高校医学实验室安全教育培训工作的调查研究

对郑州大学2020级全部医学专业本科新生进行实验室安全准入培训,并以往届本科生作为参照对实验室安全教育及效果进行问卷调查,分析总结问题和反馈,以期为建立规范性、科学化、专业化的高校医学实验室安全准入体系提供大数据支撑。

锰超氧化物歧化酶的催化原理与酶活性调节机制

锰超氧化物歧化酶(MnSOD)催化两分子超氧自由基歧化为分子氧和过氧化氢。超氧自由基被Mn~(3+)SOD氧化成分子氧的反应以扩散的方式进行。超氧自由基被Mn~(2+)SOD还原为过氧化氢的反应以快循环和慢循环两条途径平行进行。在慢循环途径中,Mn~(2+)SOD与超氧自由基形成产物抑制复合物,然后该复合物被质子化而缓慢释放出过氧化氢。在快循环途径中,超氧自由基直接被Mn~(2+)SOD转化为产物过氧化氢,快速循环有利于酶的复活与周转。本文提出温度是调节锰超氧化物歧化酶进入慢速或者快速循环催化途径的关键因素。随着在生理温度范围内的温度升高,慢速循环成为整个催化反应的主流,因而生理范围内的温度升高反而抑制该酶的活性。锰超氧化物歧化酶的双相酶促动力学特性可以用该酶保守活性中心的温度依赖性配位模型进行合理化解释。当温度降低时,1个水分子(或者OH~-)接近Mn、甚至与Mn形成配位键,从而干扰超氧自由基与Mn形成配位键而避免形成产物抑制。因此在低温下该酶促反应主要在快循环通路中进行。最后阐述了几种化学修饰模式对该酶的调节,说明锰超氧化物歧化酶受到多种形式的快速调节(变构调节与化学修饰)。这些快速调节直接改变酶的活化状态,进而调节细胞中超氧自由基和过氧化氢的平衡与流量,为揭示锰超氧化物歧化酶和超氧自由基的生理作用提供新理论。

宫腔镜与腹腔镜联合下输卵管疏通术治疗输卵管性不孕症的临床效果

目的：对宫腔镜与腹腔镜联合下输卵管疏通术治疗输卵管性不孕症的临床效果进行分析和探讨。方法选择2011年3月~2013年3月在本院进行治疗的不孕症患者120例，按照随机数表的方法随机将其分为观察组和对照组两组，每组60例，对照组患者在宫腔镜下行输卵管疏通术，观察组患者在宫腔镜与腹腔镜联合下行输卵管疏通术，对两组患者的临床疗效进行比较和分析。结果观察组患者的再通率为95.0%，对照组患者的再通率为65.0%，两组相比差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论宫腔镜与腹腔镜联合下行输卵管疏通术应用于输卵管性不孕症患者的治疗具有良好的疗效，是一种安全有效的方法。

siRNA阻断NF-κB信号通路联合5-Fu对食管鳞癌细胞周期的影响

目的利用RNAi技术特异性的抑制NF-κB亚单位p65的表达,探讨在食管鳞癌细胞中将NF-κB作为基因治疗靶点的价值。方法将荧光素标记的对照siRNA转染到食管鳞癌细胞中观察转染效率,p65siRNA转染到EC9706和Eca109细胞中,使用Western blot的方法检测p65和Cyclin D1蛋白的表达,使用EMSA法检测转染前后p65与DNA结合活性的变化;流式细胞仪检测p65siRNA与5-Fu(327μg/ml)单独或联合应用,对食管鳞癌细胞周期的影响。结果荧光素标记的siRNA转染食管鳞癌细胞的效率可达90%以上。在转染后的EC9706和Eca109细胞中,p65和Cyclin D1蛋白的表达水平下调;NF-κB与DNA的结合活性明显下降;G0/G1期的细胞开始增加,同时S期的细胞逐渐减少;当转染p65siRNA细胞联合使用5-Fu时,G0/G1期的细胞明显增加,同时S期的细胞明显减少。结论p65siRNA可以特异性的阻断NF-κB信号通路,下调NF-κB下游基因中细胞周期蛋白Cyclin D1的表达,表明活化的NF-κB信号通路可以成为食管鳞癌基因治疗中一个重要的分子靶点。

山萸肉醇提液的致突变性

背景与目的:从遗传学角度评价山茱萸果肉醇提物的潜在危害性,为山茱萸开发为保健功能性食品提供科学依据。材料与方法:采用小鼠睾丸染色体畸变试验,小鼠骨髓微核实验以及小鼠精子畸形实验方法。结果:山萸肉醇提物诱发小鼠睾丸染色体畸变实验,诱发小鼠精子畸形实验以及微核实验结果显示,各剂量组与阴性对照相比较,差异均无显著性。结论:山萸肉醇提液对实验动物均没有染色体与细胞水平上的损伤作用,结合其它毒理学资料可以考虑作为新食品资源利用。

金银花在体内抗氧化作用的实验研究

目的探讨金银花在体内的抗氧化作用。方法将20只Wistar大鼠随机分为两组。其中,实验 1组(大剂量组10只)予金银花水煎液(10g／kg)灌胃;实验2组(小剂量组10只)予金银花水煎液(5g／kg) 灌胃;另设对照组(10只)予蒸馏水灌胃。分别在灌胃前、灌胃后1、2h由眼眶取血,分离血浆,检测不同时间血浆内T-AOC、GSH-Px、GSH、MDA、NOS、NO、SOD的变化。结果实验1组和实验2组与对照组相比,灌胃1、2h后T-AOC、GSH-Px、GSH、SOD都有明显增加,而NOS和NO无明显变化,MDA明显下降; 1h时增加或减少幅度大于2h。结论金银花可提高体内抗氧化作用,且有剂量依赖性。

槲皮素对过氧化氢损伤小鼠成纤维细胞的保护作用

目的 探讨槲皮素对过氧化氢（H2O2）损伤小鼠成纤维细胞（NIH-3T3）的保护作用。方法 体外培养NIH-313细胞，取对数生长期的NIH-3T3细胞分成四个实验组。对照组（C）仅加含有10％胎牛血清的DMEM培养基。实验1（Q1）组先用O．5mmoL／LH2O2作用细胞30min，然后再用含有50μmol／L的槲皮素培养基作用24h。实验2（Q2）组先用含有50μmol／L的槲皮素培养基作用24h，再换含有0．5mmol／LH2O2作用细胞30min。H2O2实验（H2）组先用含有0.5mmol/LH2O2作用细胞30min，再换仅含有10％胎牛血清的DMEM培养基作用24h。取培养细胞提取DNA和制备1×10^7／ml细胞悬液的滴片，应用TUNEL和Ladder电泳检测细胞凋亡率：应用Weaster blod和细胞免疫组化技术检测Bcl-2、Bax、Caspase-3、HSP-70、NF—kB蛋白质的表达。结果 由TUNEL和Ladder实验得出，Q1组的细胞凋亡率明显低于H2组和Q2组。由Weaster blod和细胞免疫组化技术检测分析得出，Q1组与Q2、H2组相比，Bcl-2的表达明显增高，Bax、Caspase-3、NF—kB、HSP-70的表达减低。结论 槲皮素可能主要是通过抑制NF—kB的表达，提高HSP-70的表达，对H2O2诱导的NIH-3T3细胞损伤产生保护作用。

人胸腺和脐血造血干/祖细胞联合移植对裸鼠细胞免疫功能的影响(英文)

背景:T细胞在抗感染、抗肿瘤和免疫调节等中起重要作用,但T细胞分化发育机制尚未完全阐明。目的:观察人胸腺、人脐血联合移植后裸鼠体内T细胞分布及免疫功能的重建。方法:Balb/cnu/nu裸鼠30只,随机分为2组:实验组肾被膜下移植胸腺组织,2周后将新鲜分离的脐血CD34+细胞悬液经小鼠静脉输入,对照组不经胸腺移植直接给予CD34+细胞移植,两组小鼠饲养至60d时检测免疫功能。结果与结论:人胸腺在裸鼠肾被膜下存活并且表达CD3、HLA-DR分子,胸腺与CD34+细胞联合移植组小鼠脾脏可见点块状分布的CD3+细胞。实验组CD3+细胞、CD4+细胞、CD8+细胞及CD4+CD25+细胞比例均显著高于对照组。实验组裸鼠对移植人胃癌BGC823细胞有排斥作用,而对照组没有。结果显示胸腺和CD34+细胞联合移植能使裸鼠获得T细胞介导的细胞免疫功能,具有抗肿瘤能力。