相关X蛋白/半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(Nuclear factor-κB,NF-κB/B cell lymphoma-2 associated X protein, Bax/Cysteinyl aspartate specific proteinase-3,Caspase-3)通路及神经元凋亡的影响。方法血管穿刺法建立SAH大鼠模型,模型成功50只,随机分为模型组、天麻素低、中、高剂量组(腹腔注射5、10、20 mg·kg^(-1)·d^(-1)天麻素注射液)、阳性对照组(腹腔注射0.5 mg·kg^(-1)·d^(-1)地塞米松磷酸钠注射液),每组各10只,另10只大鼠设为假手术组;干预3周后测定大鼠神经功能评分;流式细胞术检测脑皮层细胞凋亡情况;原位末端标记法(TdT-mediated dUTP-biotin nick end labeling assay, TUNEL)检测神经元凋亡状态;蛋白免疫印迹(Western blot, WB)检测大鼠脑皮层NF-κB,Bax, Caspase-3、生长相关蛋白-43(Growth-associated protein-43,GAP-43)、突触素(Synaptophysin, SYN)蛋白表达水平。结果与假手术组比较,模型组神经功能评分、脑皮层神经元凋亡率、脑组织中NF-κB,Bax, Caspase-3蛋白表达水平升高,脑皮层组织中GAP-43,SYN蛋白表达水平降低(P<0.05)。与模型组比较,天麻素中、高剂量组、阳性对照组神经功能评分、脑皮层神经元凋亡率、脑组织中NF-κB,Bax, Caspase-3蛋白表达水平降低,脑皮层组织中GAP-43,SYN蛋白表达水平升高(P<0.05);天麻素低剂量组脑皮层神经元凋亡率、脑组织中NF-κB,Bax, Caspase-3蛋白表达水平降低,脑皮层组织中GAP-43,SYN蛋白表达水平升高(P<0.05);随着天麻素注射液剂量的升高,神经功能评分、脑皮层神经元凋亡率、脑组织中NF-κB,Bax, Caspase-3蛋白表达水平降低,脑皮层组织中GAP-43,SYN蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论天麻素注射液可能通过抑制NF-κB/Bax/Caspase-3通路来实现对神经元凋亡的缓解和对SAH大鼠的脑保护。