酒精对骨髓基质细胞增殖及分化的影响

目的 观察酒精对骨髓基质细胞增殖及分化的作用,探讨骨质疏松的病理学机理。方法 以0.09 mol/L酒精加入骨髓基质细胞培养物中,测定增殖的骨髓基质细胞数及培养液中骨钙素含量。通过苏丹Ⅲ脂肪细胞染色计数观察酒精作用时间对脂肪细胞分化的影响。结果 实验组骨髓基质细胞数及培养液中骨钙素含量明显低于对照组,脂肪细胞的数量随酒精作用时间延长而增多。结论 酒精抑制骨髓基质细胞增殖及向成骨方向分化,促进其向脂肪细胞分化,这可能与酒精中毒引起继发性骨质疏松时骨量减少、髓内脂肪组织增多有关。

经胸骨上段显露颈胸段脊柱的应用解剖

目的:为临床经胸骨上段显露脊柱颈胸段提供解剖学基础。方法:对40具成人尸体模拟经胸骨上段显露颈胸段脊柱的入路进行解剖,并进行有关的数据测量。结果:甲状腺中静脉有48.8%的人一侧缺如。胸骨劈开后撑开的横径为(60.8±1.64)mm。两侧胸膜在前界中段之间有分离型、接近型、接触型和掩复型,后两者占50.4%。食管在T3椎体平面超出气管左缘(0.5±0.08)cm。胸导管由颈血管鞘后方到注入静脉的行程位于颈静脉角三角区。左、右侧喉返神经分别有94.5%、59.6%走行在气管食管沟内,并与甲状腺下动脉有复杂的关系。胸骨角正对T4/5椎间盘、T4下1/3和T5上1/3椎体(62.5%)水平,喉返神经左、右侧返折点分别平对T3/4椎间盘、T4椎体(75.6%)和T1/2椎间盘、T2椎体(82.0%),主动脉弓、右锁骨下动脉上缘分别对T3(73.7%)和T1椎体(70.0%)水平,经胸骨上段入路的颅侧和尾侧分别平对C3/4椎间盘、C4椎体(75.6%)和T3椎体、T3/4椎间盘(86.8%)。结论:经胸骨上段显露脊柱颈胸段具有暴露充分,操作方便,具有推广价值。

人前列腺特异性膜抗原基因启动子/增强子表达载体的构建及组织特异性鉴定

目的:构建前列腺特异性表达的人前列腺特异膜抗原(PSMA)基因启动子/增强子表达载体,并进行组织特异性鉴定。方法:从人外周血中提取基因组DNA,采用PCR技术分别扩增PSMA上游1175bp的启动子序列,及第三内含子中258bp的增强子序列,将两个序列定向克隆至荧光素酶报告基因表达质粒pGL3-Basic,构建前列腺特异性表达载体pGL3-PSMP-PSME。将构建载体用脂质体分别转染前列腺癌PC-3M细胞株及4种非前列腺癌细胞株,48h后通过检测荧光素酶表达活性,确定克隆的启动子及增强子的活性及其组织特异性表达活性。结果:构建的pGL3-PSMP-PSME质粒经酶切及DNA测序分析鉴定,证实克隆片段的大小、插入方向及其序列正确。细胞转染结果显示,pGL3-PSMP-PSME在PC-3M细胞株中表达活性明显高于其它4种非前列腺癌细胞株。结论:构建的前列腺表达载体具有较高的组织特异性,为进一步研究PSMA调控序列驱动治疗基因进行前列腺癌的靶向生物治疗奠定了基础。

奇正消痛贴治疗骨关节炎的疗效观察

目的:观察奇正消痛贴治疗膝关节骨性关节炎(OA)的临床效果。方法:将确诊为膝关节骨性关节炎的180例患者随机分成治疗组和对照组,每组90例,治疗组于患处贴用奇正消痛贴,1次/d,5 d为1个疗程,持续15 d。对照组口服双氯芬酸钠片,1片/d,饭前服用,5 d为1个疗程,持续15 d。观察两组的疗效。结果:全部病例至少随访1个月,治疗组总有效率为91.9%(125/136),疗效明显优于对照组的78.0%(96/123),两组疗效比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:奇正消痛贴治疗膝关节骨性关节炎能有效缓解疼痛等症状,改善关节功能。

膨胀式椎弓根螺钉在骨质疏松椎体的生物力学研究

目的:测试并比较自行设计的膨胀式脊柱内固定系统椎弓根螺钉以及CD-和TSRH椎弓根螺钉置入人骨质疏松腰椎体标本的最大轴向拔出力及最大旋入力矩,评价膨胀式脊柱内固定系统螺钉脊柱固定的稳定性。方法:将20个骨质疏松腰椎椎体标本随机分为2组,每组10个椎体(20侧椎弓根),随机选择每组椎体的一侧椎弓根置入膨胀式脊柱内固定系统椎弓根螺钉,(直径6mm,长45mm),另一侧置入CD-和TSTH螺钉,行螺钉拔出试验,测试并记录螺钉的最大旋入力矩和最大轴向拔出力。结果:几种螺钉的最大旋入力矩分别为膨胀式脊柱内固定系统椎弓根螺钉(1.59±0.32)N·m、CD-(1.57±0.29)N·m和膨胀式脊柱内固定系统椎弓根螺钉(1.56±0.31)N·m、TSRH(1.63±0.30),最大轴向拔出力分别为膨胀式脊柱内固定系统椎弓根螺钉(1176.2±213.67)N·m、CD-(589.8±147.87)N·m和膨胀式脊柱内固定系统椎弓根螺钉(1162.6±223.97)N·m、TSRH(584.18±157.53)。膨胀式脊柱内固定系统螺钉最大轴向拔出力最大,且与CD-和TSRH螺钉相比差异有非常显著性意义(P<0.001)。结论:膨胀式脊柱内固定系统螺钉对人骨质疏松椎体具有较强的椎弓根锚固作用。

人骨肉瘤中Bcl-2和PCNA的表达

目的 :研究骨肉瘤中 Bcl- 2和 PCNA表达的生物学意义。方法 :用免疫组织化学 S- P法 ,研究 30例骨肉瘤和 15例正常骨中 Bcl- 2和 PCNA表达情况。结果 :骨肉瘤组与正常骨组 ,骨肉瘤 、 级组与 级组 ,骨肉瘤生存组与死亡组相比 ,PCNA指数差异有显著性 (P<0 .0 5 )。骨肉瘤组与正常骨组相比 ,Bcl- 2差异有显著性 (P<0 .0 5 )。骨肉瘤 、 级组与 级组 ,骨肉瘤生存组与死亡组相比 ,Bcl- 2差异无显著性 (P>0 .0 5 )。骨肉瘤中 Bcl- 2和 PCNA表达呈显著相关性 (P<0 .0 5 )。结论 :细胞凋亡抑制和过度增殖协同作用导致骨肉瘤的发生。 PCNA指数可作为反映骨肉瘤分级和预后的指标。 Bcl- 2不能作为判断骨肉瘤分级和预后的指标。

动态模板PCR合成分泌性降钙素基因及其克隆

目的用动态模板PCR基因合成法合成与克隆含人胰岛素分泌信号的人降钙素(humancalcitoninhCT)基因并经序列分析予以确证。方法根据Genebank的人胰岛素分泌信号和人的hCT基因的序列,将其分成6个片断合成单链寡核苷酸作为PCR的引物和cDNA合成的模板。其中,在互相邻近的每两条引物之间均有19～20个碱基互补,6条合成的单链寡核苷酸在PCR反应中相邻的两条单链寡核苷酸互为引物和模板,经过3个PCR循环,直接扩增出人胰岛素和降钙素的编码序列,经过25～30循环,获得足量的PCR产物,即含人胰岛素分泌信号的hCT基因。采用琼脂糖凝胶回收法,回收目的片段胰岛素分泌信号和hCT基因全长DNA。纯化后,将此段DNA插入到克隆载体PMD18-T载体上。转化用CaCl2法制备的感受态细菌JM109,恒温震荡培养箱培养1h后,涂在含氨苄青霉素和X-gal的LB固体培养基上培养。利用氨苄抗性筛选和蓝白斑筛选实验,筛选出阳性克隆,用碱裂解法提取质粒,应用双酶切和DNA测序鉴定重组质粒。结果经动态模板PCR基因合成法合成获得212bp产物,经酶切鉴定和DNA测序确定所合成片断为胰岛素分泌信号和hCT基因全长,证明克隆到的含人胰岛素分泌信号和降钙素的基因为编码人胰岛素分泌信号和人降钙素的全长DNA序列。结论本研究为基因合成提供了一种新的可靠的方法,成功地克隆了含人胰岛素分泌信号的人降钙素基因,为人降钙素基因与后续研究提供了新的研究方法。

关节镜清理加髓腔减压治疗膝骨性关节炎

我科在中西医结合治疗膝骨性关节炎的基础上[1],从2001年2月采用关节镜下清理膝关节,辅以在髌骨和胫骨上端钻孔减压的方法治疗膝骨性关节炎46例,疗效满意,报道如下.

骨质疏松性髋部骨折患者髂骨活检及扫描电镜观察

目的 了解骨显微结构退变在骨质疏松性髋部骨折发病机制中的作用。方法 对 14例老年髋部骨折患者和 11例对照者进行了髂骨活检和扫描电镜观察。结果 老年髋部骨折患者的扫描电镜观察结果可以分为低转换和高转换两种情况。后者除骨小梁数量减少、变细等改变外 ,骨小梁结构显著退变。结论 因活跃的骨转换活动而导致的骨显微结构退变 。