酒渣鼻与幽门螺杆菌的相关性分析

目的观察酒渣鼻患者幽门螺杆菌感染(Hp)的发生率及根除Hp的三联疗法对酒渣鼻疗效的影响。方法对98例酒渣鼻患者和同期来本院进行健康体检者37例,分别行14C尿素呼气试验(14C-UBT)明确HP感染情况。将Hp感染的酒渣鼻患者随机分为A组和B组,A组予外用过氧苯甲酰凝胶,B组在A组治疗方案的基础上同时予根除HP三联疗法治疗,比较两组患者的临床疗效。结果酒渣鼻患者组Hp阳性率70.41%,健康体检者Hp阳性率29.73%;HP感染的酒渣鼻患者,B组治愈率58.82%;A组26.47%;以上差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论酒渣鼻患者Hp阳性率较高,根除Hp与酒渣鼻治愈率提高存在一定的相关性。外用药物联合根除Hp三联疗法可明显提高Hp感染的酒渣鼻患者的治愈率,值得临床上选用。

METTL3 N6-甲基腺嘌呤修饰circSAFB2调控骨肉瘤细胞侵袭和凋亡

目的观察甲基转移酶(METTL3)介导N6-甲基腺嘌呤(m6A)修饰修饰circSAFB2对骨肉瘤细胞侵袭和凋亡的影响。方法选取经病理确诊的骨肉瘤标本16例及骨肉瘤细胞株MG63, qRT-PCR检测骨肉瘤组织与MG63细胞中METTL3 mRNA和circSAFB2的表达水平。使用SRAMP prediction server在线预测软件对circSAFB2中m6A甲基化位点进行预测, 并通过m6A MeRIP-qPCR对骨肉瘤组织和MG63细胞中circSAFB2存在m6A甲基化修饰进行验证。应用MeRIP-qPCR检测骨肉瘤组织和MG63细胞中circSAFB2 m6A甲基化修饰水平。分别将METTL3 siRNA重组慢病毒、METTL3 NC重组慢病毒感染骨肉瘤细胞后, 通过放线菌素D、Transwell和流式细胞仪分别检测各组细胞RNA稳定性、侵袭和凋亡, 两样本两组间比较用t检验;多组间比较采用单因素方差分析、组间比较采用LSD法。结果 METTL3 mRNA(2.354±0.224)和circSAFB2(2.072±0.264)在骨肉瘤组织中的表达量高于癌旁组织(1.000±0.089、1.000±0.104, P<0.05)。骨肉瘤细胞系MG63中METTL3(2.429±0.211)和circSAFB2 mRNA(2.271±0.214)表达量高于正常人成骨细胞(1.000±0.100、1.000±0.136, P<0.05)。SRAMP在线m6A甲基化位点预测结果显示, circSAFB2的115和234位存在m6A甲基化修饰位点;骨肉瘤组织和MG63细胞中, m6A抗体免疫共沉淀的circSAFB2丰度(18.397±1.627、23.338±2.225)均显著高于IgG抗体(1.000±0.130、1.000±0.060, P<0.01), 证实circSAFB2上存在m6A甲基化修饰。MeRIP-qPCR检测结果显示, 骨肉瘤组织circSAFB2 m6A RNA甲基化修饰水平(3.264±0.217)高于癌旁组织(1.000±0.070, P<0.05);MG63细胞中circSAFB2 m6A RNA甲基化修饰水平(3.379±0.205)高于正常人成骨细胞(1.000±0.064, P<0.05)。转染METTL3 siRNA重组慢病毒的MG63细胞(si-METTL3组), 放线菌素D处理6 h和12 h, circSAFB2表达水平(72.570±4.809、52.195±3.081)低于转染METTL3 NC重组慢病毒组(si-NC组)(87.540±5.539、71.131±4.320, P<0.05)。si-METTL3组侵袭数量(54.333±6.429)低于si-NC组(124.667±13.577, P<0.05);凋亡率[(25.105±1.638)%]高于si-NC组[(7.241±0.533)%, P<0.05]。结论骨肉瘤组织细胞中METTL3可通过m6A修饰circSAFB2调控骨肉瘤细胞的侵袭和凋亡。

缺血性脑损伤后食欲素原系统的表达变化及电刺激小脑顶核对其调节作用

目的研究缺血性脑损伤及预先电刺激小脑顶核（FNS）对前增食欲素原（prepro-orexin）及OX1受体（OX1R）的影响。方法建立持续性大脑中动脉闭塞（MCAO）大鼠模型，分为假手术组（PO组）、FNS假手术组（FNS—PO组）、缺血组（PI组）、缺血后FNS治疗组（PI—FNS组）、预先行小脑顶核毁损，再缺血行FNS治疗组（FNL-PI—FNS组）。各组均分1，3，6，12，24h5个亚组。采用免疫组织化学法检测Prepro—Orexin和OX1R的表达变化，逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）法检测OX1R mRNA的表达变化，酶联免疫法检测（RT—PCR）下丘脑及血浆中orexin-A水平的变化。结果随着缺血时间延长，PI组Prepro-Orexin免疫反应性的平均OD值不断降低，至缺血第12小时时，降至最低。与PO组、FNS—PO组相比差异有统计学意义（P〈0．05）。同时，OX1R免疫反应性的平均OD值不断增高，缺血第12小时时，达到高峰，与PO组、FNS-PO组相比差异有统计学意义（P〈0．05）。PI—FNS组缺血第6小时、第12小时组与其相应PI组相比，差异有统计学意义（P〈0．05）。FNL—PI-FNS组结果与PI组差异无统计学意义（P〉0．05）。PO组、FNS—PO组OX1R mRNA表达相似（P〉0．05）。PI组随着缺血时间延长，OX1R mRNA表达增高，缺血第24小时时，达到高峰。PI-FNS组在缺血第12小时、第24小时与其相应PI组相比，差异有统计学意义（各组P〈0．05）。FNL-PI—FNS组结果与PI组差异无统计学意义（P〉0．05）。此外，各组血浆orexin—A水平差异无统计学意义（P〉0．05）；PI和FNL—PI—FNS组下丘脑orexill—A水平随着缺血时间延长，呈不断降低趋势。缺血第12小时时，与PO组、FNS—PO组相比，差异有统计学意义（P〈0．05）。PI—FNS绀与PO、FNS—PO组相比，差异无统计学意义（P〉0．05）。结论脑缺血后可以影响食欲素原系统的表达，FNS能够调节这种变化。

颈椎外科手术入路选择及并发症的防治

临床上，颈椎疾病种类很多，如：颈椎病、颈椎间盘突出症、颈椎不稳、发育性颈椎管狭窄症、退变等因素继发性颈椎管狭窄症、颈椎后纵韧带钙化症（OPLL）、颈椎黄韧带肥厚或钙化、颈椎骨折、脱位或骨折并脱位、无骨折脱位放射学征象的颈髓损伤等，严重者常需手术治疗。

CircSAFB2通过微小RNA-1301-3p/zeste基因增强子同源物2对骨肉瘤细胞凋亡和侵袭的作用

目的:观察circSAFB2通过微小RNA(miR)-1301-3p/zeste基因增强子同源物2(EZH2)对骨肉瘤细胞凋亡和侵袭的影响。方法:选用骨肉瘤细胞株MG63,实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测MG63细胞和正常成骨细胞中circSAFB2、miR-1301-3p和EZH2 mRNA的表达。将circSAFB2小干扰RNA(siRNA)慢病毒感染骨肉瘤细胞,用流式细胞术检测细胞凋亡率,Transwell检测细胞侵袭能力。培养HEK293细胞,将miR-1301-3p mimic和miR-NC分别与野生型circSAFB2(Wt)或突变型circSAFB2(Mut)重组报告基因质粒共转染,将miR-1301-3p mimic和miR-NC分别与野生型EZH23’端非编码区(3’UTR)(Wt)或突变型EZH23’UTR(Mut)重组报告基因质粒共转染,使用双荧光素酶报告系统检测荧光素酶活性。蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞中上调miR-1301-3p表达后EZH2表达水平的变化。最后分别转染circSAFB2 siRNA、miR-1301-3p mimic、共转染circSAFB2 siRNA和pcDNA3.1-EZH2、共转染miR-1301-3p mimic和pcDNA3.1-EZH2,通过流式细胞术、Transwel1分别检测各组细胞凋亡和侵袭能力。组间比较采用t检验。结果:RT-qPCR结果显示,骨肉瘤细胞MG63中circSAFB2、EZH2 mRNA表达量高于正常成骨细胞(2.263±0.154比1.000±0.093、4.155±0.406比1.000±0.092,t=15.686、16.955,P<0.05);miR-1301-3p表达量低于正常成骨细胞(0.333±0.031比1.000±0.120,t=12.095,P<0.05)。感染circSAFB2 siRNA骨肉瘤细胞的凋亡率高于感染circSAFB-NC组和Blank组[(22.48±2.27)%比%(5.92±0.57)%、(5.61±0.62)%,F=142.710,P<0.05],侵袭数量低于感染circSAFB-NC组和Blank组[(49.333±7.024)比(112.667±14.978)、(110.667±14.048),F=24.767,P<0.05]。生物信息学分析及双荧光素酶报告基因检测进一步证实了CircSAFB2靶向miR-1301-3p,同时EZH2是miR-1301-3p的靶基因。circSAFB2 siRNA和pcDNA3.1-EZH2共转染的凋亡率低于单独转染circSAFB2 siRNA组[(12.07±0.92)%比(19.58±2.13)%,F=51.211,P<0.05],侵袭数量高于单独转染circSAFB2 siRNA组[(77.333±12.741)比(47.667±7.506),F=13.595,P<0.05]。miR-1301-3p mimic和pcDNA3.1-EZH2共转染的凋亡率低于单独转染miR-1301-3p mimic组[(14.07±1.42)%比(20.73±1.99)%,F=51.211,P<0.05],侵袭数量高于单独转染miR-1301-3p mimic组[(83.667±12.741)比(50.667±8.622),F=13.595,P<0.05]。结论:circSAFB2通过miR-1301-3p/EZH2调控骨肉瘤细胞的凋亡和侵袭的作用。