皂角刺多糖的提取及抗氧化活性的研究

对皂角刺多糖的提取及抗氧化活性进行了研究。采用超声波辅助技术提取皂角刺中的多糖,用苯酚-硫酸法,以葡萄糖为标准对照物在波长484nm处测量吸光度,计算皂角刺中多糖含量。单因素试验和L9(34)正交试验得到的优化试验条件为:提取温度50℃、pH为7、提取时间40min、液料比为30比1。皂角刺中多糖的提取率为1.26%。抗氧化试验结果表明:当皂角刺多糖质量浓度为2.5g·L-1时,·OH、DPPH·及·O2-的清除率分别为88.9%,89.3%,42.3%。

火棘中水溶性多糖的提取及测定

采用超声波辅助提取技术,通过单因素试验和L9(34)正交试验,探讨了提取条件对火棘(Pyracantha fortuneana)中多糖类物质提取率的影响,采用苯酚-硫酸法测定火棘中多糖含量,以葡萄糖作为标准对照物,在482 nm处测定吸光度,并计算其含量。结果表明,在火棘多糖超声波最佳提取工艺条件下(提取剂pH为7,30℃下按液料比30∶1提取40 min),火棘果中多糖提取率达2.148%。

槲皮素在顺铂诱导前列腺癌细胞凋亡中的增强作用

目的 探讨槲皮素对顺铂抑制前列腺癌细胞的增强作用. 方法 2013年3月选取前列腺癌LNCaP细胞和PC3细胞接种于96孔板12 h.将两种细胞各分为4组：槲皮素组,分别加入10、20、40、80、160 μmol/L槲皮素;顺铂组,分别加入0.01、0.05、0.10、1.00、10.00 μmol/L顺铂;联用组,分别加入20μmol/L槲皮素和0.01、0.05、0.10、1.00、10.00μmol/L顺铂;阴性对照组.培养48 h后,采用噻唑蓝法检测LNCaP细胞和PC3细胞增殖情况.LNCaP细胞和PC3细胞分别加入槲皮素（20 μmol/L）、顺铂（0.05 μmol/L）、槲皮素（20 μmol/L）＋顺铂（0.05 μmol/L）培养48 h后,经碘化丙啶及Annexin V-FITC染色后应用流式细胞仪分别检测细胞周期变化情况及凋亡率;蛋白质印迹法检测两种细胞中caspase 8、caspase 9、caspase 3、Bcl-2、Bax等蛋白的表达水平. 结果 顺铂组、槲皮素组的LNCaP细胞及PC3细胞半数抑制浓度（50％ inhibited concentration,ICS0）分别为（0.99±0.13） μmol/L及（0.75±0.09）μmol/L、（91.60±6.10） μmol/L及（72.90±4.70） μmol/L,联用组IC50分别为（0.11±0.06） μmol/L及（0.07±0.02） μmol/L,与槲皮素组和顺铂组比较差异均有统计学意义（P＜0.05）.顺铂组、联用组的LNCaP细胞及PC3细胞中S期细胞的比例分别为（22.4±2.7）％及（31.2±2.4）％、（20.1±1.6）％及（31.0±2.5）％,与阴性对照组比较差异均有统计学意义（P＜0.05）;槲皮素组与阴性对照组相比较差异无统计学意义（P＞0.05）.顺铂组、联用组的LNCaP细胞及PC3细胞的凋亡率分别为（14.8±1.9）％及（39.6±3.1）％、（11.5±1.2）％及（34.1±3.3）％,与阴性对照组比较差异均有统计学意义（P＜0.05）;槲皮素组与阴性对照组比较差异无统计学意义（P＞0.05）.蛋白质印迹法检测发现槲皮素组、顺铂组、联用组中caspase-3、caspase-8、caspase-9均轻度活化、Bax和p21表达均上调、Bcl-2和CDK2表达均下调、Cytochrome c被释放到胞质中,且顺铂组、联用组的作用均强于槲皮素组,差异均有统计学意义（P＜0.05）. 结论 槲皮素能明显增强顺铂对前列腺癌LNCaP细胞和PC3细胞的抑制作用.