ChemR23在血管紧张素Ⅱ诱导的足细胞损伤中的作用

目的观察在血管紧张素（Ang）Ⅱ诱导下足细胞ChemR23表达的改变，并探讨其作用机制。方法体外培养条件永生化小鼠肾小球足细胞。免疫荧光染色法观察ChemR23的亚细胞定位，qRT—PCR法及Western印迹法检测不同浓度AngⅡ刺激后足细胞ChemR23、裂隙膜蛋白Nephrin及Podocin的mRNA和蛋白表达。用慢病毒干扰法诱导ChemR23表达，Western印迹法检测干扰后足细胞Nephrin和Podocin表达变化及其对核因子κB（NF—κB）P65蛋白磷酸化水平的影响。AngⅡ刺激前加入NF—κBP65抑制剂预孵育细胞2h后，Western印迹法观察Nephrin及Podocin表达的改变。结果ChemR23主要表达于细胞质及细胞膜上。与对照组相比，AngⅡ刺激可显著增加ChemR23mRNA及蛋白的表达，减少Nephrin及PodocinmRNA及蛋白的表达（均P〈0．05）。用慢病毒干扰ChemR23表达后，受AngⅡ抑制的Nephrin及Podocin表达水平明显恢复，与对照组相比，差异有统计学意义（P〈0．05）。Western印迹结果显示，AngⅡ可导致NF—κBP65磷酸化表达水平明显升高（P〈0．05），干扰ChemR23可抑制其磷酸化P65蛋白表达。加入NF—κBP65抑制剂后，AngⅡ诱导的Nephrin及Podocin表达降低得到恢复（均P〈0．05）。结论AngⅡ诱导足细胞ChemR23高表达后，可通过激活NF-κB P65通路，抑制Nephrin及Podocin表达，造成足细胞损伤。干预ChemR23的表达可抑制AngⅡ诱导的足细胞损伤。