河南林州食管癌高发区食管癌和癌前病变患者血清蛋白质质谱

背景与目的:食管癌和癌前病变组织中部分分子改变可在血液中反映出来,但这些指标的灵敏度和特异性较低,临床应用受到限制。血清蛋白质质谱分析技术有助于筛选癌变密切相关蛋白。本研究通过探讨食管癌高发区人群食管正常粘膜(normal,NOR)、食管上皮基底细胞过度增生(basalcellhyperplasia,BCH)、不典型增生(dysplasia,DYS)和食管癌(esophagealcarcinomc,EC)患者的血清蛋白质质谱的变化特征,为筛选和建立早期诊断和高危人群检测的血清学指标提供理论依据。方法:采用弱阳离子结合芯片(WCX2)及表面增强激光解吸电离飞行时间质谱仪(SELDI-TOF-MS)检测EC高发区无症状普查人群130人(NOR63人、BCH40人、DYS27人)和高发区EC30人的血清蛋白质质谱进行分析。应用BiomarkerPattern软件建立决策树分类模型,经10倍交叉验证得到该分类模型进行验证,测试组病变人群的诊断率和特异性(排除率)。结果:BCH组质荷比(M/Z)为M9306.61u的一种、DYS组M/Z为M13765.90u的一种及EC组M/Z为M2942.15u和M15953.40u的两种蛋白质分别建立决策树分类模型,训练组BCH、DYS和EC的敏感性(检出率)分别为57.5%(23/40)、88.8%(24/27)和96.6%(29/30),特异性分别为96.8%(61/63)、63.4%(40/63)和92.0%(58/63);测试组BCH、DYS和EC敏感性分别为57.5%(23/40)、66.6%(18/27)和60.0%(18/30),特异性为95.2%(60/63)、71.4%(45/63)和84.1%(53/63)。结论:M/Z为M9233.09u、M13657.15u、M2918.91u和M15827.37u的4种蛋白质可能包含有可用于食管癌高发区人群筛查的血清标记物,血清蛋白质质谱检测为食管癌和癌前病变的诊断和筛查提供了新的手段。

河南食管癌高发区食管癌高癌家族调查

目的:了解食管癌家族聚集性的流行状况。方法:采用统一问卷调查表,逐户调查。对河南省食管癌高发区448户1107人进行家系调查。结果:共收回264份问卷。264户中,有家族性食管癌共153户(58%)。直系三代中发生10例以上食管癌患者的家庭有5户(2%),7例患者的家庭有8户(3%),而三代中发生6例、5例、4例和3例食管癌的家庭分别为13户(5%)、21户(8%)、28户(11%)和46户(17%)。结论:河南食管癌高发区食管癌家族聚集性发生十分常见,提示遗传因素在食管癌变中可能起重要作用。

食管癌前病变和癌组织中p15、p16、mdm2和p53蛋白的表达

目的:探讨食管癌高发区河南林州市食管癌患者p15、p16、mdm2和p53的表达变化特征及其与各级病变的关系。方法:取食管癌高发区河南林州市居民156例的食管内镜黏膜活检组织(包括正常食管上皮(NOR)21例,基底细胞过度增生(BCH)45例,不典型增生(DYS)23例,原位癌组织(CIS)45例和鳞状细胞癌(SCC)22例),采用免疫组化ABC法分析p15、p16、mdm2和p53蛋白的表达情况。结果:NOR和各级癌前病变组织及SCC组织中均出现不同程度的p15、p16、mdm2和p53表达。随着病变发展(从NOR→BCH→DYS→CIS→SCC),p15和p16的表达逐渐降低,mdm2和p53的表达逐渐增高(P<0.05)。结论:p15、p16的低表达和p53、mdm2的高表达可能是导致病变持续向癌方向发生发展的机制之一。

食管癌变过程中p53、BrdU、P21^(waf1)和PCNA蛋白表达的变化

目的:探讨食管癌及癌前病变组织中p53、P21^(waf1)、PCNA及S期细胞标记指数(BrdU)表达的变化。方法:采用免疫组化ABC法对食管癌高发区无症状食管活检组织179例(正常上皮31例,基底细胞过度增生(BCH)117例,不典型增生(DYS)31例)、食管癌手术切除标本26例以及同一个体食管癌手术标本37例及相应癌旁组织中(正常上皮7例,BCH29例,DYS23例)p53、PCNA、BrdU和P21^(waf1)进行检测。结果:不同个体和同一个体病理形态学相似的食管正常、各级癌前病变和癌组织中p53、P21^(waf1)、PCNA和BrdU蛋白表达变化相似。随病变程度加重,PCNA、p53和BrdU阳性细胞数均呈上升趋势,但P21^(waf1)呈下降趋势(P<0.05)。BrdU阳性表达与食管癌患者的年龄、性别、分化程度、肿瘤浸润程度及淋巴结转移均无关(P>0.05)。p53蛋白表达与食管癌患者淋巴结转移有关(P<0.05),与其他指标无关;P21^(waf1)的表达与细胞分化程度有关(P<0.05);PCNA的表达与细胞分化程度和淋巴结转移有关(P<0.05)。结论:不同个体和同一个体食管癌变过程中存在相似的分子变化。在食管癌变过程中p53蛋白可能起重要的促进细胞增生的作用;P21^(waf1)可能是一个重要的保护因子。

食管癌高发区反流性食管炎患病情况调查

目的:探讨河南食管癌高发区居民反流性食管炎(RE)的流行病学及组织病理学变化特征。方法:采用RE问卷调查、胃镜黏膜活检和组织病理学检查等技术,分析河南食管癌高发区居民RE变化特征和规律。结果:胃镜检查共发现26例RE患者(26/412,6%),RE洛杉矶分级B级为主(23/26)。412例接受胃镜检查的居民中,327例接受问卷调查,其中RE患者21例;RE最常见的症状依次为烧心(33%),反酸(32%),反胃(30%)。以胃镜检查正常者21例为正常对照,RE患者基底细胞过度增生(BCH)和间变(DYS)的检出率高于正常对照,未检出食管癌、肠上皮化生和Barrett′s食管;RE患者食管下段上皮乳头高度和密度均高于正常对照(P<0.05)。RE患者食管下段黏膜病变组织中嗜酸性粒细胞浸润明显,正常对照无浸润。结论:食管上皮乳头升高和乳头密度增大及嗜酸性粒细胞浸润是RE主要的组织病理学改变,并常伴有BCH和DYS改变以及极少的Barrett′s食管发生率,提示河南食管癌高发区食管贲门交界部腺癌的发生模式可能与西方不同。

食管癌和淋巴结转移组织中c-myc,hTERT和c-MET蛋白的表达

目的:探讨食管癌和淋巴结转移组织中c-myc、hTERT和c-MET的表达。方法:利用组织微阵列技术,采用免疫组化ABC法,测定58例食管癌及其相应的癌旁组织、8例转移淋巴结组织中c-myc、hTERT和c-MET的表达。结果:癌旁、癌及淋巴结转移组织中c-myc阳性率分别为7%,66%,75%;hTERT阳性率分别为0%,48%,75%;c-MET阳性率分别为7%,34%,75%;癌旁和癌组织间c-myc和hTERT的表达差异有统计学意义(P<0.05),癌旁和癌组织间,以及癌和淋巴结转移灶之间c-MET的表达差异均有统计学意义(P<0.05)。食管癌组织中c-myc与hTERT的表达呈正相关(r=0.411,P=0.002),c-myc与c-MET的表达不相关(r=0.211,P=0.146)。结论:c-myc、hTERT和c-MET的高表达可能与食管癌发生发展相关,c-myc可能参与了hTERT的激活过程,c-MET的高表达可能参与了食管癌淋巴结的转移过程。

家族性食管癌组织中FHIT、p53蛋白的表达

目的:探讨家族性食管癌组织中脆性组氨酸三联体基因(FHIT)和p53蛋白的表达。方法:采用免疫组织化学ABC法对74例河南省林州市食管癌患者(其中33例家族性食管癌,41例非家族性食管癌)手术切除标本癌及癌旁正常组织中FHIT及p53蛋白进行检测。结果:食管癌组织中FHIT蛋白异常表达率(39%,29/74)高于癌旁正常组织(3%,1/31),家族性食管癌组织中FHIT蛋白异常表达率(56%,18/33)高于非家族性食管癌组织(27%,11/41)(P均<0.05)。家族与非家族性食管癌组织p53蛋白阳性表达率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:FHIT异常表达可能与食管癌家族高易感性密切相关;p53可能与其他易感因素协同作用,影响食管癌的发生。

P型铜转运ATP酶在食管癌组织中的表达及与预后的关系

目的:探讨食管鳞状细胞癌组织中P型铜转运ATP酶(ATP7B)的表达与有无淋巴结转移及预后的关系。方法:采用免疫组织化学ABC法检测64例手术切除的食管鳞状细胞癌组织中ATP7B的表达情况,并结合临床资料进行分析。结果:ATP7B的免疫阳性反应主要定位于食管癌细胞的细胞膜和(或)细胞浆,癌组织中ATP7B的阳性率为63%(40/64),其中有淋巴结转移的ATP7B阳性率为73%(30/41),无淋巴结转移阳性率为43%(10/23),两者具有显著性差异(P=0.019);术后生存期<5年组的ATP7B阳性表达率为72%(33/46),术后生存期>5年组的ATP7B阳性表达率为39%(7/18),两者具有显著性差异(P=0.015)。结论:ATP7B在食管鳞状细胞癌组织中的过度表达与食管癌的预后密切相关。

食管癌细胞和癌旁组织中核转录因子NF-κBmRNA的表达

目的:探讨核转录因子(nuclearfac-torkappaB,NF-κB)基因在食管癌组织和细胞系中的表达状况。方法:采用RT-PCR方法检测食管癌组织、食管癌细胞系和食管上皮永生化细胞系中NF-κBmRNA基因的表达状况。结果:NF-κBp65、NF-κBp50mRNA在正常组织中未见表达,食管癌细胞系EC109、EC1、EC18和食管上皮永生化细胞系NECA6-E6E7和NECA6-E6E7-hTERT均出现NF-κBp65、NF-κBp50mRNA的表达。在癌旁组织中,NF-κBp65和NF-κBp50mRNA的表达率分别为30%(6/20)和25%(5/20),在食管癌组织中分别为65%(13/20)和55%(11/20),在食管癌变过程中表达率呈上升趋势。结论:NF-κB基因可能参与了食管癌的癌变过程。

河北省磁县医院1973—2005年4418例食管癌和贲门癌病例分析

目的动态观察河北省磁县医院食管癌和贲门癌就诊患者的临床特征，加深对该地区食管癌和贲门癌发病情况的了解。方法严格记录磁县医院33年间（1973-2005年）食管癌和贲门癌患者手术记录，逐年分析手术患者的患病情况、性别、年龄、血型等。结果33年间该医院共手术治疗食管癌和贲门癌4418例，平均每年收治133人，各年度收治人数无显著差异（P〈0．05）。33年间收治食管癌2892例，占65％，贲门癌1526例，占35％。食管癌和贲门癌患者中男性（2916）多于女性（1502）（男：女，1．9：1），尤以贲门癌更明显（男：女，3．6：1）（P〈0．05）。食管癌和贲门癌高发年龄段为50-59岁。有血型记录的食管癌1587例，贲门癌868例，食管癌和贲门癌B型血（37％，36％）患者所占比例均高于其它血型（P〈0．05）。而AB血型的人在食管和责门癌中所占的比例都最低（10％，11％）。有家族史的食管癌思者675例，占23％；贲门癌319例，占21％。中段食管癌最常见，占79％，而上段少见，占5％。结论食管癌和贲门癌是磁县地区最常见的恶性肿瘤，男性明显高于女性，贲门癌更为显著；食管和贲门癌患者均以B型血多见，男性多于女性，50-59岁为高峰年龄段。

亚甲蓝染色内镜诊断Barrett食管的研究进展

近年来西方国家食管贲门交界部腺癌的发病率显著升高。研究认为,Barrett食管是食管腺癌最重要的癌前病变。准确的早期诊断和有效随访是提高Barrett食管患者生存率的重要环节。目前对Barrett食管的诊断主要依靠内镜和病理,即内镜下任何长度的食管黏膜出现柱状上皮样改变并经病理确诊为特异性肠化上皮。但由于早期病灶的微小性和局灶性,内镜下准确的识别特异性肠化上皮及不典型增生在临床上仍比较困难。亚甲蓝染色内镜利用亚甲蓝可以被吸收活跃的细胞吸收着色的原理,通过内镜下喷洒对胃肠道黏膜进行染色,提高内镜对胃肠道黏膜结构的观察能力,有助于内镜医师对肠化上皮的鉴别,但是否可以提高Barrett食管的检出率还存在争议。

食管癌高发区人胚胎发育过程中食管上皮组织P16、PCNA蛋白的表达及其与形态学变化关系

目的初步探讨食管癌高发区人胎儿食管上皮组织抑癌基因p16和增殖细胞核抗原(proliferation cell nuclear antigen,PCNA)与人胚胎发育过程中食管上皮细胞增殖特性的关系。方法采用免疫组化ABC法检测3～10月份胎儿食管上皮组织中p16和PCNA的表达状况。结果在26例食管癌高发区人胎儿食管上皮组织中,p16蛋白总阳性率61.5%(16/26),p16蛋白阳性率在低月龄组中明显低于高月龄组(P<0.05),PCNA单位面积平均阳性细胞数为(450±156)/mm2,PCNA单位面积阳性细胞数在低月龄组中明显高于高月龄组(P<0.05)。结论食管癌高发区人胎儿食管上皮组织中p16基因的表达和PCNA单位面积阳性细胞数与胎龄密切相关,可以客观反映食管癌高发区人胎儿食管上皮的组织分化状态。

陕西省扶风县人民医院1995—2004年265例食管癌和贲门癌病例分析

目的动态观察陕西省扶风县人民医院食管癌和贲门癌就诊患者的临床特征，加深对该地区发病情况的了解。方法严格记录扶风县人民医院10年间（1995--2004年）食管癌和贲门癌患者门诊和住院治疗记录，逐年分析就诊患者的人数、性别、年龄、职业、地区分布、治疗情况等。结果10年间该医院共收治各类恶性肿瘤1439例，其中食管癌和贲门癌共265例。占全部恶性肿瘤总数的18％；1995--2004年每年确诊的食管癌和贲门癌患者人数无明显变化。食管癌和贲门癌患者中男性明显多于女性，尤以贲门癌更明显（男：女，6．3：1）；高发年龄段为60～70岁之间；患者以农民居多，占93％，94％；住院例数占全部食管癌和贲门癌例数的16％，手术例数仅占8％。结论扶风县人民医院10年间每年收诊的食管癌和贲门癌患者人数无明显差异，食管癌和贲门癌是扶风地区最常见的恶性肿瘤之一，男性明显高于女性，贲门癌更为显著。

食管癌高发区人胎儿食管上皮的透射电镜观察

目的了解食管癌高发区人胎儿食管上皮的超微结构改变。方法电镜和光镜观察。结果13周胎儿的食管上皮为复层扁平上皮，有3～5层细胞。细胞结构较清晰细胞间连接以中间连接为主，较少缝隙连接。24～28周时上皮增至4～10层，细胞结构清晰，细胞间连接以缝隙连接为主，较少中间连接。结论13～28周胎儿食管上皮中，细胞连接缝隙连接渐占优势，可能为食菅癌高发区胎儿食菅上皮发育超微结构特点之一。

食管贲门双源癌患者癌组织中mdm2与Bcl-2和bax及p53蛋白的表达

目的:探讨同一个体食管贲门双源癌组织mdm2、Bcl-2、bax和p53蛋白变化特征及其意义。方法:采用免疫组化卵白素-生物素-过氧化物酶复合物(ABC)法和组织病理学方法,分析15例双源癌患者(同时发生食管鳞癌和贲门腺癌)mdm2、Bcl-2、bax和p53蛋白的表达状况。结果:15例食管和贲门双源癌患者食管鳞癌和贲门腺癌组织均出现不同程度的mdm2、Bcl-2、bax和p53蛋白的阳性表达,食管癌组织中免疫阳性率分别为67%(10/15)、87%(13/15)、73%(11/15)和73%(11/15);贲门癌组织中分别为67%(10/15)、80%(12/15)、80%(12/15)和67%(10/15),且免疫反应类型主要为弥漫型。mdm2、Bcl-2、bax和p53蛋白在食管和贲门双源癌肿瘤组织中一致性改变率分别为100%(15/15)、80%(12/15)、67%(10/15)和80%(12/15)。结论:食管和贲门双源癌存在较高的mdm2、Bcl-2、bax和p53蛋白表达一致性改变,提示食管贲门双源癌可能具有相似的发病因素和分子机制。

食管贲门双源癌组织中Rb蛋白的表达

目的:探讨食管贲门双源癌组织中Rb蛋白表达的变化特征及其意义。方法:采用免疫组化ABC法和组织病理学方法,分析河南食管癌高发区林州市30例食管贲门双源癌患者Rb蛋白的表达状况。结果:在30例双源癌患者中,食管鳞癌和贲门腺癌组织中Rb阳性率分别为46.7%(14/30)和40%(12/30),差异无统计学意义(χ2=0.272,P>0.05)。食管和贲门癌组织Rb一致阳性率为36.7%(26/30),一致阴性率为50%(15/30),食管鳞癌和贲门腺癌组织中Rb的表达相关(P<0.05)。结论:该地区食管癌和贲门癌存在较高的Rb一致性变化,提示二者可能具有相似的发病因素和分子机制。

食管贲门双源癌患者癌组织中mdm2,CyclinD1和p16蛋白的表达

目的:探讨食管贲门双源癌组织中mdm2、CyclinD1和p16蛋白的表达。方法:采用免疫组化ABC法,对河南食管癌高发区30例双源癌患者食管鳞癌(SCC)和贲门腺癌(GCA)组织中mdm2、CyclinD1和p16蛋白的表达进行检测。结果:30例双源癌患者SCC组织中mdm2、CyclinD1和p16蛋白阳性率分别为57%(17/30)、45%(13/29)和24%(7/29),GCA组织中分别为73%(22/30)、33%(10/30)和17%(5/30),SCC和GCA组织中3种蛋白的阳性率差异均无统计学意义(P均>0.05)。SCC和GCA组织中mdm2、CyclinD1和p16蛋白表达的一致性差异无统计学意义(P均>0.05)。结论:食管和贲门双源癌存在较高的mdm2、CyclinD1和p16蛋白表达一致性改变,提示河南食管癌高发区食管贲门双源癌可能具有相似的发病因素和分子机制。

河南贲门癌高发区贲门癌组织ATP7B的表达

目的:了解贲门癌组织中ATP7B的表达情况。方法:采用免疫组化ABC法检测49例河南贲门癌高发区贲门癌及其相应癌旁正常组织中ATP7B的表达。结果:ATP7B在贲门癌组织中阳性表达率为51%(25/49),高于癌旁正常组织中的29%(14/49),差异有统计学意义(χ2=5.15,P<0.05)。贲门癌组织ATP7B表达与肿瘤体积、淋巴结转移和远处转移无关,而与肿瘤分化程度有关。结论:ATP7B在贲门癌对铂类抗肿瘤药的先天耐药形成过程中发挥了重要作用,ATP7B可作为贲门癌的预后判断指标。