基于社区和全科医学人才培养的药理学教学效果研究

目的调查在“三位一体”模式背景下学生对药理学学习的感受及该模式对药理学学习的提升情况,以作为改进的参考依据。方法以某三甲医院全科基地住培、助理全科作为研究对象,对其药理学学习相关情况进行了问卷调查。结果只有8.11%的受访者认为从学校毕业时药理学掌握比较好;72.97%的受访者同意在医院的实践过程加强了药理学学习;71.63%的受访者同意社区实践中药理学知识很重要。进行单因素方差分析后可发现,不同学历受访者从学校毕业时的药理学掌握情况及医院实践后药理学学习的提升情况差异无统计学意义(P>0.05)。结论药理学教学改革需要进一步构建多元化课程体系,将教学与临床紧密结合,建立科学的效果评价体系,并通过为学生创造更多社区实践机会且做好实践教育指导工作来改进“三位一体”模式。

心血管药理学教学的体会

心血管药理学作为药理学的重要组成部分,包含了药理学教学过程中的诸多重点和难点。文章介绍了教师要求学生课前复习先修课程的相关知识点,到讲授期间引导式教学,通过拓展知识点,融入思政元素,结合实验教学和案例教学等多种教学方法,激发学生学习兴趣,引导学生掌握学习方法,使其牢固理解和掌握心血管药理学知识。

微课结合基于问题的教学法在药理学教学中的应用

PBL(problem based learning)即基于问题的教学法,教学与微课相结合是一种医学教学新方式,旨在提高药理学教学效果,使学生将来能在临床实践中有效运用药理学知识。PBL教学法是以学生为主体的自我导向式学习,能够培养工作实践中需要的认知、情感、实践等诸多能力和技巧。微课充分利用网络的力量,将网络学习与课堂面授有机结合起来,使枯燥的重难点内容形象化及有趣化。PBL与微课相结合可显著激发学生学习兴趣,培养自我探索精神,提高知识的自我建构能力,提升教学效果。

双荧光素酶报告基因系统检测CYP3A4* 1G增强CYP3A4表达的调控作用

目的:探讨CYP3A4*1G增强CYP3A4基因表达的负调控作用。方法:设计合成包含CYP3A4*1G G或A等位基因的一系列基因片段(外显子10与内含子10交界处287和181 bp),构建CYP3A4*1G正向位于CYP3A4启动子上游的荧光素酶报告基因载体,与内参质粒pRL-TK共转染Hep G2细胞,通过双荧光素酶报告基因系统检测荧光素酶活性。结果:与CYP3A4启动子相比较,G与A等位基因在287 bp DNA片段中均降低了荧光素酶表达(F=795.575,P<0.001),且G与A等位基因对CYP3A4启动子活性的抑制程度比较差异无统计学意义(P>0.05)。与CYP3A4启动子相比较,G与A等位基因在181 bp DNA片段中均降低了荧光素酶表达(F=23.218,P<0.001),而G与A等位基因对CYP3A4启动子活性的抑制程度比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:在CYP3A4内含子10与外显子10交界处CYP3A4*1G存在与CYP3A4*1G变异无关的CYP3A4启动子的抑制元件,该抑制元件对CYP3A4*1G增强CYP3A4基因表达起负调控作用。

MOO诱导的Notch信号系统与PTEN在HUVEC中调控机制研究

目的：通过观察Notch信号通路阻断前后，对细胞增殖和细胞周期的影响，检测在MOO诱导下，Notch信号通路各基因和PTEN的mRNA表达及蛋白变化，进一步探讨MOO在缺血心肌中对Notch信号通路与PTEN的调控机制。方法：取第3代对数生长期的HUVEC建立缺氧复氧损伤（H／R）模型。

多学科综合治疗联合三轨教学法的教学法在肿瘤内科临床教学中的应用

目的探讨多学科综合治疗联合三轨教学法在肿瘤内科临床教学中的使用效率及其可操作性。方法选取2020年8月至2023年4月在郑州大学第一附属医院肿瘤内科轮转的研究生、留学生、进修生及规培生60名作为研究对象,随机均分为观察组和对照组,每组30名。教学时长12学时,教学内容为肿瘤内科诊断与治疗。观察组实施MDT联合三轨教学法,对照组实施传统教学法,随后进行临床考核及问卷调查,比较2组考试成绩和对教学质量的评价。结果观察组基础理论、病例分析、综合评分成绩均高于对照组(t=3.764,P<0.001;t=8.667,P<0.001;t=9.941,P<0.001)。观察组课堂气氛活跃、自主学习能力提高、理论知识增加、理论联系实际能力提高、培养临床思维、文献检索与分析能力提高、获得与理解信息能力提高、团队协作能力提升、满意目前教学模式、继续接受该教学模式的满意度均高于对照组(χ^(2)=13.871,P<0.001;χ^(2)=18.373,P<0.001;χ^(2)=14.067,P<0.001;χ^(2)=11.915,P<0.001;χ^(2)=8.531,P<0.001;χ^(2)=15.152,P<0.001;χ^(2)=11.915,P<0.001;χ^(2)=21.991,P<0.001;χ^(2)=24.754,P<0.001;χ^(2)=30.240,P<0.001)。结论在肿瘤内科临床教学中应用MDT联合三轨教学法,提高了教学质量和效果,可行性强,值得推广。

HepG2和Huh7细胞CYP3A4、CYP3A5和PXR基因非编码单核苷酸多态性分析

目的:对HepG2和Huh7细胞中CYP3A4、CYP3A5和PXR基因的重要非编码单核苷酸多态性(SNP)进行分析。方法:提取HepG2和Huh7细胞基因组DNA,PCR后进行测序分析。结果:在HepG2细胞中CYP3A4 rs2242480、rs3735451、rs2246709、rs4646440、rs12333983都为突变杂合子;而在Huh7细胞中上述前4个SNP为野生纯合子,最后1个为突变纯合子。在这两种细胞中,CYP3A4 rs35599367、rs4646437、rs35564277都为野生纯合子,rs2740574为突变纯合子。在HepG2和Huh7细胞中CYP3A5 rs776746分别为突变杂合子和突变纯合子。在两种细胞中,PXR rs3814055、rs2276706、rs6785049为突变杂合子,rs13059232为突变纯合子。上述14个SNP中,HepG2细胞突变杂合子较多,而Huh7细胞野生纯合子及突变纯合子较多。结论:HepG2和Huh7细胞中CYP3A4、CYP3A5 SNP基因型不完全相同,而PXR SNP基因型相同。

药物性肝损伤的代谢、遗传学机制

药物引起的肝损伤是引起急性肝功能衰竭的重要原因,也是导致治疗药物退市的主要原因。药物性肝损伤的发病机制复杂,其中以代谢、遗传学机制为主。该文综述了成人常用药物引起肝损伤的机制,并就热点问题进行讨论。旨在探讨这些研究可能的临床意义,为进一步阐明药物性肝损伤的发病机制指明方向。

药物代谢酶的个体发育及表观遗传调控

在个体发育过程中,药物代谢酶(drug metabolizing enzyme,DME)的表达发生明显变化,根据个体发育特点分为3类:第一类酶在妊娠前3个月胎儿表达水平高,至妊娠末仍然保持高水平或略微下降,出生后1~2年表达水平则明显降低。第二类酶在妊娠期表达水平稳定,出生后仅发生微小变化。第三类酶在胎儿体内不表达或表达水平较低,出生后1~2年则明显升高。表观遗传调控是不涉及DNA序列改变的基因组修饰,主要包括DNA甲基化、组蛋白修饰及非编码RNAs调控。在肝脏发育过程中,表观遗传机制对DME发育表达发挥重要的调控作用。该综述全面回顾DME发育表达模式,揭示药物代谢与处置的潜在表观遗传调控机制,以明显提高儿童患者药物处置的预测能力,促进儿童患者合理、安全、有效用药。

HepG2细胞中CYP3A、SLCO1B1和POR基因型检测

目的:检测Hep G2细胞中CYP3A、SLCO1B1、POR的单核苷酸多态性(SNP)位点CYP3A4*1G、CYP3A4*22、CYP3AP1*3、CYP3A5*3、SLCO1B1 T521C、SLCO1B1 A388G、POR*28的基因型。方法:从Hep G2细胞中提取基因组DNA,PCR扩增目的片段,对PCR扩增产物测序后分析上述7个多态性位点的基因型。结果与结论:CYP3A4*1G、CYP3A4*22、CYP3AP1*3、CYP3A5*3、SLCO1B1 T521C、SLCO1B1 A388G、POR*28的基因型分别为GA、CC、GA、AG、TC、AG、CC。CYP3A4*1G下游596 bp处基因型为CT,SLCO1B1 T521C下游50 bp和76 bp处基因型分别为TC和CT,POR*28下游281 bp处基因型为GA。

抗结核药物肝损伤研究进展

抗结核药物是造成药物肝损伤(Drug-induced liver injury,DILI)的重要原因之一,本文从发病机制、危险因素、诊断和防治等方面综述了近期抗结核药物肝毒性的研究进展,旨在为抗结核药物的临床合理应用提供参考。

妊娠期肝内胆汁淤积症胎盘OATP1A2和OATP1B3的表达及其多态性研究

目的:探讨胎盘OATP1A2和OATP1B3的表达水平及OATP1B3基因多态性与妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)的关系。方法:收集42例ICP胎盘和42例正常妊娠胎盘标本及母体静脉血,RT-q PCR和Western blot法分析OATP1A2和OATP1B3的mRNA及蛋白水平,测序法分析OATP1B3 c.334T>G和c.699G>A多态性位点基因型。结果:ICP胎盘中OATP1A2和OATP1B3的mRNA及蛋白表达水平均显著低于正常妊娠组(P<0.05)。ICP组和正常妊娠组中,OATP1B3 c.334C>T多态性纯合突变频率分别为50.0%和47.6%(P>0.05),c.699G>A多态性纯合突变频率分别为54.8%和45.2%(P>0.05);两组的两种多态性的突变等位基因频率比较,差异均无统计学意义(70.2%vs 70.2%和73.8%vs 67.9%,P>0.05)。ICP组OATP1B3不同基因型对其mRNA及蛋白的表达无显著影响(P>0.05)。结论:ICP胎盘中OATP1A2和OATP1B3表达下调可能与ICP高胆汁酸的发生有关,而OATP1B3 c.334T>G和c.699G>A多态性不影响OATP1B3表达。

MDT联合PBL-CBL教学法在淋巴瘤临床教学中的应用

目的探讨多学科综合治疗模式(MDT)联合以问题为基础的教学法(PBL)-以案例为基础的教学法(CBL)在淋巴瘤临床教学中的应用效果和可行性。方法选取40名在我院肿瘤内科实习的学生作为研究对象,随机分为对照组和联合组,每组20名学生。教学时长12学时,教学内容为淋巴瘤相关内容。对照组实施传统的教学法,联合组实施MDT联合PBL-CBL模式,随后进行临床考核及问卷调查,比较2组考试成绩和对教学质量的评价。结果联合组临床考核综合成绩和学生对教学效果的评价均优于对照组,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论在淋巴瘤临床教学中应用MDT联合PBL-CBL教学法,提高了教学质量和效果,可行性强,值得在教学实践中推广。

头孢克洛在健康人体的药代动力学和相对生物利用度

目的:研究头孢克洛在健康人体的药动学及相对生物利用度。方法:18名健康受试者随机交叉单剂量口服头孢克洛片标准参比制剂和被试制剂500mg,采用微生物法测定不同时间血清中药物浓度。结果:两制剂的体内过程均符合一房室开放模型,其主要药动学参数Cmax分别为(13.94±1.55)mg·L-1和(14.10±1.45)mg·L-1,Tmax为(0.72±0.15)h和(0.75±0.12)h,T1/2ke为(0.65±0.05)h和(0.69±0.06)h,AUCt0为(15.78±2.75)mg·h·L-1和(14.86±2.98)mg·h·L-1,AUC∞0为(15.96±2.74)mg·h·L-1和(15.10±3.04)mg·h·L-1。被试制剂的相对生物利用度为(107.99±17.82)%。结论:2种制剂具有生物等效性。

6-溴基丁基苯酞对大鼠局灶性脑缺血再灌注的保护作用

目的：观察6-溴基丁基苯酞对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法：SPF级Wistar大鼠36只，随机分为6组，每组6只。除假手术组，余5组（分别为丁基苯酞组、模型对照组和6-溴基丁基苯酞80，40，20mg／kg组）均以改良的线拴法制作急性大鼠中动脉脑缺血再灌注损伤模型。丁基苯酞组、6．溴基丁基苯酞80，40，20mg／kg组于缺血2小时灌胃给药，再灌注4小时后断头取脑，观察药物对脑梗塞体积以及抗脂质过氧化和病理保护的研究，并进行神经行为评分。结果：与模型组大鼠相比，6．溴基丁基苯酞80，40，20mg／kg组和丁基苯酞组大鼠神经运动功能障碍均明显改善（P〈0．01）；能明显缩小脑梗塞体积（P〈0．01：P〈0．05）；能显著提高神经细胞成活率（P〈0．01：P〈0．05）；作用机制可能与能够提高SOD活性有关（P〈0．01；P〈0．05），并且6-溴基丁基苯酞80mg／kg能显著减少MDA的含量。与丁基苯酞组相比，6-溴基丁基苯酞80，40mg／kg缩小梗塞体积优于丁基苯酞组（40mg／kg），显著提高细胞成活率（P〈0．01；P〈0．05）。结论：6-溴基丁基苯酞对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤具有保护作用。

6-氟基丁基苯酞对大鼠局灶性脑缺血再灌注的保护作用

目的：观察6-氟基丁基苯酞对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法：SPF级Wistar大鼠36只，随机分为6组，每组6只。除假手术组，余5组（分别为丁基苯酞组、模型对照组和6-氟基丁基苯酞80，40，20mg／kg组）均以改良的线拴法制作急性大鼠中动脉脑缺血再灌注损伤模型。丁基苯酞组、昏氟基丁基苯酞80，40，20mg／kg组于缺血2小时灌胃给药，再灌注4小时后断头取脑，观察药物对脑梗塞体积以及抗脂质过氧化和病理保护的研究，并进行神经行为评分。结果：与模型组大鼠相比，6-氟基丁基苯酞80，40mg／kg组和丁基苯酞组大鼠神经运动功能障碍均明显改善（P〈0．01），但昏氟基丁基苯酞20mg／kg与模型组相比无显著性差异；与模型组大鼠相比，6．氟基丁基苯酞80，40mg／kg组和丁基苯酞组大鼠能明显缩小脑梗塞体积（P〈0．01；P〈0．05）；但6-氟基丁基苯酞20mg／kg与模型组相比无显著性差异；与模型组大鼠相比，6-氟基丁基苯酞80，40mg／kg组和丁基苯酞组能显著提高神经细胞成活率（P〈0．01；P〈0．05）；但6-氟基丁基苯酞20mg／kg与模型组相比无显著性差异；作用机制可能与能够提高SOD活性有关（P〈0．01；P〈0．05）。与丁基苯酞组相比，6-氟基丁基苯酞80mg／kg缩小梗塞体积优于丁基苯酞组（40mg／kg）（P〈0．05），显著提高细胞成活率（P〈0．05）。结论：6-氟基丁基苯酞对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤具有保护作用。

替泊沙林对冰醋酸所致小鼠扭体的镇痛作用

目的：观察选择性COX-2抑制剂替泊沙林对冰醋酸所致小鼠扭体的镇痛作用。方法：雄性昆明种小鼠，体重18-22g，随机分为5组，每组10。对照组灌服0．5％羧甲基纤维素钠（20ml／kg），试药组分别灌服0．56、1．12、2．24及4．48mg／kg的替泊沙林。灌服1小时后，腹腔注射0．6％冰醋酸（生理盐水配制）10ml／kg，观察注射后小鼠首次出现扭体反应的时间（以“扭体反应潜伏期”表示），并记录注射冰醋酸后1小时内小鼠的扭体次数。结果：替泊沙林可明显抑制小鼠因腹腔注射冰醋酸而出现的扭体反应。灌服给药后，该化合物显著延缓小鼠首次出现扭体反应的时间及减少1小时内的扭体次数。CMC对照组和替泊沙林0．56、1．12、2．24及4．48mg／kg四试药组的扭体反应潜伏期分别为3．7、6．1、11．8、12．6及15．1min；与上述组别相对应的1小时内小鼠的扭体次数分别为139、113．6、73．4、46．8及31．4次。方差分析结果表明：替泊沙林给药组和CMC对照组间扭体反应潜伏期及1小时内小鼠的扭体次数均有显著性的差异（P〈0．05），且替泊沙林可剂量依赖性地延长注射冰醋酸后的扭体反应潜伏期并减少1小时内小鼠的扭体次数。结论：替泊沙林对小鼠因冰醋酸刺激所致疼痛具有显著的镇痛效果。

巴戟天糖链对分子搭桥中TRPC6通道及血管生成基因谱的影响

目的：观察巴戟天糖链（MOO）促进人脐静脉内皮细胞（ECV304）增殖中对其下游瞬时受体电位蛋白C家族中TRPC6通道蛋白信号转导的影响和血管生成基因谱的作用。

巴戟天糖链对ECV304细胞增殖中细胞周期和BKCa通道的影响

目的：观察巴戟天糖链（MOO）促进人脐静脉内皮细胞（ECV304）增殖中对细胞周期和大电导钙激活钾通道（B民）影响的作用，以探讨MOO促进血管内皮细胞增殖的药理学机制。方法：对正常传代生长3～8代的ECV304细胞进行缺氧1h、复氧2h处理，

CYP3A4内含子10对CYP3A4基因表达的增强子作用

目的探讨CYP3A4内含子10及其内SNP CYP3A4*1G对CYP3A4基因表达的调控作用.方法构建CYP3A4启动子启动转录的CYP3A4真核表达质粒,将CYP3A4内含子10(CYP3A4*1G野生型/突变型)正向或反向插入该质粒的启动子上游,从而构建出不同基因型、不同方向的CYP3A4内含子10调控的CYP3A4真核表达质粒.将构建好的各质粒分别转染入Hep G2细胞,应用实时荧光定量PCR方法检测CYP3A4 m RNA表达水平.结果构建的重组质粒经酶切验证与测序鉴定,插入片段的序列和方向与预期完全一致.无论CYP3A4*1G野生型还是突变型,反向组CYP3A4 m RNA表达水平均高于正向组(P<0.01);而CYP3A4内含子10无论是正向还是反向,CYP3A4*1G野生型组CYP3A4 m RNA表达水平均高于突变型组(P<0.01).此外,正向突变组CYP3A4 m RNA表达水平低于阳性对照组,不但没有增强CYP3A4启动子的转录作用反而有所减弱.结论CYP3A4内含子10有类似于增强子的功能,能够影响CYP3A4启动子对CYP3A4基因的转录,且具有方向性和CYP3A4*1G等位基因依赖性.