hTERT重组绿色荧光表达载体的构建与表达

目的构建人端粒酶逆转录酶(hTERT)片段的真核表达质粒。方法用RT-PCR方法从肝癌组织中提取总RNA扩增出hTERT基因片段,将其连接pGEM-TEasy质粒上,将重组质粒pGEM-T-hTERT和pEGFP-C3真核绿色荧光蛋白表达载体同时用HindⅢ和BamHⅠ双酶切后进行连接,再将重组的pEGFP-C3-hTERT基因片段转染NIH3T3细胞,经G418筛选获得稳定转染的细胞系,荧光倒置显微镜观察并检测转染细胞的hTERTmRNA表达水平。结果DNA序列分析证实了重组载体pGEM-T-hTERT和pEGFP-C3-hTERT内插入片段的碱基组成与公开发表的hTERT序列一致。转染pEGFP-C3-hTERT的NIH3T3细胞可见绿色荧光,并检出高水平表达的hTERT。结论成功构建高效表达hTERT的真核表达载体,为以hTERT为靶点的肿瘤治疗打下实验基础。

剖宫产术后72小时母乳喂养体位的选择

目的:探讨产妇剖宫产术后72小时内母乳喂养的最佳体位。方法:教会剖宫产术后的产妇三种体位母乳喂养的方法,产妇回病房后即开始卧位哺乳,观察术后48小时内和48~72小时内母乳喂养情况。结果:婴儿的含接姿势无显著差异(P】0.05),48小时内侧卧位哺乳的接受程度较高,48~72小时坐位环抱哺乳,侧卧位哺乳接受程度均较高。结论:剖宫产术后72小时内产妇采取不同体位进行母乳喂养优于单一体位。