下调三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2基因对人乳腺癌多西他赛耐药细胞株BT549/Docetaxel的作用

目的 下调人乳腺癌多西他赛耐药细胞株BT549/Docetaxel耐药相关基因三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2（ABCG2）的表达,检测其生物学特性的改变.方法 采用中等浓度0.08 mg/L、间歇作用法建立人乳腺癌多西他赛耐药细胞株BT549/Docetaxel,构建ABCG2的pRNAT-U6.2/Lenti小干扰RNA（siRNA）表达载体转染BT549/Docetaxel,采用噻唑蓝（MTT）法测定转染前后细胞的耐药指数,高效液相色谱测定细胞内多西他赛的浓度.结果 感染ABCG2si2、ABCG2si1、ABCG2siC后的BT549/Docetaxel细胞与未感染的BT549/Docetaxel细胞ABCG2mRNA与β-actin比较其相对表达水平分别为0.11 ±0.02、0.26 ±0.01、0.88±0.03、0.92±0.02.感染ABCG2si1、ABCG2si2的细胞内ABCG2的表达减少,与对照ABCG2siC、BT549/Docetaxel比较差异有统计学意义（P＜0.05）,分别下降了71.7％和88.0％.4种细胞经Western blot检测显示,ABCG2蛋白表达水平不同,ABCG2si1、ABCG2si2对该蛋白的表达均有抑制作用,其中后者效果显著（P＜0.05）.经MTT法检测,感染有ABCG2si2、ABCG2siC的细胞与未感染的BT549/Docetaxel细胞对Docetaxel的半数抑制剂量（IC50）分别是：31.12、69.55、76.21 mg/L,其耐药指数分别为：8.13、18.16、19.90.其中前者与后两者比较对Docetaxel的敏感性显著增加（P＜0.05）.高效液相色谱测定细胞内多西他赛的含量,BT549/Docetaxel细胞内药物的含量为7.9 ng/106个细胞,感染后BT549/Docetaxel细胞内药物的含量为66.7 ng/106个细胞,正常培养基培养4h后,感染后BT549/Docetaxel细胞内药物的含量为53.1 ng/106个细胞,BT549/Docetaxel细胞内药物的含量4.3 ng/106个细胞,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 通过调控与乳腺癌耐药密切相关的ABCG2基因可以逆转BT549/Docetaxel的耐药性.

人乳腺癌多西他赛耐药细胞株BT549/Docetaxel干细胞分选及三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2基因表达水平

目的 分选人乳腺癌多西他赛（Docetaxel）耐药细胞株BT549/Docetaxel干细胞,探讨其生物学特征.方法 采用悬浮培养联合多西他赛法分选耐药细胞株BT549/Docetaxel干细胞,采用悬浮培养法富集BT549、BT549/Docetaxel干细胞,进行CD44、CD24细胞标记和流式细胞仪检测,反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法检测BT549、BT549/Docetaxel干细胞中三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2 （ABCG2）基因表达.结果 BT549/Docetaxel与BT549干细胞的群体倍增时间分别为（39.22 ±0.65）、（29.20 ±0.50）h,差异有统计学意义（P＜0.05）.流式分析显示,BT549微球体细胞的CD44^ ＋/CD24^-/low比例为（13.8±0.5）％,高于单层培养BT549细胞的比例（2.8±0.6）％（P＜0.01）.BT549/Docetaxel微球体细胞的CD44^ ＋/CD24^-/low比例为（19.1±0.3）％,高于单层培养BT549/Docetaxel细胞的比例（5.0±0.4）％（P＜0.01）.BT549/Docetaxel微球体细胞的CD44^＋/CD24^-/low比例高于BT549微球体细胞的CD44^ ＋/CD24^-/low比例,差异有统计学意义（P＜0.05）.BT549干细胞内药物的含量为（46.9 ±0.5）ng/10^6个细胞,BT549/Docetaxel干细胞内药物的含量为（7.1±0.3）ng/10^6个细胞,两者比较差异有统计学意义（P＜0.01）.正常培养基培养4h后,BT549细胞内药物的含量为（28.3±0.6） ng/10^6个细胞,BT549/Docetaxel细胞内药物的含量（3.5±0.1） ng/106个细胞,两者比较差异有统计学意义（P＜0.01）.ABCG2的mRNA在BT549/Docetaxel干细胞内表达量明显高于在BT549干细胞内中的表达,两者差异有统计学意义（P＜0.01）.结论 成功筛选人乳腺癌多西他赛耐药细胞株BT549/Docetaxel干细胞,生长及耐药性稳定.ABCG2基因在BT549/Docetaxel干细胞内表达量明显增高.

三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2和β-微管蛋白Ⅲ基因在乳腺癌组织中的表达及其临床意义

目的检测三磷酸腺苷（ATP）结合转运蛋白G超家族成员2（ABCG2）和β-微管蛋白Ⅲ（TUBB3）基因在乳腺癌组织中的表达，探讨ABCG2和TUBB3基因与乳腺癌病理特征的关系。方法196例浸润性乳腺癌组织标本及同标本正常乳腺组织，采用逆转录．聚合酶链反应（RT-PCR）检测ABCG2和TUBB3基因的表达，分析基因表达与临床病理学特征的关系。结果196例浸润性乳腺癌组织中ABCG2基因的表达率为58．7％，电泳条带灰度值为0．685±0．126，癌旁正常乳腺组织中的表达率为30．1％，基因电泳条带灰度值为0．271±0．143，差异有统计学意义（P〈0．05）。TUBB3基因的表达率为67．9％，电泳条带灰度值为0，793±0．115，癌旁正常乳腺组织中的表达率为23．0％，基因电泳条带灰度值为0．463β-β-0．127，差异有统计学意义（P〈0．05）。ABCG2基因在肿瘤组织的表达与雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）有关（P〈0．05），与人类表皮生长因子受体-2（Her-2）、临床分期、脉管癌栓、腋淋巴结转移、肿瘤大小、细胞核增殖抗原（Ki-67）等无明显相关（P〉0．05）。TUBB3基因在肿瘤组织的表达与腋淋巴结转移、脉管癌栓、肿瘤大小、组织学分级、临床分期、Ki-67、Her-2有关（P〈0．05），与ER、PR等无相关（P〉0．05）。结论ABCG2、TUBB3基因的异常表达可能在乳腺癌耐药、发生、发展中发挥作用。

人乳腺癌多西他赛耐药细胞株相关耐药基因的筛选

目的 建立人乳腺癌多西他赛耐药细胞株BT549/Docetaxel,探讨其多药耐药基因三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2 （ABCG2）、三磷酸腺苷结合转运蛋白B1（ABCB1）、多药耐药相关蛋白1（ABCC1）、谷胱甘肽S转移酶-π（GST-π）、二氢叶酸还原酶（DHFR）、拓扑异构酶Ⅱ（TopoⅡ）和β-微管蛋白Ⅲ（TUBB3）的表达及意义.方法 采用多西他赛中等浓度、间歇作用法建立耐药细胞株BT549/Docetaxel,采用噻唑蓝（MTT）法测定其对Docetaxel的耐药指数,细胞克隆形成法测定BT549/Docetaxel对多西他赛的敏感性；高效液相色谱测定细胞内多西他赛的浓度；逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）测定人乳腺癌多药耐药细胞BT549/Docetaxel中ABCG2、ABCB1、ABCC1、GST-π、DHFR、TopoⅡ和TUBB3的基因表达.结果 人乳腺癌耐药细胞株BT549/Docetaxel的耐药指数为18.3,冻存对耐药性无明显影响,撤药培养可使耐药性降低.BT549/Docetaxel对顺铂、5-氟尿嘧啶、环磷酰胺等抗癌药物有一定程度的耐药性.BT549/Docetaxel对多西他赛的敏感性降低,其多西他赛的含量较BT549下降,BT549/Docetaxel细胞中ABCG2、ABCB1、ABCC1、GST-π和TUBB3的基因表达水平分别为0.97±0.15、0.75±0.13、0.77 ±0.14、1.49±0.31、1.52±0.22,高于BT549细胞的基因表达水平（0.45±0.19、0.37±0.12、0.33±0.11、0.76±0.33、0.33±0.21）,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 成功建立稳定的人乳腺癌多西他赛耐药细胞株BT549/Docetaxel,其耐药机制可能与ABCG2、ABCB1、ABCC1、GST-π、MRP和TUBB3基因的高表达有关.

吸脂联合微创旋切术治疗男性乳腺发育症的研究

目的探讨吸脂联合微创旋切手术治疗男性乳腺发育症，为手术治疗男性乳腺发育症提供依据。方法分析86例男性乳腺发育症的临床资料，实验组46例采用吸脂联合微创旋切手术治疗男性乳腺发育症，对照组40例采用开放式手术治疗男性乳腺发育症，分析手术切口设计、手术步骤及手术效果。结果术后随访，实验组住院时间（4．5±1．5）d、对照组住院时间（7．5±3．0）d，实验组与对照组比较住院时间较短，差异有统计学意义（P〈0．05）。实验组手术瘢痕（1．0±0．3）cm，对照组手术瘢痕（3．5±0．4）cm，实验组与对照组比较，切口隐蔽，乳腺外观形态良好，患者对手术瘢痕及胸部外形满意。两组比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论吸脂联合微创旋切术治疗男性乳腺发育症，术后胸壁外观疗效较好，住院时间短，患者满意率高。

乳腺原始神经外胚层肿瘤一例

患者男,21岁,未婚,因＆quot;右乳巨大肿块5月余＆quot;收入郑州大学人民医院（河南省人民医院）治疗.5月前无意中触及右乳一肿物,未予特殊治疗,肿物渐进性增大,伴胀痛,无局部红肿、发热等特殊不适.否认家族性恶性肿瘤病史及遗传病史.全身体格检查未见明显异常.

乳腺原发性鳞状细胞癌临床病理特征分析

目的探讨乳腺原发性鳞状细胞癌的临床病理特点。方法收集郑州大学人民医院2009-2016年的8例乳腺原发性鳞癌患者,分析肿瘤大小、腋窝淋巴结转移情况、ER、PR、Her-2状态等指标。结果乳腺鳞癌发病率为0.33%,患者平均年龄53.75岁,肿瘤平均直径为3.9 cm。ER、PR、Her-2阳性率分别为10.4%、7.6%、10.9%,腋窝淋巴结转移率44%,8例患者均行手术治疗及化疗,8人均未行内分泌治疗及靶向治疗。术后ATCC乳腺癌TNM分期,ⅡA 4例,ⅡB 3例,ⅢB 1例。8例患者随访时间为13~72个月,平均随访时间27.3个月。随访结束时有3例患者失访,2例患者死亡。余3人均健在。结论乳腺鳞癌具有发病年龄大、肿瘤直径大、较低的ER、PR、Her-2阳性率、较高的AJCC分级等特点,以铂类药物为基础的化疗方案可能是较适合乳腺鳞癌的化疗方案。

Luminal B型乳腺癌骨转移患者的临床特点和预后分析

目的探讨luminal B型乳腺癌骨转移患者的临床特点和预后情况。方法收集2004年1月至2012年1月郑州大学人民医院诊治的luminal B型乳腺癌骨转移患者128例,其中75例人表皮生长因子受体(HER)-2阴性,53例HER-2阳性,回顾性分析其临床特点和预后。结果两组患者在骨转移确诊年龄、原发肿瘤大小、腋窝淋巴结转移数目和术后骨转移发生的时间方面的差异有统计学意义(χ~2=4.477、6.927、12.209、11.222,P=0.034、0.023、0.002、0.004)。Luminal B型HER-2阴性乳腺癌患者发生骨转移后的中位生存时间为29.8个月,5年生存率22.7%,HER-2阳性乳腺癌患者分别为27.1个月和20.7%,两组患者骨转移后的生存时间差异无统计学意义(χ~2=0.398,P=0.528)。结论 Luminal B型HER-2阳性比luminal B型HER-2阴性乳腺癌骨转移患者更具有发病年龄大、原发肿瘤直径大、腋窝淋巴结转移数目多、术后发生骨转移时间早等特点,但两种类型患者的预后无显著差异。

乳腺癌术后Ⅰ期假体植入乳房重建术后使用抗生素与术后假体乳房感染的研究

目的探讨乳腺癌术后Ⅰ期假体植入乳房重建术后预防性使用抗生素与术后假体感染率的关系。方法回顾性分析2017年2月至2018年10月116例接受乳腺癌术后Ⅰ期假体植入乳房重建术患者,按抗生素预防性应用的时间分为两组:<24 h组(52例)和>24 h组(64例);采用SPSS19.0软件进行统计分析,肿瘤大小、手术时间、体温变化、切口甲级愈合时间等采用■表示,独立样本t检验;假体感染发生率采用χ~2或Fisher精确检验;P<0.05差异有统计学意义。结果 >24 h组和<24 h组在30 d内乳房假体感染发生率及在任何时间假体乳房感染发生率分别为12.5%、19.2%和15.6%、21.1%(P>0.05);两组手术切口达到甲级愈合的时间:>24 h组为(18.7±3.4)d;<24 h组为(18.4±4.4) d,两组差异无统计学意义(P>0.05)。结论乳腺癌术后Ⅰ期假体植入乳房重建术后长期预防性应用抗生素并不能进一步降低术后假体乳房感染的发生率。

乳腺癌淋巴管侵犯与淋巴结转移率的相关性研究

目的探讨乳腺癌组织中淋巴管侵犯(LVI)与淋巴结转移率(LNR)的关系。方法采用免疫组织化学法,用单克隆抗体D2-40及CK pan检测118例乳腺癌患者蜡块组织标本的LVI阳性率。结果 118例乳腺癌组织的LVI阳性率为37.3%(42/118);LVI阳性率与LNR、淋巴结转移数目、组织学分级呈正相关(χ~2=9.186、6.996、18.340,P=0.010、0.030、0.000)。结论 LVI可作为判断乳腺癌发生腋窝淋巴结转移的重要参考指标,且LNR越高,LVI发生率越高。

乳房重建术后假体乳房感染的研究进展

假体乳房植入术是人类乳房重建的重要手术方式之一,因其手术复杂及异物植入,乳房重建术后假体乳房感染成为最常见的术后并发症及导致术后乳房重建失败的重要原因,且严重影响患者的治疗及预后。笔者回顾了近年来国内外相关研究,详细阐述了乳房重建术后假体乳房感染的发生机制及临床表现,总结了其具体治疗及预防措施,旨在为乳房重建术后假体乳房感染的防治提供临床参考。

转移性手掌基底细胞癌一例

患者男,68岁,发现"左手掌结节20年余,间断疼痛"。2017年2月因结节增大切除,病理活检示:左手掌上皮性肿瘤,符合基底细胞癌。免疫组化染色:CK5/6(+)、CK(+)、CP(-)、P40(-)、Ki-67(巢团30%+)。2017年12月发现"左腋窝肿物,无痛性增大"。查体:左手掌1个大小1 cm×1 cm凹陷瘢痕,边界清,无触痛。左腋窝肿物大小约6 cm×5 cm,质韧,边界欠清,活动差,伴轻微触痛。穿刺活检病理示:基底细胞癌,不排除鳞状细胞癌。免疫组化染色:CK7、P40、P63、E-cadherin、CK34Βe12均阳性.

青春期巨乳症术后短期复发一例

患者女,10岁,因＂双乳巨乳缩小成形术后1年,迅速增大半年余＂来河南省人民医院就诊。入院前1年余因＂发现双乳发育1年,迅速增大半年余＂在本院行＂倒T形双侧巨乳缩乳术＂,术中保留乳头乳晕及部分腺体,术后恢复良好,病理结果提示：符合幼年性乳腺肥大。术后随访6个月,双侧乳头乳晕均成活,双侧对称性良好,未见明显复发征象,患者及家属对效果均满意。现双侧乳腺术后迅速增大半年,再次就诊入院。