罗哌卡因对脑缺血/再灌注损伤大鼠的脑保护作用及cGAS/STING通路的影响

目的探讨罗哌卡因对脑缺血再灌注损伤大鼠的脑保护作用及环磷酸鸟苷-腺苷合成酶/膜蛋白干扰素基因刺激因子(cGAS/STING)通路的影响。方法SD大鼠随机分为假手术组、模型组、罗哌卡因低剂量组(0.075 mg/kg)、罗哌卡因中剂量组(0.15 mg/kg)、罗哌卡因高剂量组(0.30 mg/kg)、阳性对照组(尼莫地平,5 mg/kg),每组8只,除假手术组外,其余各组大鼠均采用线栓法构建脑缺血再灌注大鼠模型,给药第0天、第3天、第7天各组大鼠的神经功能缺损评分;苏木精-伊红染色(HE)检测脑组织病理学变化;2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)法检测脑梗死面积;酶联免疫吸附(ELISA)检测脑组织肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β、IL-6、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平;qRT-PCR检测线粒体DNA(mtDNA)水平;蛋白免疫印迹法检测脑组织cGAS/STING通路蛋白表达。结果与假手术组相比,模型组大鼠脑组织受损严重,脑梗死面积、神经缺损评分、脑组织中TNF-α、IL-1β、IL-6、MDA水平、胞质mtDNA水平、cGAS、STING蛋白表达显著升高,脑组织中SOD水平显著降低(P<0.05);与模型组大鼠相比,罗哌卡因各剂量组及阳性对照组大鼠脑组织受损得到缓解,脑梗死面积、神经缺损评分、脑组织中TNF-α、IL-1β、IL-6、MDA水平、胞质mtDNA水平、cGAS、STING蛋白表达显著降低,脑组织中SOD水平显著升高(P<0.05)。结论罗哌卡因对脑缺血再灌注损伤具有一定的保护作用,并可抑制cGAS/STING通路。

右美托咪定复合布托啡诺在无痛支气管镜检查中的应用效果

目的探讨右美托咪定复合布托啡诺在无痛支气管镜检查中的应用效果。方法选取2021年5月-2022年5月该院呼吸与危重症医学科支气管镜室行电子支气管镜检查的144例肺结节患者作为研究对象。将144例患者分成A组(利多卡因组)、B组(利多卡因+右美托咪定组)、C组(利多卡因+右美托咪定+舒芬太尼组)和D组(利多卡因+右美托咪定+布托啡诺组),每组36例。该研究为随机对照单盲试验。全部入组患者入室后,予以鼻导管给氧,按分组实施麻醉后,完成支气管镜检查。比较各组入室时(T_(0))、麻醉诱导后5 min(T_(1))、电子支气管镜通过声门时(T_(2))、操作5 min(T_(3))、操作结束时(T_(4))和出室时(T_(5))各时点的心率(HR)、经皮动脉血氧饱和度(SpO_(2))和平均动脉压(MAP),观察并记录各组术中和术后不良反应,待患者清醒后,行患者舒适度和术者操作满意度问卷调查。结果4组患者全部完成电子支气管镜检查。4组患者T_(2)和T_(3)时点与T_(0)时点HR的差值比较,差异均有统计学意义(H值分别为21.15和19.63,P<0.05),Bonferroni检验显示,C组T_(2)和T_(3)时点与T_(0)时点HR的差值与A组和B组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。4组患者T_(2)时点与T_(0)时点SpO_(2)的差值比较,差异有统计学意义(H=9.58,P=0.023),Bon‐ferroni检验显示,D组T_(2)时点与T_(0)时点SpO_(2)的差值与A组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。4组患者T_(2)和T_(3)时点与T_(0)时点MAP的差值比较,差异均有统计学意义(H值分别为9.65和21.31,P<0.05),Bonferroni检验显示,A组T_(2)时点与T_(0)时点MAP的差值及D组T_(3)时点与T_(0)时点MAP的差值与其他3组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。D组患者舒适度评分和术者操作满意度评分高于其他3组,差异均有统计学意义(Z值分别为62.77和53.94,P<0.01),D组不良反应发生率明显低于其他3组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论右美托咪定复合布托啡诺麻醉方案用于无痛支气管镜检查,更能达到无痛苦效果,血流动力学更平稳,不易发生呼吸抑制,患者舒适度及术者操作满意度更高,不良反应较少,值得临床推广应用。

杏仁核BDNF-AS在大鼠神经病理性痛形成中的作用

目的评价脑源性神经营养因子反义长链非编码RNA(BDNF-AS)在大鼠神经病理性痛(NP)形成中的作用。方法清洁级健康雄性SD大鼠,2月龄,体重200~260 g,采用左侧L5-6脊神经结扎法制备NP模型。实验Ⅰ取大鼠56只,采用随机数字表法分为3组:假手术组(Sham组,n=8)、NP组(n=24)和BDNF组(n=24)。BDNF组于模型制备后1、3、6、13和20 d时双侧杏仁核注射外源性BDNF,每侧100 pmol。NP组和BDNF组于模型制备后7、14和21 d时随机取8只大鼠、Sham组于假手术模型制备后处死,取脑组织,分离杏仁核,ELISA法检测杏仁核BDNF含量,免疫组化法检测杏仁核BDNF阳性细胞数,实时定量PCR法检测杏仁核BDNF-AS的表达。实验Ⅱ取大鼠32只,采用随机数字表法分为4组(n=8):假手术组(Sham组)、NP组、BDNF组和siRNA组。于模型制备后1、3、6、13和20 d时,BDNF组和siRNA组双侧杏仁核分别注射外源性BDNF每侧100 pmol或siRNA-BDNF-AS 50 nmol。于模型制备前(T_(0))、制备后4 d(T_(1))、7 d(T_(2))、14 d(T_(3))、21 d(T_(4))时测定机械缩足反应阈(MWT)与热缩足潜伏期(TWL)。最后1次行为学测试完成后,处死大鼠,取脊髓组织,ELISA法检测脊髓IL-1β、IL-6和TNF-α含量。结果实验Ⅰ与Sham组比较,NP组模型制备后各时点杏仁核BDNF含量和BDNF阳性细胞数降低,BDNF-AS表达上调(P<0.05);与NP组比较,BDNF组模型制备后各时点杏仁核BDNF含量和BDNF阳性细胞数升高,BDNF-AS表达下调(P<0.05)。实验Ⅱ与Sham组比较,NP组、BDNF组和siRNA组T_(1~4)时MWT降低,TWL缩短,脊髓IL-1β、IL-6和TNF-α含量升高(P<0.05);与NP组比较,BDNF组和siRNA组T_(1~4)时MWT升高,TWL延长,脊髓IL-1β、IL-6和TNF-α含量降低(P<0.05)。结论大鼠NP发生机制可能与杏仁核BDNF-AS表达上调,抑制BDNF合成,促进脊髓炎症反应有关。

mTOR和JNK通路调节神经病理性大鼠杏仁核MCP-1表达的作用分析

目的探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)和c-Jun氨基末端激酶(JNK)通路对神经病理性疼痛(NP)大鼠杏仁核单核细胞趋化因子-1(MCP-1)表达的调节作用。方法选取2月龄无特殊病原体(SPF)级健康雄性SD大鼠,采用脊神经结扎(SNL)左侧第5/6腰椎(L_(5/6))制备NP模型大鼠,假手术组仅暴露L_(5/6)脊神经不结扎。实验分为3个部分:(1)将24只大鼠于SNL术前及术后第7、14和21天(d_(0)、d_(7)、d_(14)和d_(21),各6只)取杏仁核,采用Western blot检测磷酸化mTOR(p-mTOR)、磷酸化JNK(p-JNK)表达情况并分析二者与MCP-1水平的相关性;(2)48只NP模型大鼠双侧杏仁核注射不同浓度mTOR抑制剂雷帕霉素或JNK抑制剂SP600125(浓度梯度均为0、0.1、1.0和10.0μmol/L),于d_(21)取杏仁核(每个浓度各6只),采用ELISA检测MCP-1水平,免疫组织化学检测MCP-1阳性细胞数;(3)24只大鼠分为假手术组、模型组及抑制剂组(双侧杏仁核注射10μmol/L SP600125或雷帕霉素3μL),于d_(0)、d_(7)、d_(14)和d_(21)共5个时间点测定各组的机械痛阈值(MWT)。结果与d_(0)相比,d_(7)、d_(14)、d_(21)NP模型大鼠杏仁核中p-mTOR和p-JNK水平均升高(P<0.05),且d_(21)水平最高;进一步分析发现,d_(21)的NP模型大鼠杏仁核p-mTOR和p-JNK水平与MCP-1水平均呈正相关(r=0.564、0.629,P<0.05)。杏仁核注射SP600125或雷帕霉素可降低MCP-1表达,与0μmol/L组相比,0.1~10.0μmol/L组的NP模型大鼠MCP-1水平及阳性细胞数均降低,差异有统计学意义(P<0.05),且10μmol/L组MCP-1水平及阳性细胞数最低。NP模型大鼠d^(4)、d_(7)、d_(14)、d_(21)杏仁核MWT均低于假手术组(P<0.05),经SP600125或雷帕霉素治疗后NP模型大鼠降低的MWT获改善,SP600125组或雷帕霉素组d_(7)、d_(14)、d_(21)的MWT均高于模型组(P<0.05),但与对照组仍有明显差异(P<0.05)。结论NP大鼠mTOR和JNK通路激活,抑制mTOR和JNK通路可达到缓解NP大鼠疼痛及上调杏仁核MCP-1表达的作用,对于NP的治疗有一定意义。