微课在药理学教学中的应用探讨

教学改革是顺应多元化社会发展的需要,也是大势所趋,在科学技术迅猛发展的今天,网络资源日渐成为人们生活、学习的主流。在此前提下,微课应运而生。文章介绍了微课的基本涵义、意义及实施条件、方法等,阐述了微课的应用对提高学生学习自由化、个性化,提升学生对知识整合、探索能力及增强教师教学目的性等方面的重要作用。

药理学教学方式在本科教与学中的转变

计算机、网络和多媒体技术的开发与应用,促使药理学的理论教学、实验课教学以及科研教学等多方面发生了改变,教师授课和学生听课模式也发生了转变,笔者结合自身在多年药理学教学中的切身体会,浅谈本科药理学在教学中教与学的几点感受。

多媒体在生理学教学中的应用

新世纪教育教学改革的一个重要特点是多媒体教学的产生和应用。生理学理论内容复杂,概念抽象难懂。传统的教学方式很难把这些抽象的内容清晰地表述出来,多媒体教学在有限的课堂时间给学生更多的信息量,使抽象的生理学教学内容具体化、直观化、清晰化,极大地提高了教学质量,受到了学生的普遍欢迎。但是在生理学教学过程中,如果多媒体技术使用不合理则造成很多问题,

郑州市B19病毒分离株全基因的克隆及序列测定

目的:克隆和测定在郑州市得到的B19病毒分离株全基因序列。方法:采用聚合酶链反应(PCR)技术从1例B19阳性的流产患者血清中分段扩增B19病毒全基因,获得7个互相重叠的片段,分别长814bp(1～814),849bp(753～1601),663bp(1523～2185),738bp(2124～2861),1011bp(2790～3800),1014bp(3747～4760),914bp(4681～5594)。将其分别克隆入T载体,进行测序分析。结果:郑州市B19病毒分离株全基因长5594个核苷酸,有3个开放读码框架(ORF)。第1个ORF位于615～2630位核苷酸,编码672个氨基酸,第2个ORF位于2623～4968位核苷酸,编码782个氨基酸,第3个ORF位于3304～4968位核苷酸,编码555个氨基酸。在该基因中4种碱基在基因组中所占比例为:A,29.58%(1655/5594),T,26.52%(1484/5594),G,22.88%(1280/5594),C,21.02%(1175/5594)。郑州B19病毒分离株基因序列与GenBank中NC_000883高度同源;存在10个碱基改变,只有1个引起氨基酸改变(3752位C→G导致Ser→Cys)。结论:郑州B19病毒分离株和NC_000883属同一基因型。

丹参素异丙酯对离体大鼠缺血/再灌注损伤心肌的影响

目的观察丹参素异丙酯(IDHP)对离体大鼠模拟缺血/再灌注损伤心肌能量代谢及超微结构的影响。方法 Wistar大鼠80只,随机均分为8组:空白对照组、模型组、复方丹参滴丸(CDDP)50.00mg·L-1前保护及后保护组、IDHP4.00mg·L-1和0.04mg·L-1两个剂量的前保护及后保护组。利用Langendorff灌流技术,制备心肌缺血/再灌注损伤(MIRI)模型,各用药组分别在预灌及复灌时,给予相应浓度的药物。各组灌流结束后,7只心脏采用高效液相色谱仪测定其高能磷酸化合物(HEP)含量;其余3只心脏利用电镜观察心肌细胞超微结构。结果各用药组ADP、AMP及腺嘌呤核苷酸总量(TAN)升高(P<0.01,P<0.05);CDDP50.00mg·L-1前保护和后保护组、IDHP4.00mg·L-1前保护和后保护组的ATP含量升高(P<0.05)。电镜显示:IDHP4.00mg·L-1前保护、后保护组及CDDP50.00mg·L-1前保护、后保护组超微结构与空白对照组相似,损伤较轻;IDHP0.04mg·L-1前保护、后保护组心肌细胞超微结构的损伤有所改善,但损伤仍较严重。结论 IDHP无论前保护还是后保护均能改善缺血/再灌注损伤心肌能量代谢,减轻心肌细胞线粒体结构损伤。

巴戟天醇提取物促大鼠缺血心肌治疗性血管生成的实验研究

目的探讨巴戟天糖链(MOO)对急性心肌梗死(AMI)大鼠缺血心肌治疗性血管生成的影响及其机制。方法♂Wistar大鼠,结扎冠状动脉左前降支,成功制成AMI模型40只,随机分为MOO小、中、大剂量组、麝香保心丸组及模型组,每组8只。另取10只建立假手术组。药物治疗组分别灌胃给予巴戟天醇提物水溶性部分(0.7、1.4、2.8mg.kg-1.d-1)及麝香保心丸悬浊液(30mg.kg-1.d-1),其余两组灌胃给予等量蒸馏水。连续灌胃6wk后处死大鼠,心肌取材,应用免疫组织化学法检测大鼠缺血心肌Ⅷ因子及血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growthfactor,bFGF)蛋白表达情况;计算微血管密度(microvessecdensity,MVD),用图像分析软件测定VEGF及bFGF表达灰度值,并进行半定量分析。结果与模型组相比,MOO中、大剂量组能增加缺血心肌MVD及VEGF、bFGF灰度值(P<0.05),但作用弱于麝香保心丸组(P<0.05);MOO3个剂量组之间MVD差异均有显著性(P<0.05);MOO3个剂量组之间VEGF灰度值差异均有显著性(P<0.05);MOO中、大剂量组bFGF灰度值与小剂量组相比差异有显著性(P<0.05)。结论MOO可促进AMI后大鼠缺血心肌的血管生成,其机制可能与上调缺血心肌VEGF、bFGF蛋白的表达有关。

儿茶素对大鼠脑缺血/再灌注损伤的保护作用及机制

目的探讨儿茶素对大鼠脑缺血/再灌注损伤的保护作用及机制。方法40只大鼠随机分成5组,假手术组、模型组和儿茶素低、中、高剂量(50,100,200mg·kg-1)组。采用改良的线栓法制备大鼠局灶性脑缺血(2h)/再灌注(24h)损伤模型,儿茶素各组于缺血前30min和缺血后2h腹腔注射儿茶素溶液,假手术组和模型组给与等体积的NS。再灌注24h,用改良的Bederson评分法对大鼠进行神经功能缺损评分后,进行海马组织形态学观察及MPO和NOS活性测定。结果儿茶素可降低大鼠脑缺血/再灌注损伤的神经功能缺损评分,能不同程度地改善脑组织学损伤,并且降低脑组织中MPO和NOS的活性。结论儿茶素对大鼠脑缺血/再灌注损伤有保护作用,作用机制之一可能与抗炎、抗氧化有关。

影响他汀类药物降脂治疗的相关基因的多态性及其与高脂血症的关系

目的观察他汀类药物降脂治疗相关的基因多态性位点CYP3A4*1G、CYP3A 5*3、MDRl C3435T、SLC21A6 A388G、SLC21A6 T521C、CYP7Al A-204C及ABCG8 T400K在河南地区的分布及其与高脂血症的关系。方法采用聚合酶链反应-限制性片断长度多态性(PCR-RFLP)和等位基因特异性-聚合酶链式反应(AS-PCR)技术对400名高脂血症病人和320名正常对照者进行基因分型。结果等位基因SLC21A6 A388G、SLC21A6 T521C、CYP3A4*1G、CYP3A5*3、MDR1 C3435T、CYP7A1 A-204C及ABCG8 400K的分布频率在高脂血症病人中分别为72.1%、16.2%、27.9%、73.7%、39.9%、34.7%和12.8%,在正常对照组中分别为71.5%、16.1%、27.4%、74.5%、39.4%、33.3%和7.4%;ABCG8 400K等位基因携带者患高脂血症的风险显著增加(OR=1.870,CI:1.259-2.777,P=0.002)。结论CYP3A5*3、MDR1 C3435T、SLC21A6 A388G、SLC21A6 T521C和ABCG8 T400K基因多态性分布可能存在地区或种族差异,ABCG8 400K等位基因是高脂血症的高风险因素。

巴戟天醇提物对血淤大鼠血流动力学及血小板聚集的影响

目的:观察巴戟天醇提物对血淤大鼠血流动力学及血小板聚集率的影响。方法:60只Wistar大鼠随机等分为正常对照组、模型组、复方丹参滴丸(0.1g/(kg.d))阳性药对照组及巴戟天醇提物12g/kg、6g/kg、3g/kg剂量组6组。正常对照组和模型组给予等体积的5g/L羧甲基纤维素钠溶液,其他各组每d1次灌胃给药,连续5d。采用2次皮下注射肾上腺素1mg/kg之间将大鼠置于冰水中5mim的方法建立大鼠急性"血淤"模型,观察药物对血淤模型大鼠高、中、低切变率下全血黏度、全血卡森黏度、血浆黏度、红细胞压积、全血还原黏度、红细胞电泳时间及二磷酸腺苷、胶原、凝血酶诱导血小板最大聚集率的影响。结果:巴戟天醇提物3个剂量组均能降低血淤大鼠的高、中、低切变率下全血黏度、全血卡森黏度,缩短红细胞电泳时间,抑制血小板最大聚集率(P均<0.01);其高、中剂量组尚能降低全血还原黏度(P<0.01或0.05)。结论:巴戟天醇提物可改善血淤时的血流动力学,抑制血小板聚集。

巴戟天糖链对缺氧复氧损伤内皮细胞的血管形成作用研究

目的探讨巴戟天糖链(MOO)对缺氧复氧损伤内皮细胞的促血管形成作用。方法建立人脐静脉内皮细胞(HUVEC)缺氧复氧损伤(H/R)模型,实验分为6组:正常细胞组、H/R模型组、H/R+阳性对照组、H/R+MOO大、中、小剂量组。用倒置显微镜观察细胞形态;流式细胞仪测量在H/R条件下的细胞周期;采用transwell小室迁移实验和小管形成实验检测MOO对体外内皮细胞血管形成的作用。结果①与正常组相比,H/R模型组增加了G2+S期的细胞(P<0.05),与模型组相比,MOO大、中剂量减弱了这种趋势(P<0.05),使细胞状态更接近于正常细胞;②MOO各剂量组细胞迁移数量高于模型对照组(P<0.05);③MOO各剂量组小管形成的面积较模型对照组亦增多(P<0.05)。结论 MOO可以减轻H/R对血管内皮细胞的损伤,抑制细胞凋亡,有效促进H/R损伤的内皮细胞迁移和形成血管。

阿米替林对脑缺血再灌注大鼠大脑皮质中氨基酸类神经递质的影响

目的通过观察阿米替林对大鼠局灶性脑缺血再灌注大脑皮质氨基酸类神经递质的影响,探讨其对大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤的保护作用。方法SD大鼠随机分为假手术组,缺血再灌注模型组,阿米替林高、中、低剂量组及尼莫地平阳性对照组。术前采用腹腔注射给药,假手术组及缺血再灌注模型组给予等量的生理盐水。采用线栓法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,用Longa法进行神经功能缺损评分;高效液相色谱法测定大鼠大脑皮质中谷氨酸(Glu)、天门冬氨酸(Asp)、甘氨酸(Gly)、γ-氨基丁酸(GABA)、牛磺酸(Tau)的含量,并计算兴奋毒性指数(EI)的变化。结果缺血1 h再灌注2 h后,与假手术组相比,缺血再灌注模型组大鼠神经功能缺损评分分值明显升高(P<0.01),大鼠大脑皮质中Glu、Asp、GABA、Gly、Tau的含量及EI值均显著增加(P<0.01或P<0.05);与缺血再灌注模型组相比,阿米替林组及尼莫地平组大鼠神经功能缺损评分分值显著降低(P<0.01),大鼠大脑皮质中Glu、Asp、Gly含量均明显降低,GABA、Tau有所增加,EI值明显降低(P<0.01或P<0.05)。结论阿米替林对局灶性脑缺血再灌注引起损伤的神经具有保护作用。其机制可能与其抑制兴奋性氨基酸的堆积,稳定兴奋性氨基酸/抑制性氨基酸递质的平衡有关。

巴戟天寡糖对心肌缺血再灌注损伤大鼠心功能的影响

目的:探讨巴戟天寡糖(MOO)对大鼠心肌缺血再灌注损伤(IRI)心功能的影响。方法:将48只Wistar大鼠随机分为假结扎组、IRI模型组、阳性对照组和MOO高、中、低剂量组,每组8只。阳性对照组给予地奥心血康0.7g/kg,MOO3个剂量组分别给予2.8、1.4及0.7g/kg的MOO灌胃,假手术组和模型组按10mL/kg给予蒸馏水灌胃,均1次/d,共7d。末次给药1h后,除假结扎组不结扎外,其他各组均结扎左冠状动脉前降支30min,再灌注90min。观察心功能、心肌Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶、Mg2+-ATP酶及肌酸激酶(CK)等的变化。结果:6组大鼠左室收缩压、左室舒张期末压、左室内压最大变化速率及心肌酶谱比较差异均有统计学意义(P均<0.001)。与模型组相比,MOO各剂量组心功能均明显改善,心肌组织中Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶、Mg2+-ATP酶活性升高,而CK含量则降低(P<0.001)。结论:MOO有预防心肌IRI作用,其机制主要与防止钙超载有关。

前列腺素E_1预处理对缺血/再灌注心肌PKC及HSP70表达的影响

目的探讨前列腺素E1(PGE1)预处理对大鼠缺血/再灌组心肌PKC及HSP70表达的影响。方法 40只大鼠随机分成5组:正常对照组(C组)、缺血/再灌注组(I/R组)和PGE1 14,42,126μg.L-1预处理组。应用Langendorff装置制备大鼠心肌缺血/再灌注损伤(myocardial ischemia reperfusion injury,MIRI)模型,以HE染色制备病理切片观察心肌纤维病理形态学变化,Western blot技术检测心肌细胞内PKC的表达,免疫组织化学法测定HSP70的表达。结果 PKC和HSP70在PGE1预处理组的表达量较I/R组明显增加(P<0.05),且各预处理组间比较差异有统计学意义(P<0.05);各PGE1预处理组大鼠缺血/再灌注损伤心肌纤维形态学变化得到不同程度的改善。结论 PGE1预处理可以改善大鼠缺血/再灌注损伤心肌纤维形态学变化,促进PKC及HSP70的表达,有效减轻离体大鼠心肌缺血/再灌注损伤。

巴戟天寡糖对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响

目的:观察巴戟天寡糖对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响。方法:将96只Wistar大鼠随机均分为假手术组、缺血再灌注模型组、阳性药物地奥心血康对照组和巴戟天寡糖0.7、1.4及2.8g/(kg.d)给药组,每日给予相应剂量的巴戟天寡糖及地奥心血康药液灌胃,假手术组、缺血再灌注模型组给予相应体积的蒸馏水灌胃,共7d。末次给药1h后,各组动物均接受开胸,除假手术组不结扎外,其他各组均结扎左冠状动脉前降支30min,再灌注90min。观察6组大鼠的心律失常评分、心肌损伤及梗死面积、心肌组织中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和丙二醛(MDA)等的变化。结果:6组大鼠缺血期和再灌注期心律失常评分、心肌损伤面积和梗死面积及心肌组织中SOD、CAT、GSH-Px和MDA的含量差异有统计学意义(F=265.017、284.667、2589.641、1885.223、64.061、403.713、36.586和45.934,P均<0.001);与模型组相比,阳性药物对照组、巴戟天寡糖1.4、2.8g/(kg.d)给药组心律失常评分降低,心肌损伤及梗死面积缩小,心肌组织中SOD、CAT和GSH-Px酶活性升高,MDA含量降低(P<0.05)。结论:巴戟天寡糖有抗心肌缺血再灌注损伤作用,其机制可能与提高心肌抗氧化酶活性及减少脂质过氧化反应有关。

原花青素脑保护作用的研究

目的探讨原花青素对大鼠脑缺血/再灌注损伤的保护作用及机制。方法 80只♂大鼠随机分成5组,假手术组、模型组和原花青素低、中、高剂量(50、100、200 mg.kg-1)组。采用改良的线栓法制备大鼠局灶性脑缺血(2 h)/再灌注(24 h)损伤模型,原花青素各组于缺血前30 min和缺血后2 h腹腔注射原花青素溶液,假手术组和模型组给与等体积的NS。再灌注24 h后,测定脑片中ASIC1a的表达及MPO和iNOS活性。结果原花青素能降低缺血区脑组织中ASIC1a的表达,并且可降低脑组织中MPO和iNOS的活性。结论原花青素对大鼠脑缺血/再灌注损伤有保护作用,其机制可能与抗炎、抗氧化以及抑制ASIC1a的表达有关。

辣椒素对食管鳞状细胞癌细胞凋亡和NF-κB信号通路相关蛋白表达的影响

目的:探讨辣椒素对食管鳞状细胞癌(食管鳞癌)细胞凋亡和NF-κB信号通路的影响。方法:采用Westernblot法检测食管鳞癌EC9706和Eca109细胞中IκBα、磷酸化IκBα(pIκBα)、p50和p65蛋白的表达及0、50、100和200μmol/L辣椒素作用后pIκBα和Bcl-2蛋白的表达;凝胶滞留实验检测2种食管鳞癌细胞胞核中NF-κB与DNA的结合活性及0、100和200μmol/L辣椒素作用对NF-κB与DNA结合活性的影响。2种食管鳞癌细胞分别分为对照组、5-FU组、辣椒素组和联合组,流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况。结果:2种食管鳞癌细胞胞质均表达IκBα和pIκBα蛋白,胞核均表达p50和p65蛋白;随辣椒素作用浓度的增加,pIκBα和Bcl-2蛋白的表达逐渐下降,NF-κB与DNA的结合活性也逐渐下降。辣椒素可促进2种食管鳞癌细胞的凋亡,与5-FU联合使用时,凋亡细胞显著增加(EC9706:F辣椒素=2535.497,F交互=113.034,P<0.001;Eca109:F辣椒素=5984.040,F交互=5.150,P<0.05)。结论:辣椒素可能通过抑制IκBα的磷酸化阻断NF-κB信号通路,促进食管鳞癌细胞凋亡。

苯甲酸钠多次给药对大鼠肝肾功能的影响

目的:研究食品防腐剂苯甲酸钠多次给药对大鼠肝肾功能的影响。方法:选取50只健康SPF级SD大鼠,分为5组,每组10只,苯甲酸钠低、中、高剂量组分别灌胃给予苯甲酸钠(0.1、0.2、0.4 g/kg),阳性对照组给予山梨酸钾(0.2 g/kg),空白对照组给予生理盐水,1次/d,连续4周。检测末次给药后大鼠血清学指标(ALT、AST、ALP、GGT、TP、ALB、TBIL、BUN、Cre、UA),并观察肝肾组织病理学改变。结果:与空白对照组相比,苯甲酸钠低、中、高剂量组大鼠的各项血清生化学指标均有一定的异常,高剂量组最为显著(P均<0.05)。苯甲酸钠高剂量组大鼠肝脏出现了明显病理学异常,各组大鼠肾脏均未见病理学改变。结论:苯甲酸钠多次给药对大鼠肝肾,尤其是肝脏有一定的损害。

高脂饮食及ABCB1基因多态性对硝苯地平在健康受试者体内药动学的影响

目的探讨高脂饮食及ABCB1 C3435T基因多态性对硝苯地平人体药动学的影响。方法 90名汉族健康受试者分为空腹组和高脂餐组,各45名。分别在单次服用90 mg硝苯地平缓释片后,定时采血,用高效液相色谱-质谱联用法分析受试者硝苯地平血药浓度,采用PCR-限制性片段长度多态性分析法检测ABCB1 C3435T基因型。结果空腹组中,C/C、C/T、T/T 3种基因型分别为13例、24例、8例;T/T基因型受试者比C/C基因型受试者平均药时曲线下面积AUC0-∞增加了46.34%,分别为3252.08和2222.24(单位:μg·h·L-1),但差异无显著性(P=0.066)。空腹组与高脂餐组健康受试者的药动学参数Tpeak、Cmax、AUC0-48差异有显著性(P<0.05)。结论高脂饮食导致硝苯地平的吸收加快,吸收量增加;ABCB1基因型对硝苯地平体内药动学无明显影响。

雷公藤多苷对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的:观察雷公藤多苷(TwP)对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠的保护作用。方法:180只大鼠随机分为脑缺血再灌注组,TwP大、中、小剂量组,阳性对照组,假手术组。灌胃给药,采用大脑中动脉局灶性缺血再灌注模型,测定再灌注2 h缺血侧脑组织含水量、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛含量及大脑皮层神经元细胞内[Ca2+]i水平。结果:与假手术组相比,脑缺血再灌注组脑组织丙二醛含量增加、SOD活性降低、含水量及[Ca2+]i显著升高(P<0.01);与脑缺血再灌注组相比,TwP大、中、小剂量组,阳性对照组脑组织丙二醛含量减少、SOD活性升高、[Ca2+]i显著下降(P<0.01或P<0.05),TwP大、中剂量组,阳性对照组脑组织含水量显著降低(P<0.01);TwP各剂量组间结果亦有显著差异(P<0.01或P<0.05)。结论:TwP能减轻大鼠急性脑缺血再灌注损伤引起的脑水肿、降低脑组织丙二醛含量,提高SOD活性,降低细胞内钙积累;且随着剂量增加,变化显著增强,提示雷公藤多苷对大鼠急性脑缺血再灌注损伤具有保护作用。