F框WD40域蛋白7在胃癌组织的表达变化及对细胞增殖和上皮-间充质转化的影响

目的观察F框WD40域蛋白7(FBXW7)在胃癌中的表达变化及对细胞增殖和上皮-间充质转化(EMT)的影响。方法选取2016年3月到2019年3月郑州大学附属医院南阳中心医院经手术切除的154例胃癌组织和癌旁组织作为研究材料,采用蛋白质印迹法(Western blot)分析肿瘤组织和癌旁组织中FBXW7蛋白表达水平。采用慢病毒在胃癌细胞SGC-7901中构建FBXW7过表达细胞株(FBXW7组)和对照细胞株(对照组)。采用5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(EdU)和细胞计数试剂盒(CCK-8)分析两组细胞增殖水平;采用Western blot分析两组细胞EMT标记分子蛋白表达水平。采用含基质胶的Transwell分析细胞的侵袭能力。组间比较采用t检验。结果与癌旁组织FBXW7蛋白表达水平(1.32±0.23)比较,肿瘤组织中FBXW7表达水平(0.52±0.12)显著下调,差异有统计学意义(t=3.091,P<0.05)。与对照组(1.98±0.27)比较,FBXW7组细胞72 h增殖程度(1.21±0.18)显著下降,差异有统计学意义(t=2.615,P<0.05)。与对照组[(54.32±7.32)%]比较,FBXW7组细胞EdU阳性率[(20.98±4.89)%]显著下降,差异有统计学意义(t=3.111,P<0.05)。与对照组细胞E-钙黏蛋白(E-cadherin)、紧密连接蛋白-1(ZO-1)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)蛋白表达水平(0.89±0.19、1.20±0.28、1.39±0.21、1.51±0.26)比较,FBXW7组细胞E-cadherin和ZO-1表达水平(1.98±0.27、2.59±0.31)显著增加,而N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平(0.40±0.11、0.53±0.19)显著下调,差异均有统计学意义(t=2.094、2.812、2.458、2.931,P<0.05)。与对照组细胞侵袭数量[(152.69±20.14)个]比较,FBXW7组细胞侵袭数量[(81.44±12.10)个]明显下降,差异有统计学意义(t=4.259,P<0.05)。结论FBXW7在胃癌组织中呈低表达,参与了胃癌细胞的增殖和EMT。

微小RNA-127对胰腺癌细胞的抑制作用及其机制

目的探讨微小RNA（miRNA，miR）-127在体外调节胰腺癌的作用及其分子机制。方法利用实时定量反转录聚合酶链反应（RT-qPCR）方法检测各种胰腺癌细胞和胰腺癌临床样本中内源性miR-127的表达；利用慢病毒载体过表达miR-127，并将其作用于胰腺癌细胞Capan-1和PANC-1细胞中，利用细胞增殖检测方法检测细胞增殖，流式细胞仪检测细胞周期，Transwell小室方法检测细胞侵袭能力；双荧光素酶检测方法和RT-qPCR方法检测miR-127的下游靶基因，B细胞淋巴瘤/白血病-2相关基因5（BAG5）；过表达BAG5在过表达miR-127的胰腺癌Capan-1和PANC-1细胞中，随后检测其效果。结果与正常胰腺导管细胞比较，miR-127在多种胰腺癌细胞株的表达从（30.0±8.1）%～（72.0±12.3）%（P＝0.004），与周围正常胰腺组织比较，胰腺肿瘤的表达为（48.0±18.2）%（P＝0.003）；通过慢病毒感染CAPAN-1和PANC-1细胞，过表达miR-127能抑制癌症增殖（P＝0.002），细胞周期阻滞在G1期，Canpan-1细胞从（49.0±6.2）%增加到（62.0±4.3）%（P＝0.010），PANC-1细胞比例从（56.0±7.1）%增加到68±4.1%（P＝0.015）和侵袭能力的下降（P＝0.004）；胰腺癌中miR-127的下游靶基因是BAG5；过表达BAG5在Capan-1和PANC-1细胞中能逆转miR-127对癌症发展的肿瘤抑制作用（P＝0.000）。结论MiR-127可作为在胰腺癌中的肿瘤抑制因子，其功能调节的下游靶基因是BAG5。