siRNA腺病毒载体预防兔酒精性股骨头坏死的动物实验研究

目的观察靶向PPARγ基因siRNA腺病毒载体预防兔酒精性股骨头坏死(ONFH)的作用效果。方法新西兰种家兔60只,随机分为5组,每组12只。正常对照组(N):采用灌胃法,给予10%葡萄糖溶液10ml/(kg·d);单纯马血清致敏组(H):马血清致敏后,给予同量10%葡萄糖灌胃,作为对照;马血清致敏+酒精组(M):马血清致敏后,采用灌胃法,给予烈性白酒(含酒精46%,V/V)10ml/(kg·d),作为模型组;酒精+空载体组(CO):马血清致敏后灌酒,将空载体组病毒滴液注入动物一侧股骨头内;马血清致敏+酒精+重组腺病毒组(S):实验组,马血清致敏后灌酒,将siRNA腺病毒滴液注入动物一侧股骨头内。在灌酒后第4、8周末分批处死动物,观察其股骨头病理学变化。RT-PCR检测股骨头组织中PPARγmRNA和Osteocalcin mRNA的表达。结果M、CO组中,PPARγmRNA高表达,Osteocalcin mRNA低表达,空骨陷窝百分比及最大脂肪细胞平均直径明显增大、骨小梁面积分数降低,与N、H组相比差异均有统计学意义;S组中,PPARγmRNA低表达,Osteocalcin mRNA高表达,空骨陷窝百分比、最大脂肪细胞平均直径、骨小梁面积分数均与H、N组接近,差异均无统计学意义。结论靶向PPARγ基因siRNA腺病毒载体能够有效阻断酒精诱导的家兔股骨头内骨髓基质细胞内PPARγmRNA表达及成脂分化,预防酒精性ONFH的发生。

激素对兔骨髓间充质干细胞神经递质表达的影响

背景:激素性股骨头坏死的确切发病机制仍未清楚,研究发现神经系统可通过多种途径调控骨髓间充质干细胞的分化,激素可能通过影响其调控机制而引起骨坏死。目的:观察在激素作用下,骨髓间充质干细胞中神经递质或其受体mRNA表达的变化。方法:密度梯度离心和贴壁培养获得兔骨髓间充质干细胞。将传代培养的第3代细胞随机分为两组,实验组加入浓度为10-7mol/L的地塞米松,对照组正常培养。分别于诱导后第4,7,11,15天,测定细胞中神经生长因子、成纤维细胞生长因子、降钙素相关基因肽受体、血管活性肠肽受体、P物质受体及过氧化物酶体增殖子活化受体γ的mRNA表达。结果与结论:实验组神经生长因子、成纤维细胞生长因子、降钙素相关基因肽受体、血管活性肠肽受体和P物质受体的mRNA表达较对照组明显降低,而过氧化物酶体增殖子活化受体γmRNA表达较对照组明显增高,差异均具有显著性意义(P<0.01),实验组各因子在不同时间点间进行比较却无明显差异(P>0.05)。结果表明大剂量激素可使骨髓间充质干细胞中具有成骨或成血管作用的神经递质或其受体表达下降,这可能与激素性股骨头坏死发生的机制有关。

人工全髋关节置换术后双下肢长度的变化

目的:观察人工全髋关节置换术后双下肢长度的变化。方法:2009年1月至2011年6月接受单侧和双侧人工全髋关节置换术的患者117例(152髋),术前下肢等长35例,不等长82例。所有病例均使用生物型假体关节行全髋关节置换。测量术后1周内的下肢长度,计算术后双下肢长度之差,视双下肢长度之差≤10mm者为等长。结果:117例患者中,术后下肢等长116例(99.2%),双下肢长度相差11mm者1例(0.9%);116例中术后双下肢完全等长108例(92.3%),相差<6mm者5例,相差6～10mm者3例。结论:充分掌握各种术中测量下肢长度的方法,综合运用于平衡下肢长度,术中多次比对可降低术后下肢不等长的发生率。

乙醇改变骨髓间充质干细胞神经肽的表达

背景:研究发现骨髓间充质干细胞的分化受神经系统调控。目的:观察乙醇对人骨髓间充质干细胞降钙素基因相关肽受体、P物质受体、过氧化物酶体增殖子活化受体γmRNA及Runx2mRNA表达的影响。方法:将第2代人骨髓间充质干细胞随机分组培养:实验组加入0.09mol/L乙醇,对照组正常培养。结果与结论:培养11d后,实验组降钙素基因相关肽受体、P物质受体、Runx2mRNA表达较对照组明显降低(P<0.01),过氧化物酶体增殖子活化受体γmRNA水平较对照组明显增高(P<0.01)。表明乙醇改变了骨髓间充质干细胞中神经肽类物质的表达,减弱了其向成骨细胞方向分化。

过氧化物酶增殖子活化受体-γsiRNA腺病毒载体的构建

目的:构建针对过氧化物酶体增殖子活化受体-γ(PPARγ)基因的siRNA腺病毒载体。方法:依据siR-NA设计原则,在PPARγmRNA(AF013266)序列中设计2个特异性靶序列(36-54、73-91),体外合成对应发卡样DNAs,退火后先将其克隆入pSIREN-Shuttle载体,再亚克隆入pAdeno腺病毒载体,对插入序列进行DNA序列分析。结果:发卡样siRNA单链DNA寡核苷酸退火后,电泳可见明亮靶条带。连接退火寡核苷酸和pSIREN-Shuttle载体得到阳性克隆pSIREN-Shuttle-siPPARγ-36、pSIREN-Shuttle-siPPARγ-73。同源重组后得到亚克隆pAdeno-siPPARγ-36、pAdeno-siPPARγ-73,测序证实插入序列与设计序列完全一致。结论:成功构建2个靶向PPARγ基因的siRNA载体pAdeno-siPPARγ-36和pAdeno-siPPARγ-73。

山羊骨髓间充质干细胞的体外培养与生物学特性

目的：体外分离培养山羊骨髓问充质干细胞（BMSC），并观察其生物学特性。方法：应用常规密度梯度离心法从山羊骨髓中分离BMSC并传代培养，镜下观察细胞形态及生长特性，绘制细胞生长曲线，测定倍增时间，免疫细胞化学法鉴定其表型。结果：原代培养的BMSC初始呈圆形、梭形及多角形等，细胞呈贴壁生长，48h可见贴壁细胞有伸展现象，细胞渐变为均一梭形，14d时可达90％融合。第1、3和5代BMSC生长曲线呈“s”型，l～2d为潜伏期，2—3d后进入对数增长期，7～8d后进入平台期，平均倍增时间为（23．2±1．9）h。BMSCCD29和CD44呈广泛阳性表达，CD34和CD45呈阴性表达。结论：成功分离培养出山羊BMSC，细胞纯度较高，生长状态良好。

转化生长因子β1基因克隆及重组真核表达质粒的构建

背景:通过基因转移方法研究某一外源性基因在细胞中的作用是目前分子生物学常用的技术手段,与病毒载体相比,应用pcDNA4.0-TGF-β1真核表达质粒的转染方法无遗传毒性和细胞毒性,有更高的安全性。目的:通过克隆转化生长因子β1基因,观察构建重组转化生长因子β1基因真核表达质粒的可行性。设计、时间及地点:以细胞为观察对象的体外实验,于2007-03/2008-02在河南省高等学校临床医学重点学科开放实验室完成。材料:2月龄清洁级健康SD大鼠,雌雄不拘,用于分离细胞中RNA。方法:从大鼠骨髓细胞中分离提取转化生长因子β1的mRNA,反转录-聚合酶链反应扩增后,克隆入pGEM-T载体,PCR鉴定重组子;酶切下目的基因转化生长因子β1,再亚克隆入载体pcDNA4.0质粒,酶切鉴定亚克隆重组子并进行DNA序列分析。主要观察指标:TGF-β1cDNA、pGEM-T-TGF-β1和重组子pcDNA4.0-TGF-β1的表达。结果:经过反转录-聚合酶链反应扩增得到TGF-β1cDNA条带;PCR扩增鉴定得到pGEM-T-TGF-β1。酶切鉴定得到亚克隆重组子pcDNA4.0-TGF-β1,经测序鉴定证实插入DNA序列与设计完全一致。结论:成功克隆大鼠转化生长因子β1基因,并构建出重组转化生长因子β1真核表达载体。

靶向特异基因小干扰RNA预防乙醇性股骨头坏死的研究

目的观察靶向PPARγ基因小干扰RNA（siRNA）预防灌胃法家兔乙醇性股骨头坏死的效果。方法将96只家兔随机分为4组，每组24只。N组：灌胃法给予生理盐水10ml／（kg·d）。M组：灌胃法给予烈性酒（含乙醇度46％，V／V）10ml／（kg·d）；S组：实验1、3、5个月第1天，随机选择侧别手术，穿刺注入股骨头内25p,1siRNA重组腺病毒，同M组灌酒；c0组：同s组手术，同M组灌酒，不注入siRNA重组腺病毒。于2、4、6个月末分批处死家兔，观察血清学和股骨头组织病理学变化。结果实验6个月时，N、M、CO、S组血清甘油三酯含量分别为（1．21±0．12）、（4．59±1．58）、（4．63±1．17）、（4．32±1．20）mmol／L；总胆固醇含量分别为（2．35±0．33）、（19．59±1．58）、（20．13±1．17）、（18．32±1．20）mmol／L；脂肪细胞平均直径分别为（40．89±2．41）、（48．65±2．93）、（49．45±2．63）、（42．52±2．57）μm；骨小梁面积分数分别为（41．80±2．47）％、（30．70±2．86）％、（29．80±2．69）％、（41．60±2．87）％；空骨陷窝计数分别为（12．30±1．73）％、（22．40±1．52）％、（23．10±1．62）％、（11．70±1．46）％；PPARγ表达量分别为（0．29±0．05）、（0．66±0．12）、（0．61±0．15）、（0．33±0．05）；骨钙素mRNA表达量分别为（0．92±0．07）、（0．19±0．11）、（0．23±0．08）、（0．88±0．11）；PPAR~蛋白表达量分别为（0．75±0．08）、（1．60±0．11）、（1．55±0．12）、（0．65±0．05）。M、CO组病理变化明显，髓内造血组织减少，脂肪细胞增殖肥大，骨小梁变细、稀疏、部分断裂；S组股骨头内最大脂肪细胞平均直径、空骨陷窝计数、骨坏死发生率、PPARγ基因与蛋白表达量均明显低于M、CO组（P〈0．01，P〈0．05），S组与N组差异无统计学意义（P〉0．05）。结论靶向PPARγ基因siRNA腺病毒载体能够有效阻断乙醇诱导的家兔股骨头内MSCs中PPARγ基因表达及成脂分化，预防乙醇性ONFH的发生。

全膝关节置换术后高屈曲活动度对改善患者生活质量的作用

目的 探讨全膝关节置换术（TKA）后膝关节高屈曲活动度在改善患者生活质量中的作用.方法 我院骨科行单侧全膝关节置换术的患者68例,术后随访24～ 36个月,平均随访时间30.3个月,将术后随访时的关节活动度,以130＆#176;为界点分为高屈曲组（≥130＆#176;）共30例与对照组（＜130＆#176;）共38例.根据患者术前与术后关节活动度、纽约特种外科医院膝关节评分（HSS）关节功能评分及术后健康调查简表（SF-36）等数据结果,使用SPSS 18.0统计软件分析.结果 高屈曲组的关节功能、活动度、HSS评分平均值分别为（16.8±3.6）、（17.1±0.3）、（90.9±6.6）分,高于对照组[（14.3±3.0）、（15.3±1.2）、（86.4±5.4）分,P＜0.05].SF-36中生理功能和社会功能评分分别为（75.3±15.5）、（75.0±10.6）分,明显高于对照组[（60.4±19.0）、（57.6±29.3）分,P＜0.05].术后屈曲度≥130＆#176;组的患者满意度高达96.7％.结论 TKA术后膝关节高屈曲活动度功能在改善患者膝关节功能和生活质量中具有重要作用.

全髋置换术治疗髋关节发育不良伴骨关节炎34例报告

[目的]研究全髋置换术治疗髋关节发育不良伴骨关节炎的方法及疗效。[方法]自2004年10月～2009年10月,对34例(41髋)髋关节发育不良伴骨关节炎的成年患者进行了人工全髋关节置换术,其中女性27例32髋,男性7例9髋,平均年龄5 7岁(35～76岁)。按Crowe分型,Ⅰ型16例19髋,Ⅱ型12例14髋,Ⅲ型6例8髋,术前平均Harris评分(43.5±10.5)分。[结果]手术出血量平均350 ml(200～600 ml),输血量平均230 ml(0～600ml),引流量平均200 ml(110～450 ml),手术时间平均100 min(85～130 min),术后平均Harris评分(94.5±3.2)分,较术前有明显提高(P<0.05),优良率达95%。术后平均随访4.8年(2～7年),未发现感染、无菌性松动、假体下沉、异位骨化等并发症。[结论]对于髋关节发育不良伴骨关节炎的成年患者,全髋置换术是一种较好的治疗方法。

携带人降钙素基因相关肽基因的重组逆转录病毒的构建及鉴定

目的构建、鉴定携带人降钙素基因相关肽a（hCGRPa）的重组逆转录病毒载体pLNCX2-hCGRPa。方法采用基因工程技术，双酶切消化后回收438bp的hCGRPacDNA片段和6．1kb的pLNCX2载体片段，纯化后按摩尔比7：1混合，将降钙素基因相关肽基因片段克隆至逆转录病毒载体pLNCX2上，序列测定、对比。鉴定后用脂质体法转染PT67细胞进行病毒包装扩增，感染NIH3T3细胞，观察细胞克隆，测定病毒滴度。结果酶切、测序结果与hCGRPa基因重组逆转录病毒载体的预期结果一致，分别为6．1kb和438bp，与空载体和目的基因大小相符。包装、扩增获得病毒滴度达1．7×10^6pfu／ml，对NIH3T3细胞有较高的感染效率。结论成功构建重组逆转录病毒pLNCX2-hCGRPoL，为进一步的基因治疗研究奠定了实验基础。

保留股骨颈短柄假体在治疗晚期股骨头坏死中的应用

目的观察保留股骨颈短柄股骨假体全髋关节置换术（THA）治疗晚期股骨头坏死的短期疗效。方法2008年6月至2009年12月，采用保留股骨颈短柄股骨假体全髋关节置换术治疗晚期股骨头坏死8例（9髋），平均年龄24．1（20～36）岁。酒精性者3例（3髋），激素性者5例（6髋）。按照世界骨循环研究学会（ARCO）分期，Ⅲ-C期7髋，Ⅳ期2髋。通过Harris评分及x线片评价临床效果。结果平均随访18．1（12～30）个月，术前Harris评分平均为（42．8±8．6）（21～52）分，终末随访时平均（92．8±6．1）（80～100）分，优7髋，良2髋。X线片上髋臼和股骨无骨吸收或骨溶解，假体无松动征象。疼痛解除，无并发症发生。结论使用保留股骨颈短柄股骨假体全髋关节置换术治疗年轻患者晚期股骨头坏死的短期效果满意。

激素对人骨髓间充质干细胞凋亡及神经肽受体基因表达的影响

目的观察在激素诱导下，人骨髓问充质干细胞（hBMSCs）内降钙素基因相关肽受体（CGRPR）、P物质受体（SPR）、过氧化物酶体增殖子活化受体吖（PPARy）、成骨转录因子Runx2以及B淋巴细胞／白血病-2（bcl．2）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）等基因表达的变化。方法密度梯度离心和贴壁培养获得hBMSCs，流式细胞仪鉴定后，将传代培养的第3代细胞随机分为两组，实验组加入浓度为1×10^-7 mmol／L的地塞米松，对照组正常培养。于诱导后的第7天，实时定量-聚合酶链反应（RT．qPCR）分别测定bcl-2mRNA、Caspase-3mRNA、CGRPRmRNA、SPRmRNA、Runx2mRNA以及PPARymRNA的表达。结果分离培养的hBMSCs呈均匀-致的长梭形，排列成旋涡状或放射状。实验组Caspase-3mRNA、PPA聊mRNA较对照组明显升高，^2-△△C1值分别为5．99±2．00、6．93±0．70；而bcl-2tuRNA、CGRPRmRNA、SPRmRNA、Runx2mRNA较对照组明显降低，2^-△△C1值分别为0．20±0．5l、o．Il-t-O．02、0．28±0．08、0．13±0．2l，差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论激素能够上调hBMSCs中凋亡基因、成脂基因表达，下调抗凋亡基因、神经肽因子、成骨基因表达，促进细胞凋亡、成脂分化，抑制其成骨分化。

激素对人骨髓间充质干细胞神经肽受体mRNA表达的影响

目的观察激素对人骨髓间充质干细胞（hBMSCs）内神经肽受体降钙素基因相关肽受体（CGRPR）、P物质受体（SPR）及过氧化物酶体增殖子活化受体1（PPA脚）、成骨转录因子Runx2等基因表达的影响。方法密度梯度离心联合贴壁分选法体外分离培养hBMSCs，流式细胞仪鉴定后传至第3代，随机分为两组，实验组细胞给予1×10^-7mol／L地塞米松干预9d，对照组正常培养。观察细胞形态、生长趋势，油红O染色脂肪细胞，实时定量-聚合酶链反应（RT—qPCR）分析mRNA表达的变化。结果分离培养的贴壁细胞呈纤维状、漩涡样生长，CD29、CD44表达率为（91．4±0．7）％、（93．8±0．5）％，CD34表达率为（2．7±0．8）％。实验组细胞生长缓慢、出现大量脂肪细胞，对照组细胞增殖旺盛、未见脂肪细胞。RT—qPCR发现实验组CGRPRmRNA、SPRmRNA、Runx2mRNA的表达显著降低，2△△^Cr分别为0．10±0．03、0．16±0．04、0．23±0．05（P均〈0．01）。实验组PPARlmRNA表达量2△△^Cr是对照组的（5．08±3．37）倍，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论激素能够诱导hBMSCs成脂分化，下调细胞中CGRPRmRNA、SPRmRNA、Runx2mRNA表达，抑制细胞成骨分化与生长增殖，使骨修复能力不足，这可能与激素性骨坏死的发生机制有关。

重组人降钙素基因相关肽逆转录病毒对人骨髓间充质干细胞增殖与成骨活性的影响

目的 将重组人降钙素基因相关肽α（hCGRPα）逆转录病毒载体（pLNCX2-hCGRPα）感染人骨髓间充质干细胞（hBMSCs）,观察其对hBMSCs增殖与成骨活性的影响.方法 采用Ficoll淋巴细胞分离液梯度离心法获得自体原代hBMSCs并传代保存.将重组逆转录病毒pLNCX2-hCGRPα感染第2代hBMSCs.细胞分3组：（1）实验组：pLNCX2-hCGRPα感染hBMSCs.（2）空载体组：空载体pLNCX2感染hBMSCs；（3）正常对照组：正常培养hBMSCs,不给予特殊处理.实验7d采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blot法检测细胞内hCGRPα基因mRNA与蛋白表达,1 ～7d采用噻唑蓝（MTT）法检测细胞增殖活性,14 d检测细胞内碱性磷酸酶（ALP）活性值与培养液骨钙素含量,7d检测细胞层粘连蛋白（LN）.结果 实验组细胞中表达hCGRPα mRNA,而空载体组和正常对照组细胞不表达.与空载体组和正常对照组比较,实验组细胞表现出较高增殖率（P＜0.05）.实验组细胞ALP活性值、LN、培养液骨钙素含量分别为（119.33±11.95） U/100 mg蛋白、（12.11±1.56） μg/L、（1.123 ±0.115） μg/L,均高于空载体组[（66.16±6.82） U/100 mg蛋白、（7.32±0.98）μg/L、（0.602 ±0.097） μg/L和正常对照组[（67.73±7.31） U/100 mg蛋白、（6.46±1.41） μg/L、（0.498±0.109） μg/L],差异均有统计学意义（P＜0.05）,而空载体组和正常对照组之间差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 重组hCGRPα逆转录病毒成功转入hBMSCs,并表达hCGRPα基因而促进hBMSCs增殖和增强细胞的成骨活性.

晚期乙醇性股骨头坏死骨组织中相关基因的表达

目的 观察晚期乙醇性股骨头坏死（ONFH）坏死区骨组织细胞中相关基因的表达.方法 收集在全髋关节置换术中切除的20个股骨头,其中,10例世界骨循环研究学会（ARCO）分期Ⅲ-C、Ⅳ期乙醇性ONFH,作为实验组;10例GardenⅢ、Ⅳ型新鲜股骨颈骨折的股骨头,作为对照组.采用实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）分别测定两组坏死骨组织细胞中骨形态发生蛋白-2（BMP-2）、成骨转录因子-2（Runx-2）、过氧化物酶体增殖子活化受体-γ（PPAR-y）、护骨素（OPG）、破骨细胞分化因子（RANKL） mRNA的表达.结果 实验组细胞中BMP-2、Runx-2、PPAR-γ、OPG、RANKL mRNA表达水平均较对照组明显降低,2-△△Ct值分别为0.51 ±0.04、0.46 ±0.09、0.59±0.07、0.31 ±0.04、0.52±0.06,两组间差异均有统计学意义（P＜0.01）.结论 晚期（ARCOⅢ-C、Ⅳ期）乙醇性ONFH的骨组织坏死区很大,股骨头内残存的骨活性成分和细胞很少,其成骨与成脂基因表达均降低,股骨头已毁损,适于行人工髋关节置换术.

降钙素基因相关肽基因转染干细胞移植在兔股骨头坏死模型中的成骨基因表达

目的 观察人降钙素基因相关肽α（hCGRPα）转染骨髓间充质干细胞（BMSCs）联合自体骨移植在兔股骨头坏死（ONFH）模型中成骨基因的表达.方法 采用液氮冷冻法成功制作出家兔股骨头坏死兔.将72只ONFH模型兔随机分为3组.hCGRPα基因转染BMSCs组（A组）：将hCGRPα基因转染BMSCs移植于股骨头内;BMSCs组（B组）：植入BMSCs;无关序列组（C组）：植入干细胞为无关基因BMSCs.3组中均同时将自体骨植入股骨头.于实验第1个月末观察兔股骨头的细胞内hCGRPα和成骨基因骨钙素的表达.结果 将hCGRPα基因转染BMSCs植入股骨头1个月时,A、B、C组中hCGRPα mRNA与其蛋白的相对表达量分别为0.84±0.06、0.31±0.02、0.29±0.02与0.76±0.07、0.21±0.02、0.18±0.02.3组中骨钙素mRNA与其蛋白的相对表达量分别为0.76±0.07、0.39±0.04、0.29±0.04与0.68±0.06、0.33±0.03、0.31±0.03.A组股骨头细胞中hCGRPα基因和骨钙素基因均呈高表达,明显高于B组和C组,差异均有统计学意义（P＜0.05）.结论 hCGRPα修饰BMSCs植入ONFH动物模型股骨头中,可促进细胞中成骨因子hCGRPα和骨钙素基因的表达.

股骨头坏死发病机制的研究现状与展望

股骨头坏死(ONFH)是一种可致残的难治性疾病。近年来,国内外学者广泛深入研究非创伤性ONFH发病机制,在股骨头内微环境、基因调控等领域获得许多新进展,发现许多相关基因与信号通路,增新了科学依据,一些学说获得更多共识,如脂质代谢异常、血管内凝血、细胞成脂、凋亡自噬、骨质疏松、基因多态性等发病机制广为公认。致病因素很多,常表现为多路径相互联合或交叉作用造成ONFH,其分子机制十分奥秘,尚待继续挖掘。本文对非创伤性ONFH发病机制及部分信号通路研究现状简行总结评述,为进一步认识其发病机制与开展防治研究提供帮助。

双基因重组载体预防兔乙醇性股骨头坏死的组织病理学观察

目的观察双基因重组载体预防兔乙醇性股骨头坏死(ONFH)的组织病理学变化。方法自2018年1月至2019年6月将购自河南省实验动物中心的80只兔采用完全随机化原则分为5组:正常组(N,正常动物,空白对照)、致敏组(H,仅马血清致敏,不给予白酒)、模型组[M,马血清致敏,烈性白酒10 ml/(kg·d)灌胃]、无关序列组[Con,马血清致敏,白酒灌胃,一侧股骨头注入无关序列pGFP-V-RS转染的骨髓间充质干细胞(BMSCs)]、双基因组(S,马血清致敏,白酒灌胃,一侧股骨头内注入双基因重组载体pGFP-V-RS-siPPARγ-exCGRP转染的BMSCs)。实验第4、8周末分批处死动物,观察兔股骨头病理学改变。两样本两组间比较采用t检验;分类变量数据资料分析采用χ2检验;数值变量资料统计采用方差分析、组间比较采用最小显著性差异法(LSD)。结果实验第8周,S、H组中骨小梁面积分数分别为(40.80±3.16)、(41.20±3.65)%,与正常组[(41.80±3.63)%]比较差异无统计学意义(t=0.588、0.661,P>0.05),明显高于M组[(28.10±2.55)%]、Con组[(28.30±2.65)%],差异均有统计学意义(t=8.846、8.496、8.322、8.089,P<0.01)。S、H、N组中空骨陷窝计数分别为(13.30±1.66)、(13.10±1.63)、(12.30±1.46)%,组间比较差异均无统计学意义(t=0.243、1.279、1.273,P>0.05),明显低于M组[(39.30±3.86)%]、Con组[(39.10±3.65)%],差异均有统计学意义(t=17.502、18.397、17.686、18.397、18.505、19.282,P<0.01)。S、H组中最大脂肪细胞平均直径分别为(42.55±4.16)、(42.53±4.15)μm,与正常组[(41.36±3.85)μm]比较,差异均无统计学意义(t=0.594、0.577,P>0.05),明显低于M组[(52.31±5.26)μm]、Con组[(52.19±5.13)μm],差异均有统计学意义(t=4.116、4.128、4.129、4.141,P<0.01)。M、Con组中出现明显的早期ONFH病理学变化,股骨头软骨下骨区的造血组织显著减少,骨小梁变细稀疏、中断、结构紊乱,骨髓坏死,骨小梁面积分数降低、空骨陷窝显著增多,脂肪细胞增殖肥大,脂肪组织堆积。N组中无这些ONFH病理学改变。S、H组中病理学改变很少,骨组织结构接近于N组。8周时,M、Con组中病理学变化比4周时加重,ONFH发生率为87.5%、87.5%,而S、H、N组中为12.5%、12.5%、0%(χ2=9.833、9.833、12.444、9.833、9.833、12.444,P<0.01),差异有统计学意义。结论双基因重组载体能够高效阻止乙醇导致兔ONFH的组织病理学改变,预防乙醇性ONFH的发生,显著优于单一基因的作用。