口腔扁平苔藓组织中IL-35表达水平与外周血CD4^(+)CD25^(+)Treg的相关性

目的探究口腔扁平苔藓(OLP)组织中白介素-35(IL-35)表达水平与外周血CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞(Treg)的相关性。方法收集2016年9月至2018年9月期间我院口腔科收治的口腔扁平苔藓患者38例,设为OLP组,另选同期来我院体检的健康人群20例作为对照组。取两组外周静脉血,荧光定量PCR检测外周血单个核细胞内IL-35两个亚基EB病毒诱导蛋白3(EBI3)、IL-12 p35和CD4^(+)CD25^(+)Treg标志物叉状头转录因子P3(FOXP3)的表达,酶联免疫吸附法检测血清IL-35、白介素-10(IL-10)、白介素-17(IL-17)和转化生长因子β1(TGF-β1)的含量,流式细胞仪检测外周血CD4^(+)CD25^(+)Treg细胞水平,分析IL-35和CD4^(+)CD25^(+)Treg水平与OLP患者临床病理特征之间的关系,Pearson法分析EBI3、IL-35与CD4^(+)CD25^(+)Treg的相关性。结果与对照组相比,OLP组外周血单个核细胞内EBI3、IL-12 p35、FOXP3的mRNA均显著上调(P<0.05)。与对照组相比,OLP组患者血清IL-35、IL-10、IL17、TGF-β1含量显著均上调,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组相比,OLP组患者外周血CD4^(+)T细胞和CD4^(+)CD25^(+)Treg细胞水平均显著下降,差异有统计学意义(P<0.05);IL-35和CD4^(+)CD25^(+)Treg水平与患者基底细胞变性程度有关(P<0.05),而与性别、年龄、病程、疾病类型和淋巴细胞浸润无关(P>0.05)。OLP中IL-35与外周血CD4^(+)CD25^(+)Treg的水平呈正相关(r=0.3644,P<0.05)。结论OLP中IL-35与CD4^(+)CD25^(+)Treg表达均显著升高,且二者具有正相关关系。

慢性牙周炎患者入院时血清脂联素、瘦素水平与疾病严重程度的关系

目的探讨慢性牙周炎(CP)患者血清脂联素(ADPN)、瘦素(LEP)的表达及与疾病严重程度的关系。方法前瞻性纳入郑州大学第一附属医院2021年3月至2023年3月收治的90例CP患者为研究组,并依据入院时疾病严重程度分为轻度组(48例)、中度组(28例)、重度组(14例),另选取同期至医院体检的90例健康人群作为对照组。对比研究组与对照组、不同疾病严重程度CP患者间的血清ADPN、LEP水平及其他临床资料。结果研究组血清LEP水平高于对照组,ADPN水平低于对照组(P<0.05)。重度组、中度组、轻度组患者LEP、既往吸烟史占比依次降低,ADPN水平依次升高(P<0.05)。经点二列相关性分析显示,血清LEP与CP患者疾病严重程度呈正相关(r>0,P<0.05);血清ADPN、既往吸烟史与CP患者疾病严重程度呈负相关(r<0,P<0.05)。结论血清ADPN、LEP在CP患者中呈异常表达,且随着病情严重程度的提升,ADPN水平下降,LEP水平升高。

精氨酸对变异链球菌生物膜及牙骨质再矿化作用的体外研究

目的:观察精氨酸对变异链球菌生物膜和牙骨质再矿化的作用,探讨精氨酸对根面龋预防的临床效果及可行性。方法:以不加精氨酸为对照组,采用4种不同质量浓度的精氨酸溶液处理变异链球菌生物膜,研究精氨酸在龋病预防中的效果。24 h后通过pH值测定、结晶紫染色,观察不同质量浓度精氨酸溶液对变异链球菌生物膜的影响。收集无龋坏的人前磨牙制备牙骨质块,构建人工根面龋模型并随机分为对照组(人工唾液处理)、实验组(7.5、15.0和30.0 g/L精氨酸处理)共4组,经梯度精氨酸溶液处理后,进行20 d再矿化实验,通过扫描电镜、能谱仪观察精氨酸对脱矿牙骨质物理及化学构成的影响,分析精氨酸对根面龋早期的治疗效果。结果:相较于对照组,精氨酸处理对变异链球菌生物膜具有明显的抑制效果(P<0.001);根面牙骨质表面结构更为致密,Ca、P含量升高(P<0.001);与低质量浓度精氨酸相比,高质量浓度精氨酸组对生物膜的抑制和根面龋的再矿化作用更为显著。结论:精氨酸对变异链球菌生物膜形成有良好的抑制作用,且能促进根面龋牙骨质再矿化,在根面龋的预防及早期治疗方面效果显著。

静态载荷下不同材料修复下颌第二前磨牙非龋性颈部缺损的有限元分析

目的:分析不同材料修复下颌第二前磨牙非龋性颈部缺损的生物力学行为。方法:制备右下颌第二前磨牙颈部缺损模型(对照),分别用IPS e.max(A组)、Celtra Duo(B组)、Filtek Z350树脂块(C组)、Lava Ultimate(D组)和Filtek Supreme XT(E组)5种材料修复缺损,修复后均采用垂直、颊向舌45°、舌向颊45°加载100 N进行实验,ANSYS有限元软件进行应力分析。结果:不同加载方式下各实验组牙体及修复材料均表现出相似的应力变化趋势,修复后各实验组应力值均较对照组明显降低,尤以Filtek Z350树脂块、Lava Ultimate和Filtek Supreme XT更为明显。同一组中,舌向颊45°加载更易促进牙体颈部应力集中。结论:同等载荷下,接近或低于牙体组织弹性模量的材料具有更好的应力分布模式,牙体修复效果可能更佳。

一种NEMO基因的新型突变引起的色素失禁症

目的:对一例色素失禁症患者进行遗传学病因检查,分析色素失禁症致病基因NEMO是否存在新的突变。方法:在色素失禁症家系调查的基础上,收集家系患者和其父母的血样提取基因组DNA、cDNA,并采集正常人群对照血样101例提取基因组DNA,采用PCR法对NEMO基因进行cDNA扩增测序,在正常人群对照DNA中验证突变位点是否为多态。结果:先证者存在NEMO基因2号外显子至3’UTR大片段杂合缺失c.324_1888 del(碱基比对序列参考Ensembl数据库,转录本ID:ENST00000369601.3,碱基计数含UTR),该突变未在HGMDpro数据库中有报道,正常人群中也未发现。结论:NEMO基因的c.324_1888 del杂合突变是引起患者色素失禁症的原因。

活化蛋白A受体1在成牙本质细胞极化和牙本质形成中的作用

目的:研究活化蛋白A受体1(ACVR1)对成牙本质细胞极化及牙本质形成的影响。方法:以Cre-LoxP系统建立牙源性间充质特异性Acvr1基因敲除小鼠模型,取"Osterix-Cre;Acvr1 fx/-基因型小鼠"为实验组,同窝"Osterix-Cre;Acvr1 fx/+基因型小鼠"为对照组。取新生小鼠,通过HE染色观察小鼠下颌切牙的牙本质形成和成牙本质细胞形态;天狼星红染色观察下颌切牙的牙本质胶原排列;免疫荧光染色检测高尔基体(GM130)在下颌切牙成牙本质细胞中的定位。结果:HE染色结果显示,与对照组相比,实验组小鼠下颌切牙有牙本质形成缺陷,牙尖处可见骨样牙本质;从颈环至牙尖,成牙本质细胞形态由多角形变为高柱状,又变为多角形,极性从无到有,再逐渐消失,最终牙尖处部分细胞极性完全丧失。天狼星红染色结果显示实验组小鼠切牙的牙尖处胶原排列紊乱。GM130免疫荧光染色结果显示实验组小鼠切牙的近牙尖处成牙本质细胞中,高尔基体-细胞核相对位置发生变化。结论:Ⅰ型BMP受体ACVR1可维持成牙本质细胞极性并促进牙本质的有序形成,在调控牙本质形成中具有重要作用。

基于PI3K/Akt通路探讨积雪草酸对健康人牙周膜细胞增殖、凋亡及成骨分化的作用机制研究

目的观察积雪草酸对健康人牙周膜细胞(human periodontal ligament cells,hPDLCs)增殖、凋亡及成骨分化的作用,探究其作用机制。方法采用不同浓度积雪草酸处理健康hPDLCs,CCK8法检测不同时间点积雪草酸对hPDLCs的增殖能力的影响;流式细胞仪检测细胞凋亡情况;碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)和茜素红染色检测细胞成骨分化情况,qRT-PCR法检测细胞ALP、Runt相关转录因子2(runt-related transcription factor 2,Runx2)、骨钙素(osteocalcin,OCN)、骨形态发生蛋白2(bone morphogenic protein 2,BMP2)和核因子κB受体活化因子配体(receptor activator nuclear factorκB ligand,RANKL)mRNA表达水平;Western blotting法检细胞中B淋巴细胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2-associated X protein gene,Bax)、半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)、磷脂酰肌醇3-激酶(phosphoinositide 3-kinase,PI3K)、磷酸化PI3K(p-PI3K)、蛋白激酶B(proteinkinase B,Akt)、磷酸化Akt(p-Akt)蛋白表达水平。结果与对照组比较,不同浓度积雪草酸对hPDLCs增殖和凋亡无显著影响。在成骨诱导条件下,与对照组比较,不同浓度积雪草酸可提高ALP、Runx2、OCN、BMP2 mRNA表达,减少RANKL mRNA表达,上调PI3K和Akt磷酸化水平,其中50μg/mL积雪草酸的效果最佳。结论100μg/mL以下积雪草酸对健康h PDLCs增殖和凋亡无影响,但可促进hPDLCs成骨分化能力,其作用机制可能与激活PI3K/AKT通路有关。