酶偶联法测定红细胞谷胱甘肽过氧化物酶

根据酶偶联催化反应机理，通过二次作图法测定了过氧化物酶（Ｓ＿１）和Ｈ＿２Ｏ＿２（Ｓ＿２））的米氏常数（Ｋｍ），分别为０．０６９ｍｍｏｌ／Ｌ和０．１５ｍｍｏｌ／Ｌ。通过理论计算和实验分析确定Ｓ＿１的最适底物浓度为１．５ｍｍｏｌ／Ｌ，Ｓ－２最适底物浓度为２．２５ｍｍｏｌ／Ｌ。实验证明指示酶（Ｇ·Ｒ）用量应＞０．２５Ｕ／ｍｌ反应液，本法采用０．３９Ｕ／ｍｌ反应液并就ｐＨ、温度、Ｈｂ干扰等因素对实验影响进行了系统研究，优选了最佳条件。本法批内变异系数为３．８％，批间变异系数为５．２％。