指突状树突细胞肉瘤2例临床病理分析

目的探讨指突状树突细胞肉瘤(interdigitating dentritic cell sarcoma,IDCS)的临床病理特点、免疫表型、诊断及鉴别诊断要点。方法收集2例IDCS的临床资料,对其形态学、免疫表型进行观察分析,并复习相关文献。结果 2例IDCS男、女各1例,年龄分别为63和27岁,发病部位分别为左颈部淋巴结和左眼内侧球结膜。结内病变位于副皮质区,肿瘤细胞呈梭形,不规则片状累及滤泡间或副皮质区;结外肿瘤细胞呈束状或漩涡状排列,胞质丰富弱嗜酸性,界限不清。免疫表型:S-100、Fascin均强阳性,vimentin、CD68部分阳性,CK(AE1/AE3)、EMA、CD45、CD3、CD20、CD79a、CD30、ALK、CD1a、CD21、CD23、CD35、HMB-45和SMA均阴性。结论 IDCS是一类相对较少见的侵袭性肿瘤,临床症状及病理学形态缺乏特异性,需结合相关临床特点、形态学特征、免疫表型特点确诊,并需排除相似疾病进行综合诊断。

病理性瘢痕组织中Survivin、P33ING1、Caspase-3蛋白的表达

目的检测病理性瘢痕组织中Survivin、P33ING1、Caspase-3蛋白的表达情况。方法采用免疫组织化学方法检测30例病理性瘢痕组织、10例非病理性瘢痕和20例正常皮肤组织中Survivin、P33ING1、Caspase-3的表达情况。结果病理性瘢痕、非病理性瘢痕和正常皮肤组织中Survivin、P33ING1和Caspase-3的阳性表达率分别为80.0%、50.0%、35.0%,43.3%、70.0%、85.0%和30.0%、80.0%、90.0%;病理性瘢痕组织与非病理性瘢痕和正常皮肤组织比较,3指标差异均有统计学意义(P<0.05)。病理性瘢痕组织中Caspase-3与Survivin(r=-0.400)和P33ING1(r=0.602)表达均具有相关性(P<0.05)。结论Survivin的高表达与Caspase-3和P33ING1的表达下调在病理性瘢痕的形成中可能起协同作用。

206例甲状腺肿瘤临床病理诊断分析

目的探讨甲状腺疾病病理诊断的价值,以提高甲状腺病变诊断和鉴别诊断水平,减少误诊。方法取术中或术后活检的甲状腺病变206例,石蜡包括切片,其中38例行术中冷冻切片和常规石蜡切片,对两种切片的诊断结果进行对比。结果206例中,男性76例,女性130例,男女之比为1∶1.71。年龄16～72岁,高发年龄28～50岁。良性病变179例,占86.90%,以甲状腺腺瘤和结节性甲状腺肿最多见,甲状腺腺瘤占良性病变的61.17%,囊性变率达54.70%。恶性病变27例(占13.10%),以甲状腺乳头状癌最多见。结论常规石蜡切片结合免疫组化标记在甲状腺疾病分类诊断和鉴别诊断中具有重要价值,冷冻切片结合术中细胞印片可减少误诊。

包涵体性纤维瘤病临床病理分析

目的总结包涵体性纤维瘤病(IBF)的临床病理、特殊染色、免疫表型、诊断与鉴别诊断。方法收集5例IBF的临床资料,观察其组织病理学形态、特殊染色及免疫组织化学特征,并进行随访。结果 5例中男性3例,女性2例,年龄为4~24个月,平均10.6个月。发生于足趾3例,手指2例。1例为复发病例,表现为右无名指及小指部有3个小结节。病变体积小、实性,被覆皮肤。组织学均表现为真皮和皮下纤维母细胞增生,伴多量胶原纤维形成。其最具特征性改变为梭形纤维母细胞胞质内有数量不等的嗜酸性包涵体。Masson三色染色包涵体呈深红色,免疫组化瘤细胞SMA、desmin和calponin均(+)。结论 IBF是一种罕见的良性肌纤维母细胞性肿瘤,其胞质内嗜酸性包涵体具有特征性。其具有局部复发潜能,扩大切除是治疗的最佳手段。

榄香烯对人肺腺癌SPC-A-1细胞VEGF-C及VEGFR-3表达的影响

目的探讨榄香烯对体外培养的人肺腺癌SPC-A-1细胞株血管内皮生长因子(VEGF-C)及其受体VEGFR-3表达水平的影响。方法采用免疫细胞化学方法对药物作用后的SPC-A-1细胞VEGF-C、VEGFR-3的表达水平进行检测。结果榄香烯能明显抑制肺腺癌SPC-A-1细胞的生长并降低VEGF-C、VEGFR-3的表达水平,而且有时间和浓度依赖性。结论榄香烯通过降低肺腺癌细胞VEGF-C、VEGFR-3的表达水平,从而遏制了肿瘤血管、淋巴管转移。

热疗后恶性肿瘤患者血清可溶性白介素-2受体、白介素-8、γ-干扰素的变化

目的 :观察高强度聚焦超声热疗前后恶性肿瘤患者血清可溶性白介素 2受体 (sIL 2R)、白介素 8(IL 8)、γ 干扰素 (γ IFN)的变化及其意义。方法 :采用双抗夹心ELISA法测定 2 7例恶性肿瘤患者热疗前后血清sIL 2R、IL 8、γ IFN水平。结果 :热疗后患者血清sIL 2R水平显著降低 (t=2 .2 5 ,P <0 .0 5 ) ,IL 8水平显著增高 (t=1.83,P <0 .0 5 ) ,γ IFN显著升高 (t=2 .2 3,P <0 .0 5 ) ,并观察到热疗后患者临床症状得到明显改善。结论 :高强度聚焦超声热疗可以降低恶性肿瘤患者血清sIL 2R水平 ,提高IL 8、γ IFN的水平 ,从而有助于解除恶性肿瘤患者的免疫抑制。

Survivin、Bcl-2在食管鳞癌中的表达及其与细胞凋亡关系的研究

目的探讨食管鳞癌中Survivin、Bcl-2蛋白的表达及其与细胞凋亡之间的关系。方法应用免疫组织化学S-P法检测39例食管鳞癌组织、23例不典型增生组织及39例正常食管黏膜组织中Survivin、Bcl-2表达情况,并用TUNEL法原位检测细胞凋亡情况。结果Survivin在癌组织中表达率为59.00%(23/39),癌旁不典型增生组织和正常食管黏膜组织中未见表达。Survivin的表达与肿瘤的淋巴转移关系密切,有淋巴转移组Survivin阳性率明显高于无淋巴转移组(P<0.05)。Bcl-2在癌组织、癌旁不典型增生组织中的表达率为69.20%(27/39)、21.7%(5/23),而正常食管黏膜组织中未见表达。Bcl-2的表达与肿瘤组织的分化程度、淋巴结转移有关,有淋巴转移组Bcl-2表达阳性率明显高于无淋巴转移组(P<0.05)。在食管鳞癌组织中Survivin与Bcl-2的表达显著相关(P<0.01)。凋亡指数(AI)在癌组织、癌旁不典型增生组织和正常食管黏膜组织中分别为(4.48±0.69)、(12.67±2.20)和(30.13±4.21),组间比较差异有显著性(P<0.01)。Survivin阳性表达组及Bcl-2阳性表达组的AI明显低于其阴性表达组AI(P<0.01)。结论Survivin和Bcl-2阳性表达与食管鳞癌的生长及转移有关,两者可能通过共同抑制细胞凋亡,参与食管癌的发生发展。

人食管鳞癌组织中血管内皮生长因子C及其受体3和淋巴管生成检测

目的:探讨人食管鳞癌组织中血管内皮生长因子C(VEGF-C)及其受体3(VEGFR3)的表达及其在淋巴管生成与淋巴结转移中的意义。方法:对59例食管鳞癌标本(Ⅰ级22例、Ⅱ级20例、Ⅲ级17例,47例伴有淋巴结转移),采用免疫组织化学SP法检测VEGF -C及VEGFR3的表达,并应用图像分析方法测定淋巴管密度(LVD)及其积分光密度值(IOD)。结果:VEGF C及VEGFR3表达与肿瘤淋巴结转移相关(P<0.05),而与患者性别和病理学分级无关(P>0.05);人食管鳞癌组织中VEGF- C及VEGFR3的表达有相关关系(P<0.05);癌组织和癌周组织中LVD和IOD与淋巴结转移相关(P<0.01)。结论:食管鳞癌组织中VEGF- C和VEGFR3表达与淋巴结转移、新生淋巴管的形成密切相关,在肿瘤转移方面具有重要作用。

间隙连接蛋白Cx26和Cx43的表达及与食管鳞癌浸润和转移关系

目的探讨间隙连接蛋白Cx26和Cx43的表达在食管鳞状细胞癌发生、发展以及浸润和转移中的作用。方法通过RT-PCR、免疫组织化学技术联合检测Cx26和Cx43在42例食管鳞状细胞癌组织、17例癌旁不典型增生组织以及42例相应正常食管黏膜组织的表达情况。结果在食管鳞癌组织、癌旁不典型增生组织及正常食管黏膜中Cx26、Cx43mRNA相对表达量及蛋白阳性表达率均低于正常食管黏膜和癌旁不典型增生组织。Cx26、Cx43蛋白和mRNA阳性表达率均随癌组织浸润深度的加深而明显降低,在有淋巴结转移的癌组织均明显低于无淋巴结转移组癌组织。Cx26、Cx43在食管鳞癌组织中mRNA相对表达量均随分化程度降低呈下降趋势。Cx26与Cx43mRNA表达和蛋白表达之间均呈正相关关系。结论 Cx26、Cx43基因抑制食管鳞癌发生、发展及浸润、转移,是早期预测食管鳞癌发生和浸润转移的有效指标。

食管癌“环境-遗传-基因互作”组学研究:核黄素、核黄素转运基因2和NOTCH1-P53-Rb互作关系

本研究组利用全基因组关联分析和全基因组外显子测序技术发现核黄素转运基因2（riboflavin transporter gene 2,RFT2;又称C20orf54、SLC52A2、RFVT3）是食管鳞状细胞癌（简称鳞癌）重要易感基因^（[1]）,NOTCH1基因突变是食管癌变的重要分子事件^（[2]）。这些发现引发学者对RFT2和NOTCH1与肿瘤发生和发展的关系进行深入研究。

雷帕霉素及mTOR siRNA对宫颈癌HeLa细胞mTOR和4EBP1表达的影响

目的探讨mTOR蛋白与宫颈癌发生、发展过程的相关性及雷帕霉素和mTOR siRNA对宫颈癌细胞中mTOR、4EBP1表达的影响。方法应用免疫组织化学方法检测正常宫颈鳞状上皮组织、CIN组织和宫颈癌组织中mTOR蛋白的表达情况;应用RNAi技术及雷帕霉素分别处理宫颈癌HeLa细胞,运用原位杂交、免疫细胞化学技术分别检测处理前后HeLa细胞中mTOR、4EBP1 mRNA及蛋白的表达情况。结果 mTOR蛋白在30例正常宫颈上皮组织、20例CIN组织和45例宫颈癌组织中的阳性表达率分别为36.7%(11/30)、55.0%(11/20)和71.1%(32/45),正常宫颈组织、CIN组织与宫颈癌组织中mTOR阳性表达率比较差异有统计学意义(P<0.05);三种不同浓度的雷帕霉素及mTOR siRNA分别处理宫颈癌HeLa细胞24、48和72 h后,各组与相应对照组相比,mTOR、4EBP1 mRNA及蛋白的表达量均有显著下降(P均<0.05)。结论mTOR蛋白在宫颈癌组织中过表达,其过表达可能与宫颈癌的发生、发展过程相关;雷帕霉素和mTOR siRNA可抑制宫颈癌细胞mTOR mRNA及蛋白的表达,同时影响其下游4EBP1分子的表达。

心肌梗死后不同时间移植骨髓间充质干细胞对心脏功能修复的作用

目的:观察心肌梗死后不同时间点移植骨髓间充质干细胞对梗死心肌修复的影响,寻找细胞治疗的有效移植时间窗。方法:实验于2006-04/10在郑州大学基础医学院完成。①实验动物:清洁级6周龄雄性SD大鼠81只,1只用于获取骨髓间充质干细胞,剩余80只随机数字表法分为细胞移植组、培养液对照组,再按心肌梗死后1d及1,2,3周进行移植的时间各分为4个亚组,10只/组。②实验方法:获取、培养大鼠骨髓间充质干细胞,培养至第3代接近70%融合时,加入5-溴脱氧尿嘧啶体外标记,调整细胞密度为4×1010L-1备用。两组大鼠均结扎左冠状动脉前降支建立心肌梗死模型。细胞移植组各亚组按对应时间点在心肌梗死中央及四周移植骨髓间充质干细胞悬液50μL/点(2×106个),培养液对照组各亚组于相同部位移植L-DMEM培养液,50μL/点。③实验评估:移植前和移植3周后检测心功能;苏木精-伊红、免疫组织化学染色观察心肌梗死区组织及细胞变化。结果:共79只大鼠进入结果分析。①骨髓间充质干细胞的生长特点:刚分离的细胞为圆形。5d后有集落形成,细胞呈梭形、纺锤形或多角形,胞核较大。传代后细胞体积较原代细胞增大,生长速度加快。②心肌梗死后不同时间移植骨髓间充质干细胞的心功能比较:与移植前比较,移植3周后细胞移植组各亚组左室射血分数、短轴缩短率均有所改善(P<0.05),以心肌梗死后2周细胞移植组最为明显(P<0.01);培养液对照组各亚组左室射血分数、短轴缩短率均下降(P<0.05)。③梗死心肌组织学观察:细胞移植组心肌梗死区及周边可见核蓝色深染的细胞,排列整齐,梗死区瘢痕化减轻。④骨髓间充质干细胞在心肌组织中的分化:细胞移植组梗死心肌内可见大量BrdU标记阳性的骨髓间充质干细胞,胞核呈棕黄色,对心肌特异性肌钙蛋白T呈阳性表达。结论:心肌梗死后早期移植骨髓间充质干细胞能够改善心功能,以2周内进行细胞移植的效果较佳。

胃癌组织中KISS-1和基质金属蛋白酶-9蛋白的表达

目的:检测胃癌组织中KISS-1和基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白的表达。方法:应用免疫组织化学SP法分别检测45例胃癌组织及配对远离胃癌手术切缘的正常组织中KISS-1和MMP-9蛋白的表达。结果:胃癌组织及配对正常组织中KISS-1蛋白的阳性表达率分别为35.6%(16/45)和88.9%(40/45),2者相比,差异有统计学意义(χ2=16.531,P<0.001);MMP-9蛋白的阳性表达率分别为60.0%(27/45)和8.9%(4/45),2者相比,差异有统计学意义(χ2=17.926,P<0.001)。胃癌组织中KISS-1和MMP-9蛋白的表达均与胃癌浸润深度及有无淋巴结转移有关(χ2分别为9.652、5.670和9.050、5.351,P均<0.05)。胃癌组织中2者的表达有关联(rP=0.469,P<0.001)。结论:KISS-1和MMP-9的表达和胃癌的发生发展及浸润转移有关,联合检测2者有望用于胃癌的早期诊断和预后判断。

非霍奇金淋巴瘤组织中p73基因印迹状态及甲基化

目的:探讨p73基因启动子区甲基化及基因印迹状态与非霍奇金淋巴瘤的关系。方法:取淋巴结活检新鲜标本40例,其中非霍奇金淋巴瘤20例(B细胞淋巴瘤16例,T细胞淋巴瘤4例),淋巴结反应性增生20例。采用逆转录聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(RT-PCR-RFLP)的方法及甲基化特异性聚合酶链反应(MS-PCR)的方法分别检测上述组织中p73基因的印迹状态及启动子区域CpG岛的甲基化状态。结果:20例非霍奇金淋巴瘤p73基因杂合子表型8例,其中p73基因单等位基因表型7例;20例淋巴结反应性增生中p73基因杂合子表型6例,其中p73基因单等位基因表型5例,2组间等位基因表型比较差异无统计学意义(P>0.999)。20例非霍奇金淋巴瘤组织中p73基因启动子区甲基化频率为35.0%,而20例淋巴结反应性增生中均无p73基因启动子区甲基化(P=0.008)。结论:p73基因异常甲基化可能与非霍奇金淋巴瘤的发生有关。

食管鳞癌组织中淋巴管生成2种检测方法比较

目的:探讨人食管鳞癌组织中淋巴管生成灵敏的检测方法。方法:分别采用免疫组化SP法(以血管内皮生长因子受体-3为淋巴管特异性标记物)和酶组织化学法检测49例食管鳞癌组织和癌旁组织中淋巴管密度(分别记为LVDi与LVDe)。结果:癌组织中LVDe的表达和癌旁组织中LVDi、LVDe的表达在有、无淋巴结转移时差异均有统计学意义(P<0.01)。有淋巴结转移癌组织中LVDi与LVDe之间差异有统计学意义(P<0.01)。结论:酶组织化学法可较好地显示食管鳞癌组织中的淋巴管。

乳癌组织中nm23、MMP-2、TIMP-2蛋白的表达

目的:探讨乳癌组织中nm23、MMP-2和TIMP-2蛋白的表达情况。方法:采用免疫组织化学SP法,对20例乳腺纤维腺瘤、24例乳腺导管内原位癌、58例乳腺浸润性导管癌(26例无淋巴结转移,32例有淋巴结转移)组织中上述3个指标进行检测。结果:乳腺浸润癌组织中nm23和TIMP-2蛋白阳性率低于乳腺纤维腺瘤和导管内原位癌组织(P<0.05);乳癌组织中MMP-2蛋白阳性率高于乳腺纤维腺瘤组织(P<0.05)。伴有淋巴结转移的浸润性导管癌组织nm23阳性率低于无淋巴结转移者。结论:联合检测上述3种指标将有助于乳癌的早期诊断和预后判断。

大肠癌组织中Caveolin-1和EGFR蛋白的表达

目的:探讨大肠癌组织中Caveolin-1和EGFR蛋白表达的变化。方法:采用免疫组织化学SP法对外科手术切除的126例大肠癌标本及35例癌旁正常黏膜组织进行Caveolin-1和EGFR蛋白检测。结果:大肠癌组织与癌旁正常黏膜组织中Caveolin-1蛋白阳性表达率分别为30.16%(38/126)和85.71%(30/35),EGFR蛋白阳性表达率分别为61.11%(77/126)和8.57%(3/35),2组间差异均有统计学意义(P<0.01)。大肠癌组织中Caveolin-1和EGFR蛋白的表达均与组织学类型无关(P>0.05),但与分化程度、淋巴结转移以及临床分期有关(P<0.05)。大肠癌组织中Caveolin-1与EGFR蛋白的表达呈负相关(rs=-0.327,P<0.05)。结论:大肠癌的发生发展过程中Caveolin-1和EGFR可能发挥重要作用。

Bcl-XL 反义寡核苷酸对食管癌 EC9706细胞和裸鼠移植瘤组织的诱凋亡作用

目的:探讨Bcl-XL反义寡核苷酸(Bcl-XL ASODN)对食管癌EC9706细胞和人食管癌裸鼠移植瘤组织的诱凋亡作用。方法:将合成的Bcl-XL ASODN通过阳离子脂质体介导转染EC9706细胞后,以吖啶橙荧光染色、流式细胞术和TUNEL技术检测ASODN组、细胞对照组、空白对照组和N-ODN组的凋亡率;用TUNEL技术检测ASODN组、N-ODN组和细胞对照组裸鼠移植瘤组织的细胞凋亡率。结果:吖啶橙荧光染色、流式细胞术和TUNEL检测结果显示,ASODN组、N-ODN组、空白对照组和细胞对照组的凋亡率比较,差异均有统计学意义(F=26.853、38.537、28.541,P均<0.001);且ASODN组的凋亡率均高于细胞对照组、空白对照组和N-ODN组(P均<0.05);TUNEL法检测移植瘤组织的细胞凋亡率结果显示,细胞对照组、N-ODN组及ASODN组的凋亡率比较,差异有统计学意义(F=56.375,P<0.001);且ASODN组高于细胞对照组及N-ODN组(P均<0.05)。结论:Bcl-XL ASODN对食管癌EC9706细胞及食管癌裸鼠移植瘤组织均有诱凋亡作用。

食管鳞癌组织IGF-Ⅰ和IGF-IR的表达及其相关性研究

目的:研究食管鳞癌组织中胰岛素样生长因子-Ⅰ(insulin-like growth factor,IGF-Ⅰ)及其受体(insulin-like growth factor receptor,IGF-IR)的表达及相关关系。方法:应用免疫组化SP法检测49例食管鳞癌组织、19例不典型增生组织及32例正常黏膜上皮组织中IGF-Ⅰ和IGF-IR的蛋白表达。结果:在正常食管黏膜、不典型增生组织和食管鳞癌组织中IGF-Ⅰ和IGF-IR的表达分别为34.4%(11/32)、52.6%(10/19)、69.4%(34/49)和31.3%(10/32)、52.6%(11/19)、71.4%(35/49),正常食管黏膜与食管鳞癌组织比较差异均有统计学意义,P<0.05。IGF-Ⅰ和IGF-IR的蛋白表达与淋巴道转移、浸润深度及分化程度有关。IGF-Ⅰ的表达和IGF-IR的表达之间呈正相关。结论:联合检测IGF-Ⅰ和IGF-IR可作为判断食管鳞癌的浸润、转移能力的有效指标,对食管癌的预后判断有一定的理论意义。

脂质体介导的hTERT PEI/ASODN缩合体对乳癌MCF-7细胞生长及hTERT表达的影响

目的:探讨脂质体介导的人端粒酶逆转录酶(hTERT)聚乙烯亚胺(PEI)/反义寡核苷酸(ASODN)缩合体对乳癌MCF-7细胞生长及hTERT表达的影响。方法:MCF-7细胞分为3组,分别转染ASODN、PEI/ASODN和脂质体PEI/ASODN,采用激光共聚焦扫描观察摄入情况。另取MCF-7细胞分为9组:空白对照组、ASODN组、SODN组、溶媒组、空白脂质体组、PEI/ASODN组、PEI/SODN组、脂质体-PEI/ASODN组和脂质体-PEI/SODN组。转染后不同时间,分别采用MTT法、RT-PCR及免疫细胞化学方法检测MCF-7细胞的生长情况、hTERT蛋白以及 mRNA的表达。结果:脂质体介导的hTERTPEI/ASODN缩合体可以进入细胞内。转染后24、48和72h,9组间光密度值相比,差异均有统计学意义(F=11.187、30.283和33.080,P均<0.001)。与空白对照组相比,PEI/ASODN组、PEI/SODN组及脂质体-PEI/ASODN组光密度值降低(P<0.05)。与空白对照组相比,转染48h后hTERT蛋白和hTERT mRNA表达降低。结论:脂质体介导的hTERTPEI/ASODN缩合体能够有效进入细胞内,抑制MCF-7细胞的生长,其作用可能与抑制细胞中hTERT mRNA及蛋白的表达有关。