在病理生理学教学中培养医学生的创新素质

培养医学生的创新素质,是现代医学教育的重要目标。在病理生理学教学过程中,通过提高教师创新意识、实施以问题为中心的教学法、改革传统实验教学等途径,启发了学生的创新思维,增强了学生的创新素质。

TPX2和Aurora A在食管鳞癌中的蛋白表达及其临床病理意义

目的探讨TPX2在食管鳞癌及其癌前病变中的表达和意义。方法采用SP免疫组织化学方法检测TPX2和Aurora A蛋白在62例食管鳞癌、31例不典型增生组织及62例正常食管黏膜中的表达水平。结果免疫组织化学结果显示,TPX2蛋白在正常黏膜、癌旁不典型增生和癌组织的表达率依次增高,分别为4.8%(3/62),51.6%(16/31)和85.5%(53/62),三组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。TPX2的蛋白表达水平与食管癌的淋巴结转移和浸润深度密切相关,组间比较差异有统计学意义(P<0.01)。Aurora A蛋白在正常黏膜、癌旁不典型增生和癌组织的表达率依次增高,分别为3.2%(3/62),45.2%(14/31)和71.0%(44/62),三组间比较差异有统计学意义(P<0.01),且表达水平与食管癌的组织学分期、浸润和转移相关。结论TPX2、Aurora A基因蛋白的表达可能是食管鳞癌淋巴结转移的危险因素,两者的联合检测可望成为食管鳞癌的早期诊断指标,是判断预后的指标之一。

MIC-1和uPA在食管鳞癌中蛋白表达的相关性及其临床病理意义

目的:探讨MIC-1及uPA蛋白表达与食管癌发生、发展及浸润、转移的关系.方法:应用免疫组织化学SP法检测45例食管鳞癌组织、22例癌旁不典型增生组织及45例正常食管黏膜组织中MIC-1及uPA蛋白的表达.结果:食管鳞癌组织中MIC-1蛋白表达与癌的组织学分级、浸润深度、有无淋巴结转移及TNM分期密切相关(P<0.05);uPA蛋白表达与癌的TNM分期及淋巴结转移密切相关(P<0.05);在食管鳞癌癌变过程中MIC-1蛋白表达在癌组织、癌旁不典型增生组织及正常食管黏膜组织中的表达率依次降低,分别为64.4%(29/45)、40.9%(9/22)、13.3%(6/45),组间比较差异具有统计学意义(χ2=24.673,均P<0.01);uPA蛋白在癌组织、癌旁不典型增生组织及正常食管黏膜组织中的表达率也依次降低,分别为68.9%(31/45)、27.3%(6/22)、24.4%(11/45),组间比较差异具有统计学意义(χ2=20.863,P<0.01);MIC-1与uPA的表达呈正相关关系(γp=0.403,均P<0.01).结论:MIC-1和uPA在食管癌的浸润、转移及黏膜上皮癌变过程中起重要作用,MIC-1及uPA的联合检测可望成为食管鳞癌早期诊断和判断预后的分子指标之一.

病理生理学实验教学与临床结合的探讨

病理生理学实验教学与临床结合有利于培养学生的动手能力和临床思维能力,加深对疾病发生机制的理解。病理生理实验教学通过开展实验设计、巧妙设立问题、典型病例分析与临床结合,激发学生兴趣,为临床教学打下基础。

Tiam1和Rac1在食管鳞癌组织中蛋白表达的相关性及临床病理意义

目的:探讨T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1(Tiam1)及Rac GTP酶激活蛋白1(Rac1)的表达与食管鳞癌发生发展、浸润转移的关系.方法:62例食管癌手术切除标本于2006-02-26/03-16取自食管癌高发区河南省安阳市肿瘤医院.应用免疫组织化学SP法检测62例食管鳞癌组织、20例癌旁不典型增生组织及20例正常食管黏膜组织中Tiam1及Rac1蛋白表达.结果:食管鳞癌组织中Tiam1蛋白表达与癌的组织学分级、浸润深度、淋巴结转移及TNM分期均密切相关(χ2=8.779,7.680,4.502,4.987;均P<0.05);在食管鳞癌癌变过程中Tiam1蛋白表达在正常黏膜组织、癌旁不典型增生组织及癌组织中的表达率依次增高,分别为5.0%(3/20)、55.0%(11/20)、72.6%(45/62),组间比较有明显差异(χ2=20.643,P<0.05);Rac1蛋白表达也与癌的组织学分级、浸润深度、淋巴结转移及TNM分期均密切相关(χ2=8.652,6.884,8.276,6.371;均P<0.05);Rac1蛋白在正常黏膜组织、癌旁不典型增生组织及癌组织中的表达率依次增高,分别为25.0%(5/20)、70.0%(14/20)、70.0%(44/62),组间比较有明显差异(χ2=14.245,P<0.05).Tiam1及Rac1的表达呈正相关关系(γp=0.642,P<0.05).结论:Tiam1及Rac1可作为食管鳞癌早期诊断和判断预后的辅助指标.

TWEAK及其受体Fn14蛋白在食管鳞癌中的表达及临床病理意义

目的:探讨肿瘤坏死因子样凋亡微弱诱导剂(TNF-like weak inducer of apoptosis,TWEAK)及其受体早期反应蛋白14(fibroblast growth factor-inducible 14,Fn14)表达与食管鳞状细胞癌发生、发展及浸润、转移的关系.方法:应用免疫组化法分别检测手术切除的45例食管鳞癌组织、22例癌旁不典型增生组织及22例正常食管黏膜组织中TWEAK及Fn14蛋白表达,并且对二者在食管鳞状细胞癌组织中的表达情况进行相关性分析.结果:食管鳞癌组织中TWEAK蛋白表达与癌的浸润深度、淋巴结转移及TNM分期均密切相关(χ2分别为6.455,11.645及4.185,P均<0.05);在食管鳞癌癌变过程中TWEAK蛋白表达在正常黏膜组织、癌旁不典型增生组织及癌组织中的表达率依次增高,分别为27.3%(6/22)、40.9%(9/22)、64.4%(29/45),组间比较差异具有统计学意义(χ2=9.018,P<0.05);Fn14蛋白表达也与癌的组织学分级、浸润深度、淋巴结转移及TNM分期均密切相关(χ2分别为10.873、12.513、9.244及13.137;均P<0.05);Fn14蛋白在正常黏膜组织、癌旁不典型增生组织及癌组织中的表达率依次增高,分别为22.7%(5/22)、59.1%(13/22)、62.2%(28/45),组间比较差异具有统计学意义(χ2=9.872,P<0.05).TWEAK及Fn14的表达无相关性(γp=0.091,P>0.05).结论:TWEAK及Fn14蛋白在食管鳞癌组织中表达显著升高,并与食管鳞癌生物学特性密切相关,提示TWEAK及Fn14过表达可能参与了食管鳞状细胞癌的发生、发展.

食管鳞癌组织sPLA2-Ⅱa基因的表达及其与临床病理因素的关系

目的:探讨sPLA 2-Ⅱa基因在食管鳞癌中的表达及其与鳞癌的发生、发展、转移之间的关系。方法:采用免疫组化SP法及RT-PCR法检测56例正常食管粘膜组织、20例癌旁不典型增生组织及56例食管鳞癌组织中sPLA 2-Ⅱa蛋白的表达及mRNA的相对含量。结果:在正常食管粘膜组织、癌旁不典型增生组织及食管鳞癌组织中sPLA 2-Ⅱa蛋白的阳性表达率及mRNA相对表达量逐次升高,分别为23.2%、55.0%、85.7%及0.303±0.020、0.534±0.015、0.766±0.045,其差异均具有统计学意义。不同性别的食管鳞癌之间蛋白的表达率及mRNA相对表达量分别为67.6%、86.3%及0.706±0.012、0.773±0.035,其差异均无统计学意义。不同临床分级的食管鳞癌之间蛋白的表达率及mRNA相对表达量分别为83.3%、85.7%、87.5%及0.758±0.043、0.763±0.035、0.774±0.031,差异无统计学意义。有淋巴转移组与无淋巴转移组的食管鳞癌之间蛋白表达率及mRNA相对表达量分别为86.4%,88.2%及0.751±0.025,0.763±0.037,差异无统计学意义。结论:食管鳞癌组织中sPLA 2-Ⅱa表达量升高,其高表达可能与食管鳞癌的发生有关。

七年制医学生肝胆外科临床实习带教探索

通过总结七年制医学生肝胆外科临床实习带教工作经验,包括制定合理、系统的临床实习计划;加强"三基"训练,强化专业知识培训;利用多种教学手段和教学方法,注重示范带教和学生动手能力训练,培养专业操作兴趣;多学科知识的掌握和新技术、新项目的开展;创新能力和科研意识的培训;培养学生良好的职业道德,树立正确的世界观等,以提高七年制医学生肝胆外科实习教学效果。

血管内皮细胞生长因子与基质金属蛋白酶-9在胃癌中的表达及临床病理学意义

目的 检测血管内皮细胞生长因子（VEGF）和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）在胃癌中的表达，探讨其临床病理学意义。方法 应用免疫组化法检测87例胃癌组织和15例正常胃黏膜组织中VEGF和MMP-9的表达，分析其与胃癌的分化、浆膜浸润、淋巴结转移的关系及两者的相关性。结果VEGF和MMP-9在胃癌组织中的表达明显高于正常胃黏膜（P〈0．05），在浸及浆膜组中的表达明显高于未浸及浆膜组（P〈0．05），在有淋巴结转移组中的表达明显高于无淋巴结转移组（P〈0、05），在高分化组和低分化组的表达差异无统计学意义（P〉0．05）；两者的表达呈正相关关系。结论 VEGF和MMP-9在胃癌组织中的表达和浸润深度、淋巴结转移有关，和分化无关，两者的表达具有相关性。

肺癌的分子病理学评估进展

肺癌的分子病理学评估是指采用免疫组化、原位杂交和基因测序等多种手段,以明确肺癌分类,确定肿瘤侵袭范围和外科手术切缘的受累程度(如阳性或阴性切缘),区分原发肺癌及转移性肿瘤,还可用于分子诊断性研究,确定是否存在特定基因表达异常或突变,对肺癌预后及疗效进行预测,并据此进行个体化治疗。本文就这方面的进展作一综述。

开封地区68例慢性乙肝病毒携带者肝活检病理分析

目的:分析慢性乙肝病毒携带者肝组织病理特征,以指导诊断与治疗。方法:对开封地区68例慢性乙肝病毒携带者进行肝穿刺活检,同时使用全自动生化分析仪检测血清TBil、ALT、AST。结果:68例慢性乙肝病毒携带者中G0-136例(52.9%);G228例(41.2%);G3-44例(5.9%);G0S0、GO-1S0-1、G2-4S2-4分别为2例、16例、和50例,分别占2.94%、23.52%、58.82%;未发现有肝硬化改变者。HBV-DNA不同滴度组其肝炎活动度和纤维化程度差异均无统计学意义(P>0.05).不同年龄组炎症活动度无统计学意义,>40岁年龄组与其他组比较其纤维化程度较重,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:绝大部分慢性乙肝病毒携带者存在不同程度的肝脏炎症和纤维化,约>50%的患者炎症和纤维化程度明显而需要治疗,炎症活动度及纤维化程度与血清病毒水平无显著相关性。

乳腺分叶状肿瘤45例临床病理观察

目的探讨乳腺分叶状肿瘤的临床病理特征、分级诊断标准及鉴别诊断。方法回顾性分析45例乳腺分叶状肿瘤患者的临床病理资料,进行病理指标分析,包括大体检查、镜下观察和免疫组化标记,并复习相关文献。结果乳腺叶状肿瘤大体呈膨胀性或结节状生长;良性、交界性、恶性叶状肿瘤分别为28例(62. 2%)、12例(26. 7%)、5例(11. 1%)。免疫组化示Ki-67、CD117在良性、交界和恶性叶状肿瘤有增高趋势,CD34反之。结论乳腺叶状肿瘤组织学分级指标是病理诊断的主要依据,但需综合考虑,免疫组化可辅助参考。

RNAi干扰食管癌EC9706细胞MTA1基因表达对侵袭和迁移的影响

目的采用RNAi抑制食管癌EC9706细胞株MTA1基因的表达,观察对食管癌细胞侵袭和迁移的影响。方法用脂质体包裹转染沉默MTA1表达的siRNA表达载体入食管癌细胞EC9706。定量RT-PCR和免疫印迹分别检测MTA1 mRNA和蛋白表达情况;划痕损伤实验和细胞体外侵袭实验分别测定迁移和侵袭的影响。结果定量RT-PCR检测显示,MTA1基因的表达水平明显降低;转染沉默MTA1的siRNA表达载体组的食管癌细胞划痕未愈合,穿透Matrigel的细胞数量明显减少,与未转染组、转染空载体组和转染无关序列siRNA载体组比较差异有显著性(P<0·05)。结论RNA干扰介导的MTA1基因表达沉寂可有效降低食管癌细胞侵袭和迁移;MTA1基因可能成为肿瘤治疗上有前途的分子靶点。

细胞色素C和Survivin在结肠腺癌中的表达及临床意义

目的:研究细胞色素C(Cyt-C)和Survivin在结肠腺癌中的表达及其与临床病理特征的关系,并探讨Cyt-C和Survivin在结肠腺癌中的表达的相关性。方法:采用手工组织芯片技术及免疫组织化学技术(S-P法)检测59例结肠腺癌和10例正常结肠组织中Cyt-C和Survivin的表达水平。结果:Survivin和Cyt-C在正常结肠中的表达率分别为20.0%和30.0%,在结肠腺癌中的表达率分别为69.5%和78.0%,Survivin蛋白和Cyt-C在结肠腺癌中的表达增加(P<0.05);Cyt-C在结肠癌中的表达和肿瘤细胞的分化程度成正相关(P<0.05);Survivin蛋白在结肠癌中的表达和肿瘤细胞的分化程度成负相关(P<0.05);两者与浸润深度,肿瘤的大小,患者的年龄,淋巴结有无转移均无相关性(P>0.05)。结论:Survivin和Cyt-C在结肠癌中表达增加提示Survivin和Cyt-C对结肠癌的发生发展起着重要作用。

阿魏酸钠对SNP诱导的凋亡海马神经元bcl-2、bax基因表达的影响

目的:探讨阿魏酸钠(SF)对一氧化氮(NO)供体硝普钠(SNP)引起的大鼠海马神经元凋亡及bcl-2、bax基因表达的影响。方法:采用SD大鼠海马神经元原代培养,经终浓度分别为10、20、40、80、120、160μmol/LSF预处理后,用50μmol/L SNP处理24h,采用MTT法检测细胞存活率,Hoechst33258荧光染色及DNA琼脂糖凝胶电泳分析等方法检测凋亡,Western blotting及RT-PCR检测bcl-2、bax基因表达。结果:不同剂量SF(10-160μmol/L)预处理6h可显著提高神经元的存活率,减少SNP引起的核固缩、凝聚和碎裂现象;DNA凝胶电泳图谱未见典型的"梯状"改变;增加bcl-2mRNA及蛋白的表达,降低baxmRNA及蛋白的表达。结论:SF抑制NO供体SNP诱导的海马神经元凋亡,其机制可能与其增加Bcl-2蛋白表达,降低Bax蛋白表达,增高Bcl-2/Bax的比值有关。

乳腺浸润性导管癌中COX-2、VEGF-C和VEGFR-3的表达及其意义

目的本研究通过检测乳腺癌组织中COX-2、VEGF-C和VEGFR-3的表达及其意义,探讨其在乳腺癌淋巴管转移中的发生发展机制。方法采用免疫组化SP法检测60例乳腺癌组织标本(有腋窝淋巴结转移组27例,无腋窝淋巴结转移组33例)中COX-2、VEGF-C和VEGFR-3的表达。结果乳腺癌组织中COX-2、VEGF-C和VEGFR-3的阳性表达明显高于正常乳腺组织,差异有统计学意义(P<0.01)。淋巴结转移组COX-2和VEGF-C阳性表达明显高于无淋巴结转移组,差异有统计学意义(P<0.01、P<0.05)。淋巴结转移组VEGFR-3阳性脉管数明显高于无淋巴结转移组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论乳腺癌组织中COX-2、VEGF-C和VEGFR-3的阳性表达明显高于正常乳腺组织;COX-2、VEGF-C和VEGFR-3的阳性表达与乳腺癌淋巴道转移密切相关。

人B7-2瘤苗与DC瘤苗体外联合诱导抗食管癌的作用

目的:研究人B7-2瘤苗和负载了肿瘤细胞冻融抗原的DC瘤苗体外联合诱导抗食管癌的免疫作用.方法:应用脂质体转染技术,将融合基因表达载体pEGFP-N3-B7—2转染人食管癌细胞株EC9706.采用密度梯度离心法从脐血中分离单个核细胞(MNC)后,获得单核细胞(Mo).在细胞因子作用下诱导分化,第3d加入EC9706的冻融抗原,共培养4d后获得负载肿瘤抗原的成熟树突状细胞(MDC).将致敏DC与从脐血中分离的T淋巴细胞共培养3d,获得细胞毒T淋巴细胞(CTL);四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测CTL对转染和未转染的EC9706的细胞毒作用.结果:融合基因在食管癌细胞株EC9706的胞膜上定位表达.脐血来源的DC可负载并递呈肿瘤抗原,激活自体T淋巴细胞,诱导肿瘤特异性CTL产生,对转染pEGFP—N3-B7—2的EC9706细胞有显著杀伤作用(F=21.672,P=0.000).结论:人B7—2瘤苗和DC瘤苗体外联合应用,诱导出明显的杀伤食管癌细胞的免疫效应.

K562细胞外泌体诱导特异性CTL生成的研究

为了研究人白血病细胞株K562细胞分泌的外泌体(exosomes)及K562细胞总RNA刺激人树突状细胞(DC)分泌的外泌体能否诱导出K562细胞特异性CTL,采用四步离心法提取K562细胞及K562细胞总RNA刺激人树突状细胞的培养上清液中的外泌体,并诱导CTL生成,以四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测CTL对K562细胞的杀伤作用。结果显示K562细胞外泌体和K562细胞RNA刺激的DC和外泌体均能明显促进对K562细胞的杀伤活性,与未经外泌体作用的对照组相比有显著性差异(P<0.05)。外泌体作用后对K562细胞的杀伤作用明显比对HL-60细胞的杀伤作用强,其差异有显著性(P<0.05)。结论K562细胞外泌体能够诱导出特异性抗白血病细胞的免疫反应。

曲古菌素A对食管癌EC1细胞增殖和细胞周期的影响及其分子机制

目的:探讨不同浓度曲古菌素A对食管癌细胞系EC1细胞增殖、细胞周期的影响及其对细胞周期调控基因p21WAF1/CIP1表达的影响.方法:用0.3,0.5,1.0μmol/L的TSA处理EC1细胞,MTT检测TSA作用24、48h对EC1细胞的抑制作用,流式细胞仪检测0.3,0.5,1.0μmol/L的TSA作用24h后EC1细胞周期的改变,Western blot法检测p21WAF1/CIP1变化.结果:TSA在0.5μmol/L以上时对EC1细胞有抑制作用;0.3μmol/LTSA处理细胞后细胞周期与对照组相比,无明显变化;0.5μmol/LTSA处理EC1细胞后,G0/G1期细胞较对照组明显增加,S期细胞较对照组明显减少(74.56%±1.34%vs62.12%±0.52%;14.52%±1.81%vs27.50%±0.66%,均P<0.05);0.5,1.0μmol/LTSA处理细胞后p21WAF1/CIP1表达明显增加(均P<0.05).结论:一定浓度的TSA对人食管癌细胞EC具有的增殖抑制作用,引起EC1细胞发生G0/G1期阻滞,其部分机制与p21WAF1/CIP1上调有关.