8-Br-cAMP和槲皮素诱导Eca-109细胞p16基因启动子DNA结合蛋白的定位研究

目的 :探讨 8 Br cAMP和槲皮素 (quercetin)诱导的Eca 10 9细胞p16基因启动子特异性结合的序列特异性DNA结合蛋白 (DBP)的定位。方法 :应用DBP定位改进方法 ,以制备的特异性DNA探针检测目的DBP在细胞内的定位 ;以免疫细胞化学技术 ,检测细胞PCNA免疫反应性 ,作为肿瘤细胞恶性程度生物标志。结果 :DBP定位信号以胞核为主 ,胞质有阳性信号的细胞 ,胞膜也呈阳性信号 ;2实验组信号比对照组强 ;各组信号均以大细胞更强 ;PCNA免疫细胞化学阳性呈棕黄色颗粒 ,主要位于胞核 ,对照组强于实验组。各组均以大细胞阳性信号更强。结论 :2实验组与p16基因启动子结合的DBP主要位于胞核 ,但核外存在结合潜力的蛋白质。 2实验组PCNA免疫反应性均下降。提示这些与p16基因启动子区结合的DBP在一定程度上可诱导细胞恶性逆转化。

8-Br-cAMP和槲皮素对Eca-109细胞凋亡中P38和Caspase-3表达的影响

目的 :探讨 8 Br cAMP和槲皮素对Eca 10 9细胞凋亡中P38、Caspase 3表达的影响。方法 :将贴壁培养的Eca 10 9细胞随机分为 3组 :①对照组 :只加DMEM(Sigma)培养液 (含体积分数 10 %胎牛血清 )培养 4 8h。②Br组 :终浓度为 2× 10 -5mol/L 8 Br cAMP的培养液培养 4 8h。③Q组 :终浓度为 4 3μmol/L槲皮素的培养液培养 4 8h。对以上 3组细胞以TUNEL法染色计数细胞凋亡率。以免疫组化方法观察 3组细胞的P38MAPK IR和Caspase 3 IR反应性。结果 :Br组及Q组细胞凋亡率高于对照组 ;Br组及Q组细胞的P38MAPK IR高于对照组 ;Br组及Q组细胞的Caspase 3 IR亦高于对照组。P38MAPK IR与Caspase 3 IR呈正相关。P均 <0 .0 5。结论 :P38MAPK及Caspase 3参与了 8 Br cAMP及槲皮素诱导的Eca 10

8-Br-cAMP和槲皮素对Eca-109细胞DNApolβ基因及相关基因表达的影响

目的 :探讨 8 Br cAMP及槲皮素等分化诱导剂对Eca 10 9细胞DNApolβ基因及相关基因表达的影响。 方法 :将培养的Eca 10 9细胞分为 3组 :①加 8 Br cAMP组 (Br组 ) ;②加槲皮素组 (Q组 ) ;③不加任何药物对照组 (C组 )。同时培养 4 8h ,将野生型DNApolβ的cDNA ,EGFRcDNA ,野生型 (wt)p5 3cDNA及c myccDNA分别制备了生物素 /地高辛标记的探针进行原位杂交和RNA斑点印迹阵列。另进行POLB ,XRCC1,VEGF及PCNA的免疫组化染色及免疫斑点印迹阵列。结果 :Br组和Q组的DNApolβ ,EGFR ,c myc基因表达下调而wtp5 3基因表达上调。POLB ,XRCC1,PCNA及VEGF免疫斑点印迹减弱。 8 Br cAMP及槲皮素显著下调Eca 10 9细胞的DNApolβ基因表达及相关癌基因表达 ,同时上调抑癌基因的表达。作为POLB的异二聚体XRCC1及恶性细胞生物标志的PCNA及VEGF表达下调。结论 :分化诱导剂下调Eca 10 9细胞DNApolβ基因表达 ,提示Eca 10 9细胞的polβ基因是高表达的 ;功能调整后的polβ通过相关基因表达的改变尤其是wtp5

K562和HL60细胞分化抗原的表达

目的:研究髓系白血病细胞系K562和HL60分化抗原的表达,分析其免疫学表型特征。方法:收集RP MI1640培养3d的对数生长期K562和HL60细胞,用流式细胞仪测定细胞膜表面CD7、CD11b、CD13、CD14、CD33、CD34、CD38、CD64、CD41a、CD117和HLA DR11种分化抗原表达百分率,了解其免疫学表型,同时进行瑞特姬姆萨(Wright Giemsa)染色观察细胞形态和髓过氧化物酶染色(MPO)。结果:K562白血病细胞的髓系特征分化抗原CD13和CD117表达率较低,为5.3%和5.2%,其他分化抗原CD11b、CD14、CD33、CD64、CD41a和反映细胞阶段性特征的分化抗原CD7、CD34、CD38和HLA DR表达均处于极低水平,MPO染色为阴性;HL60白血病细胞的髓系特征分化抗原CD13表达率高达94.0%,仅伴随有少量CD11b、CD64和CD41a表达,祖细胞特征的CD38表达率为36.7%,MPO染色为阳性;细胞形态学上K562细胞原始未分化特性比较明显,HL60细胞质内已有嗜天青颗粒和空泡等细胞分化特征。结论:K562细胞的免疫学表型和形态学均表现出未分化细胞特征,因其具有多项分化潜能,因此更适合进行细胞多向分化研究。HL60的髓系祖细胞特性明显,适合进行粒系、单核系分化研究。

8-Br-cAMP和槲皮素单独和联合应用对Eca-109细胞凋亡和Bcl-2、Bax、XRCC1等凋亡相关蛋白的作用

目的 :探讨 8 Br cAMP和槲皮素联合应用对Eca 10 9细胞的凋亡和Bcl 2、Bax、XRCC1等凋亡相关蛋白的作用。方法 :将Eca 10 9细胞随机分为 4组 :① 8 Br cAMP组 (Br组 ) ;②槲皮素组 (Q组 ) ;③ (Br+Q)组 ;④不加药物的对照 (C)组。同时培养 4 8h ,对以上 4组细胞制备细胞滴片及硝酸纤维素膜 (NCM)滴膜 2种标本 ,分别进行Bcl 2、Bax、XRCC1的免疫组化和免疫斑点印迹实验 ,并以TUNEL法检测各组细胞凋亡率。结果 :细胞凋亡率 ,C组为 4 % ,(Br +Q)组为 70 % ,Br组为 4 2 % ,Q组为 35 % ,(Br+Q)组 >Br组或Q组 >C组 ,P <0 .0 0 1。Br、Q及 (Br+Q)组与对照组相比 ,Bcl 2 IR及XRCC1 IR皆低于C组 ,P <0 .0 0 1,而Bax IR则高于C组 ,P <0 .0 0 1;Br组 :Q组或Br组 :(Br +Q)组 ,P >0 .0 5。Bcl 2 IR与XRCC1 IR呈显著正相关 ,与Bax IR和Bax IR与XRCC1皆呈显著负相关。结论 :Br与Q联合用药与单独用药皆可下调Bcl 2及XRCC1表达 ,上调Bax表达 ;联合用药的细胞凋亡率显著高于单用Br或Q。提示 。

8-Br-cAMP与顺铂对Eca-109细胞DNA polβ,wtp53基因表达及多药耐受蛋白的影响

目的 :比较分化诱导剂 8 Br cAMP与基因毒性药物顺铂对Eca 10 9细胞DNApolβ及wtp5 3基因表达和多药耐受蛋白的影响。方法 :分别制备生物素和地高辛标记的polβ探针和生物素标记的野生型p5 3(wtp5 3)探针 ,并检测各探针灵敏度。将培养的人食管癌Eca 10 9细胞分组如下 :① 8 Br cAMP组 (Br组 ) ;②不加 8 Br cAMP的对照组 (C1组 ) ,①②组同时培养 4 8h ;③顺铂组 (Pt组 ) ;④不加Pt的对照组 (C2组 ) ,③④组同时培养 2 4h。应用原位杂交技术显示各组细胞polβ基因的表达。对①②及③组细胞进行polβ及wtp5 3双信号原位杂交 ,并应用多药耐受蛋白 (MRP)的免疫组化方法检测耐药性。结果 :生物素标记的polβ探针的杂交信号呈兰紫色细颗粒 ,分布于胞质 ;Br组信号弱于C1组 ,P <0 .0 5。Pt组的信号比C2组强 ,P <0 .0 5。Br组的MRP IR弱于C1组 ,P <0 .0 5 ;Pt组的多药耐受蛋白免疫反应性 (MRP IR)强于C2组 ,P <0 .0 5。地高辛标记的polβ探针的杂交信号呈橙色细颗粒 ,生物素标记的wtp5 3探针的杂交信号呈蓝紫色细颗粒 ,均分布于胞质。在双杂交信号细胞内C1组的橙色强于蓝紫色信号 ;而Br组的蓝紫色信号较明显 ,Pt组的橙色信号较C1组更显著 ,3组相比P皆 <0 .0 5。结论 :8 Br cAMP可下调polβ基因表达及耐药性 ,上?

8-Br-cAMP和槲皮素对Eca-109细胞内游离钙离子浓度的影响

目的 :观察 8 Br cAMP和槲皮素对人食管癌Eca 10 9细胞内游离钙离子浓度 ([Ca2 + ]i)的影响。方法 :将贴壁培养的Eca 10 9细胞随机分成 3组 ,Br组 :加 8 Br cAMP至终浓度为 2× 10 5mol/L ;Q组 :加槲皮素至终浓度为 4 3μmol/L ;C组 :不加任何药物 ,只加入新培养液培养。 3组细胞同时培养 4 8h ,用激光共聚焦显微镜观察 3组细胞内钙离子的荧光强度。结果 :对照组细胞内游离钙离子荧光强度为 5 9.2± 8.1,Br组细胞内游离钙离子荧光强度为6 3.3± 8.5 ,与对照组比较差异无统计学意义 (P >0 .0 5 ) ;Q组细胞内游离钙离子荧光强度为 113.3± 12 .5 ,与对照组相比差异有统计学意义 (P <0 .0 1)。结论

同一细胞非放射性双原位杂交信号显示技术

目的 :探讨同一细胞内双原位杂交信号的显示技术。方法 :以地高辛标记的polβ探针加生物素标记的表皮生长因子受体 (EGFR)探针或生物素标记的wtp5 3探针对人食管癌Eca 10 9细胞同时进行原位杂交后 ,以anti Dig AP孵育 ,以AP Red为底物显色 ,杂交信号呈桔红色或桔黄色细颗粒。继之以SA AP孵育后以NBT/BCIP底物显色 ,杂交信号呈蓝紫色颗粒。结果 :在同一细胞内可见桔黄色和蓝紫色颗粒双杂交信号。结论 :应用非放射性双杂交信号的原位杂交技术可观察单个细胞内

8-Br-cAMP和槲皮素对Eca-109细胞iNOS基因拷贝及Caspase-3表达的影响

目的 :观察 8 Br cAMP和槲皮素对Eca 10 9细胞iNOS基因拷贝及Caspase 3表达的影响。方法 :将贴壁培养的Eca 10 9细胞随机分成 3组 ,Br组 :加 8 Br cAMP至终浓度为 2× 10 5mol/L ;Q组 :加槲皮素至终浓度为 4 3μmol/L ;C组 :不加任何药物 ,只加入新培养液培养。 3组细胞同时培养 4 8h。采用原位斑点印迹法显示iNOS基因拷贝和mRNA的表达 ,采用细胞免疫化学技术显示Caspase 3的表达。结果 :Br和Q组较C组iNOS基因拷贝和mRNA表达信号较强。Br和Q组细胞内Caspase 3免疫反应 (IR)性较强 ,Br和Q组与对照组相比 ,存在显著性差异 (P 0 .0 1) ;Br组的Caspase 3 IR强于槲皮素组 (P <0 .0 1)。结论 :8 Br cAMP和槲皮素皆可上调iNOS基因的扩增和表达 ,最终可都通过上调Caspase 3的表达 ,诱导Eca 10 9细胞凋亡。

8-Br-cAMP和槲皮素单独和联合应用对Eca-109细胞POLB及多药耐受相关蛋白的影响

目的 :探讨 8 Br cAMP和槲皮素单独和联合应用对Eca 10 9细胞耐药性的影响。方法 :将培养的Eca 10 9细胞随机分为 4组 :① 8 Br cAMP组 (Br组 ) ;②槲皮素组 (Q组 ) ;③ (Br+Q)组 ;④不加药物的对照组 (C)组。同时培养 4 8h ,对以上 4组细胞制备细胞滴片及硝酸纤维素膜 (NCM)滴膜 2种标本 ,分别进行MRP和POLB的免疫组化染色和免疫斑点印迹阵列及TLC扫描。结果 :免疫组化染色显示 :C组的MRP IR、POLB IR强于Br组、Q组或 (Br+Q)组 ,P <0 .0 1。TLC扫描OD值 :C组MRP IR高于Br、Q(Br+Q)组约 3倍 ;POLB IR高于Br、Q或 (Br+Q)组约 2倍 ;MRP与POLB呈显著正相关r=0 .9838,P <0 .0 1。结论 :8 Br cAMP和槲皮素联合用药或单独用药均可降低Eca 10 9细胞的多药耐受性而提高药物的敏感性 。

8-Br-cAMP对Eca-109细胞c-myc,wtp53,iNOS基因和EGFR表达的影响

目的 :探讨 8 Br cAMP对Eca 10 9细胞c myc、wtp5 3、iNOS基因和EGFR表达的影响。方法 :将贴壁培养的Eca 10 9细胞随机分为 2组 :①实验组 :加 8 Br cAMP至终浓度为 2× 10 -5mol/L ,培养 2 4h ;②对照组 :不加 8 Br cAMP ,培养 2 4h。对 2组的细胞涂片和硝酸纤维素膜 (NCM)标本进行c myc、wtp5 3、iNOS基因和EGFR表达检测 ,并对扫描数值进行统计学处理。结果 :原位杂交及免疫组化反应信号皆定位于Eca 10 9细胞的胞质 ,扫描数值显示 :①c mycmRNA :实验组为 3.38± 0 .99,对照组为 5 .18± 1.39;②wtp5 3mRNA :实验组为 2 .74± 0 .83,对照组为 0 .38±0 .2 7;③iNOSmRNA :实验组为 4 .5 2± 0 .74 ,对照组为 2 .6 3± 0 .13;④EGFR IR :实验组为 2 .37± 1.0 5 ,对照组为 4 .38±0 .4 8。以上实验组与对照组比较差异有统计学意义 (P均 <0 .0 5 )。结论 :c myc、wtp5 3和NO均可参与 8 Br

8-Br-cAMP对Hela细胞wtp53,mtp53,c-myc和iNOS基因表达的影响

目的 :探讨 8 Br cAMP对Hela细胞癌基因和抑癌基因等表达的影响。方法 :将培养的Hela细胞分为 3组 :① 8 Br cAMP组 (Br组 ) :加至 8 Br cAMP终浓度为 2× 10 -5mol/L ;②阳性对照组 (60 Co组 ) :给予60 Co照射量 4Gy ,72 0s;③阴性对照组 (C组 ) :仅加含体积分数为 10 %胎牛血清的DMEM培养液。各组细胞均培养 4 8h后 ,将 1× 10 7ml-1细胞悬液滴加至预先处理过的硝酸纤维素膜和载玻片上。应用原位杂交和完整细胞原位斑点印迹技术分别检测 3组Hela细胞中野生型p5 3(wtp5 3)、突变型p5 3(mtp5 3)、c myc和iNOS基因的表达。结果 :8 Br cAMP组与阳性对照组相比 ,差异无统计学意义 ,P >0 .0 5 ;与阴性对照组相比 ,上调wtp5 3和iNOS基因的表达 ,同时下调mtp5 3和cmyc基因的表达 ,P <0 .0 1。结论 :结果提示 8 Br

纳米脂质体槲皮素对Eca-9706细胞凋亡及相关蛋白表达的影响

目的:探讨纳米脂质体槲皮素(nLQ)诱导人食管癌Eca-9706细胞逆转化及凋亡的效应及其机制。方法:采用旋转蒸发法制备以氯仿和DMSO为溶剂的脂质体槲皮素,将其超声波破碎并经80nm滤膜过滤制成nLQ,不同浓度(10、20、40、80和100μmol/L)作用于Eca-9706细胞,用MTT法检测各组Eca-9706细胞的生长抑制率。分别取Eca-9706细胞,分为nLQ组(加40μmol/LnLQ)和对照组。TUNEL法检测2组细胞凋亡率;免疫细胞化学/免疫印迹法检测2组处理48h后Eca-9706细胞CyclinD1、PTEN、c-Met、VEGF、组蛋白去乙酰化酶(HDAC)1及NF-κB表达的变化。结果:各组Eca-9706细胞生长抑制率(F分别为128.041、142.683和231.054,P<0.001)和2组细胞凋亡率(t=94.770,P<0.001)比较,差异均有统计学意义。PTEN免疫反应性和印记信号增强(t分别为5.352和4.308,P均<0.05),Cyclin D1、c-Met、VEGF、HDAC1和NF-κB的免疫反应性减弱(t分别为4.006、9.184、13.853、4.698和3.575,P均<0.05),其印迹信号亦减弱(t分别为3.827、6.399、7.868、4.695和3.406,P均<0.05);以上各细胞蛋白的免疫细胞和免疫印迹信号之间呈正相关(rs分别为0.952、0.915、0.927、0.842、0.879和0.855,P均<0.05)。结论:nLQ可抑制Eca-9706细胞生长及增殖,逆转Eca-9706细胞PTEN的低表达和c-Met及VEGF的高表达,并通过抑制HDAC1和NF-κB及激活PTEN表达的HDAC抑制信号途径而诱导细胞凋亡。

8-Br-cAMP和槲皮素对Eca-109细胞核基质蛋白的影响

目的 :探讨 8 Br cAMP和槲皮素对Eca 10 9细胞核基质蛋白的影响。方法 :将贴壁培养的Eca 10 9细胞随机分成 3组 ,Br组 :加 8 Br cAMP至终浓度为 2× 10 5mol/L ;Q组 :加槲皮素至终浓度为 4 3μmol/L ;C组 :不加任何药物 ,只加入新培养液培养。同时培养 4 8h ,应用SDS PAGE技术分析 3组细胞核基质蛋白成分。结果 :实验组 (Br组与Q组 )与对照组 (C组 )比较 ,相对分子质量 6 4 0 0 0、6 6 0 0 0、5 80 0 0为增加的条带 ,14 0 0 0、170 0 0、180 0 0为增强的条带 ,92 0 0 0是减弱的条带。 2个实验组相比 ,以Br组变动显著。结论 :8 Br cAMP和槲皮素可以诱导Eca 10 9细胞核基质蛋白成分改变 ,可能对肿瘤细胞基因表达调控。

8-Br-cAMP和槲皮素对Eca-109细胞p16基因启动子DNA结合蛋白及其mRNA表达的影响

目的 :应用Southwestern技术研究 8 Br cAMP和槲皮素 (quercetin)对Eca 10 9细胞DNA结合蛋白与p16基因启动子区的结合调控mRNA表达的影响。方法 :将贴壁培养的Eca 10 9细胞随机分成 3组 ,Br组 :加 8 Br cAMP至终浓度为 2× 10 5mol/L ;Q组 :加槲皮素至终浓度为 4 3μmol/L ;C组 :不加任何药物 ,只加入新培养液培养。同时培养 4 8h ,应用质粒提取及限制性酶切回收目的DNA片段 ,采用生物素随机引物标记探针 ;应用DNA斑点印迹技术检测探针的灵敏度后以Southwestern印迹技术检测与p16基因启动子区特异性结合的DNA结合蛋白 (DBP) ;以原位杂交检测p16基因mRNA的表达情况。结果 :实验组条带强于对照组 ,Br组强于Q组 ;核基质DNA结合蛋白主带位于Mr6 6 0 0 0、5 80 0 0和 2 0 0 0 0 ;核外DNA结合蛋白主带位于Mr4 0 0 0 0、2 80 0 0和 2 0 0 0 0 ;2者中 2 0 0 0 0是共同成分。原位杂交技术显示p16基因mRNA蓝紫色信号颗粒位于胞质 ,杂交信号以实验组较强。结论 :8 Br cAMP和quercetin尤其是前者作用于人食管癌Eca 10 9细胞 ,诱导产生与p16基因启动子结合较强的DBP 。

8-Br-cAMP和槲皮素对Eca-109细胞相关基因的DNA拷贝和基因表达的影响

目的 :探讨 8 Br cAMP和槲皮素对Eca 10 9细胞wtp5 3、c myc、bcl 2基因的扩增、表达以及VEGF表达的影响。方法 :将贴壁培养的Eca 10 9细胞随机分成 3组 ,Br组 :加 8 Br cAMP至终浓度为 2× 10 5mol/L ;Q组 :加槲皮素至终浓度为 4 3μmol/L ;C组 :不加任何药物 ,只加入新培养液培养。 3组细胞同时培养 4 8h。以cDNA阵列技术显示Eca 10 9细胞凋亡中wtp5 3、c myc、bcl 2DNA拷贝和mRNA的表达 ,以免疫组化法显示VEGF的表达。结果 :Br组和Q组与C组相比wtp5 3DNA拷贝和mRNA信号较强 ,c myc、bcl 2DNA拷贝和mRNA信号较弱 ,VEGF表达较弱。结论 :8 Br cAMP和槲皮素皆可通过上调wtp5 3,下调bcl 2、c myc基因的扩增和表达 ,下调VEGF的表达 ,而诱导Eca 10

纳米脂质体槲皮素联合8-Br-cAMP对Rb44细胞凋亡的影响

目的:探讨纳米脂质体槲皮素(nLQ)和8-Br-cAMP(Br)对人视网膜母细胞瘤Rb44细胞凋亡和p53、p21waf1mRNA表达及Bcl-2、Bax和Caspase-3蛋白表达的影响。方法:Rb44细胞分为4组:nLQ组给予终浓度为40μmol/LnLQ;Br组给予终浓度为2×10-5mol/LBr,联合用药组给予同上浓度的nLQ和Br,对照组不给药。采用TUNEL法检测各组细胞的凋亡率。采用原位杂交技术检测p53、p21waf1mRNA的表达,免疫细胞化学方法检测Bcl-2、Bax及Caspase-3蛋白的表达。结果:与对照组相比,单用nLQ或Br均可增高凋亡率,上调p53和p21waf1mRNA的表达及Bax和Caspase-3蛋白的表达,下调Bcl-2蛋白的表达(P<0.001);nLQ及Br联用呈现协同效应(P<0.001)。结论:nLQ和8-Br-cAMP可能通过上调p53和p21waf1基因的表达,诱导线粒体途径和Caspase-3的最终共同凋亡途径而诱导Rb44细胞趋向凋亡,且两药联用呈现协同效应。

8-Br-cAMP对Eca-109细胞凋亡的影响

目的:探讨8-Br-cAMP对人食管癌Eca-109细胞凋亡的影响及其相关基因表达的变化。方法:采用TUNEL法检测细胞凋亡,应用原位杂交、组织化学、免疫组织化学以及RNA和蛋白质斑点印迹技术相对定量,观察8-Br-cAMP对Eca-109细胞凋亡相关基因及凋亡效应分子表达的影响。结果:8-Br-cAMP作用48 h后可显著诱导Eca-109细胞凋亡,并见到野生型(wt)p53及iNOS基因表达上调,bcl-2、c-myc基因表达下调,iNOS活性增强,Fas-IR减弱。结论:8-Br-cAMP通过调控凋亡相关基因及凋亡效应分子的表达,使之相互作用、相互协同,诱导人食管癌Eca-109细胞的凋亡。其中,wtp53在该凋亡的诸多因素中起着关键作用。

8-Br-cAMP诱导人视网膜母细胞瘤HXO-Rb44细胞系的凋亡效应

目的:探讨 8 -Br- cAMP对人视网膜母细胞瘤HXO Rb44细胞系的凋亡效应。方法:以 8-Br- cAMP体外作用HXO -Rb44细胞,分为 3个实验组和 3个对照组,分别进行 24h, 48h和 72h培养。应用RNA斑点印迹、免疫组化斑点印迹及原位杂交技术,分别对HXO -Rb44细胞的bcl 2杂交信号和PCNA、Fas、FasL表达信号进行检测。采用TUNEL法检测HXO -Rb44细胞的凋亡率。结果:在不同培养时间的实验组中HXO -Rb44细胞的凋亡率明显高于各自的对照组(未经 8- Br- cAMP处理);而PCNA、Fas、bcl- 2杂交信号扫描数值低于对照组,FasL杂交信号扫描数值高于对照组,尤以 48h的作用最显著。结论: 8- Br cAMP可能是通过下调细胞内的bcl -2基因、Fas和PCNA的表达和上调FasL的表达而诱导HXO- Rb44细胞系凋亡。

RNAi对人胃癌BGC823细胞β-catenin基因的抑制作用

目的:应用RNAi技术抑制胃癌BGC823细胞βcatenin基因的表达,探讨该基因在胃癌细胞生长增殖中的作用。方法:体外转录合成短发夹状RNA,用脂质体转染系统将其导入细胞内。应用RTPCR检测转染后目的基因mRNA的表达水平;应用MTT检测转染后癌细胞生长增殖情况。结果:RTPCR电泳结果显示RNAi可抑制胃癌细胞βcatenin的表达,第2d和第3d抑制率可达90%以上。MTT实验显示βcatenin基因受抑后细胞的生长增殖受到明显抑制,抑制率最高达43%;且抑制率随着时间而升高。结论:RNA干扰技术作为一种新的基因治疗技术在胃癌治疗方面有着巨大的应用潜力。