多囊卵巢综合征患者血浆外泌体的差异蛋白质组学分析

目的 从血浆外泌体角度探索多囊卵巢综合征发病机制相关的调控蛋白。方法 选取2017年7月至2018年6月于河南省人民医院就诊的60例多囊卵巢综合征患者为PCOS组,选取同期于河南省人民医院健康体检的60名无PCOS女性为对照组,每组收集60例血浆标本。每组随机抽取3例血浆标本,利用超速离心法提取血浆外泌体,进行透射电镜和Western blot验证。通过Label-free定量蛋白组学技术对血浆外泌体进行蛋白质组学分析后,对差异大于2倍的蛋白进行生物信息学分析,挑取可能具有相互作用的差异蛋白进行ELISA验证(每组随机抽取各30例)。结果 透射电镜结果显示,提取的血浆外泌体直径分布范围为30~150 nm,纯度比较高。Western blot结果表明,CD9与CD63条带呈现明显的富集趋势。筛选出16个PCOS相关的血浆外泌体差异蛋白,包括4个表达上调和12个表达下调的蛋白。GO富集分析显示,差异蛋白主要集中在细菌防御反应、细胞外区域、免疫球蛋白受体结合活性等。STRING蛋白质相互作用分析发现,PZP/MBL2/CHFR1/HP可能存在直接的相互作用。KEGG通路分析结果显示,差异蛋白主要富集在补体和凝血级联反应信号通路。选取PZP和MBL2进行ELISA验证,与对照组相比较,PCOS组血浆外泌体中PZP表达上调,MBL2表达下调,差异有统计学意义(P<0.05)。ELISA结果均与蛋白质组学结果一致。结论 成功筛选出PCOS发病相关的差异蛋白质,PZP和MBL2有可能成为研究PCOS发病机制的新靶点。