食管癌细胞系对光敏剂photofrin-Ⅱ的吸收和排出研究

背景与目的:肿瘤高选择性摄入光敏剂的原因,即靶向原理至今仍不清楚。本研究探讨肿瘤细胞对光敏剂的亲和力。方法:应用紫外分光光度仪测定各种细胞培养液的吸收光谱;应用荧光分光光度仪对光敏剂photofrin-Ⅱ进行荧光光谱分析,同时测定人永生化食管上皮细胞系SHEE及其癌变细胞系SHEEC在相同浓度和时间点对photofrin-Ⅱ的吸收和排泄。结果:photofrin-Ⅱ的最大荧光激发波长为(395.0±0.5)nm,最大荧光发射波长为(634.1±0.5)nm;光敏剂photofrin-Ⅱ所需要的630nm激发波长的光,可完全通过各种细胞培养液。相同浓度和时间下,SHEE细胞和SHEEC细胞对photofrin-Ⅱ的吸收和排泄差异无统计学意义(P>0.05);SHEE细胞和SHEEC细胞对光敏剂photofrin-Ⅱ的吸收量均随其浓度的增加而增加,30μg/mL后进入平台期;SHEE细胞和SHEEC细胞对光敏剂photofrin-Ⅱ的吸收量随着孵育时间的延长而增高,150min后进入平台期;photofrin-Ⅱ在SHEE细胞和SHEEC细胞内可保持较高水平15～30min,然后迅速排出。结论:光敏剂在肿瘤组织中浓集现象可能与肿瘤细胞亲和力无关系。

Photofrin-Diomed 630-PDT对人永生化食管上皮细胞系SHEE及其癌变细胞系SHEEC的抑制研究

目的探讨肿瘤细胞对光动力的敏感度,同时为体外细胞培养的光动力实验研究选择最佳光剂量和最佳光密度提供实验依据。方法将人永生化食管上皮细胞系SHEE及其癌变细胞系SHEEC分别随机分成21组,接种24h贴壁后,在30μg/ml的光敏剂photofrin-Ⅱ溶液中孵育150min后,在15min内应用Diomed-630型激光仪给予25mW/cm2、50mW/cm2、100mW/cm23个功率密度分别照射10,20,30,50,100,150,200s,然后继续培养24h,应用缩胆囊胆素八肽(CCK-8)法检测两个细胞系的存活率。结果在photofrin-Ⅱ30μg/ml浓度条件下,相同功率密度的光动力疗法(PDT)对细胞系SHEE和SHEEC的抑制率无显著性差异;在photofrin-Ⅱ30μg/ml浓度条件下,随着光剂量的增加PDT对细胞系SHEE和SHEEC的抑制率呈增加趋势,达到2.5～3.0J/cm2后进入平台期。结论人永生化食管上皮细胞系SHEE及其癌变细胞系SHEEC对光动力的敏感度无显著性差异,提示肿瘤光动力治疗的靶向作用可能与肿瘤细胞对激光的敏感性无关。

人永生化食管上皮细胞系SHEE及其癌变细胞系SHEEC的Photofrin-Diomed630-PDT损伤机制

目的探讨单态氧与氧化物在Photofrin-Diomed 630-PDT中的细胞毒作用机制。方法将人永生化食管上皮细胞系SHEE及其癌变细胞系SHEEC分别随机分成20组,接种24 h贴壁后,更换M199完全培养液为不含血清的30μg/mL的Photofrin-Ⅱ溶液100μL,孵育150 min后,即时干预组迅速更换不同浓度叠氮化钠(NaN3)和超氧化物歧化酶(SOD)的M199液,在15 min内进行光照处理,光照处理后更换M199完全培养液,继续培养24 h;持续干预组光照处理后不再更换M199完全培养液,直至24 h检测,然后应用CCK-8法检测两个细胞系各组的存活率。结果 NaN3对细胞系SHEE和SHEEC的Photofrin-Diomed 630-PDT即时干预随NaN3浓度的增加其拮抗作用也增强;NaN3对细胞系SHEE和SHEEC的Photofrin-Diomed 630-PDT持续干预表现为细胞毒副作用;SOD对细胞系SHEE和SHEEC的Photofrin-Diomed 630-PDT干预无拮抗作用,仅表现细胞毒作用。结论 NaN3对人永生化食管上皮细胞系SHEE和SHEEC的Photofrin-Diomed 630-PDT的即时干预,提示肿瘤PDT细胞损伤的机制可能主要为单态氧的瞬间杀伤作用,而与其他氧化剂关系不明显。

林州市贲门癌P53和PCNA与癌旁肠上皮化生的关系

目的:探讨贲门腺癌(gastric cardia adeno- carcinoma,GCA)的P53和PCNA分子学特征与癌旁肠上皮化生(intestinal metaplasia,IM)的关系.方法:采用ABC免疫组织化学分析(immuno- histochemistry,IHC)法研究了70例癌旁含IM和不含IM的贲门癌P53和PCNA蛋白表达变化的特征.结果:癌旁含IM的GCA中P53蛋白阳性高表达率明显高于癌旁不含IM的GCA(33.33% vs 4.65%,P<0.01),而PCNA蛋白在两组中的阳性高表达率(74.07%和79.07%)比较无显著性差异(P>0.05).结论:癌旁含IM和不含IM的GCA形态相似,但可能具有不同的分子基础.