医用镁合金元素选择的研究现状

背景:镁合金具有的天然降解性、优秀的生物相容性和良好的力学性能,已成为生物医学领域十分具有研究价值的植入材料,然而镁合金快速的降解速率限制了其进一步的发展和应用。目的:综述镁及其合金处于生理环境下降解的一般基本原理,重点从安全性及对镁及其合金性能的影响两方面介绍镁合金化元素选择的研究现状。方法:利用计算机检索中国知网、PubMed、Web of Science和Elsevier等数据库中的相关文献,以“镁(合金),铋/铝等(金属名称),腐蚀,生物相容性,金属毒性,支架/螺钉”为中文主题检索词,以“magnesium(alloy),metal name(such as:bismuth(Bi),aluminium(Al)),corrosion,biocompatibility,metal toxicity,scaffold(stent)/screw”为英文检索词进行检索,检索时限为2013-2023年,通过阅读文献内容进行筛选,最终纳入70篇文献进行结果分析。结果与结论:镁合金在医学领域的研究已相当广泛,虽然目前有一些产品已应用于临床,但镁合金在人体环境中的高降解速率仍然是临床大规模应用的主要限制,未来发展的焦点是对其腐蚀速率的控制。合金化是一种提升镁合金耐腐蚀性能的方法,并可通过不同合金成分添加来改善镁合金的各种性能,但单纯的合金化已不能满足对镁合金多元化性能的追求。为开发优异性能的多功能镁合金产品,未来需要将合金化、表面改性等多种优化方式结合来弥补各自方法的不足,同时结合合金结构更新以及制备工艺改良,共同提升镁合金的性能。

存活素和尿激酶型纤溶酶原激活剂在人胰腺癌组织中的表达意义及相关性分析

目的分析存活素(Survivin)和尿激酶型纤溶酶原激活剂(u PA)在人胰腺癌中的表达及两者之间的相关性。方法采用免疫组化PV法检测原发性胰腺癌组织(63例)及癌旁非肿瘤胰腺组织(11例)中Survivin和u PA的表达,分析两者间表达的相关性及与胰腺癌临床病理特征的关系。结果 63例胰腺癌组织中Survivin和u PA阳性率分别为69.8%(44/63)、65.1%(41/63),11例癌旁非肿瘤胰腺组织中均无表达,Survivin和u PA表达呈正相关(r=0.389,P<0.050),两者与胰腺癌TNM分期、分化程度及淋巴结转移均有关(P均<0.05)。结论 Survivin和u PA在胰腺癌组织中的表达呈正相关,两者表达上调在胰腺癌的发生、发展、侵袭和转移中起重要作用。

Runt相关转录因子3在结直肠癌组织中的表达及意义

目的探讨Runt相关转录因子3(RUNX3)在结直肠癌组织中的表达,分析其与结直肠癌患者临床病理特征及预后的关系。方法选择2017年2月至2020年6月郑州大学附属洛阳市中心医院胃肠外科收治的100例结直肠癌患者为研究对象,取患者术中留取的结直肠癌组织及距离癌组织边缘5 cm以上的癌旁组织标本,采用免疫组织化学染色法检测结直肠癌组织和癌旁组织中RUNX3蛋白的表达,蛋白免疫印迹法检测结直肠癌组织、癌旁组织及人正常结肠上皮细胞NCM460和结肠癌细胞系HCT-116、SW-480细胞中RUNX3蛋白相对表达量。采用Kaplan-Meier绘制生存率曲线,Log-rank检验和Cox回归分析癌症患者的预后影响因素。结果结直肠癌组织中RUNX3蛋白高表达率为35.0%(35/100),癌旁组织中RUNX3蛋白高表达率为74.0%(74/100);结直肠癌组织中RUNX3蛋白高表达率显著低于癌旁组织(χ^(2)=30.670,P<0.05)。结直肠癌组织中RUNX3蛋白相对表达量显著低于癌旁组织(t=2.904,P<0.05);结肠癌细胞系HCT-116和SW-480细胞中RUNX3蛋白相对表达量均显著低于正常结肠上皮细胞NCM460(t=-14.738、-8.082,P<0.05);结肠癌细胞系HCT-116中RUNX3蛋白相对表达量与SW-480细胞比较差异无统计学意义(t=0.554,P>0.05)。结直肠癌组织中RUNX3表达水平与患者淋巴结转移、远处转移及肿瘤TNM分期有关(P<0.05),与患者的性别、年龄、肿瘤直径、位置、大体分型、浸润深度及分化程度无关(P>0.05)。Kaplan-Meier生存分析结果显示,结直肠癌组织中RUNX3低表达患者生存率为60.0%(39/65),高表达患者生存率为71.4%(25/35);高表达患者生存率显著高于低表达患者(χ^(2)=4.413,P<0.05)。单因素Cox回归分析结果显示,肿瘤浸润深度、有无淋巴结转移、有无远处转移、肿瘤TNM分期及RUNX3表达水平与患者生存有关(P<0.05);多因素Cox回归分析结果显示,有无远处转移、肿瘤TNM分期及RUNX3表达水平是影响患者生存的独立危险因素(P<0.05)。结论RUNX3在结直肠癌组织中呈低表达,其与结直肠癌发生、发展及不良预后有关,可作为判定患者预后的潜在指标。

Mg-Zn-Y-Nd合金胆囊夹在兔体内的降解行为及生物相容性

目的探讨Mg-Zn-Y-Nd合金胆囊夹在兔体内的降解行为及生物相容性。方法将36只兔随机分为裸合金夹组(A组)、植酸涂层合金夹组(B组)、MAO/植酸涂层合金夹组(C组)和空白对照组(D组),每组9只。D组兔不进行手术;其余各组兔行开腹手术,取灭菌处理后的不同涂层Mg-Zn-Y-Nd合金夹夹闭选取的胆囊壁组织。观察各组兔术后一般情况;检测各组兔手术前后血清镁离子、钙离子浓度及肝肾功能;术后7、14、21 d,采用X射线衍射观察各手术组兔合金夹降解情况;术后7、14、21 d分批处死各手术组兔并取出合金夹,通过扫描电镜观察合金夹降解情况。结果术后各组兔生命体征平稳,未出现并发症。X射线衍射和扫描电镜结果显示,随着术后时间的延长,A组兔合金夹表面结构缺损最为明显;B组兔合金夹表面裂纹加深;C组兔合金夹表面仅可见轻微裂纹,结构完整。手术前后各时间点4组兔血清镁离子、钙离子浓度及肝、肾功能指标比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论Mg-Zn-Y-Nd合金夹在兔体内生物相容性良好,且生物学毒性小,安全性高。MAO/植酸涂层合金夹在兔体内降解速率明显低于裸合金夹,且其生物相容性更好。

MMP-9和uPA联合检测对胰腺癌预后的价值

目的：探讨基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、尿激酶型纤溶酶原激活剂（uPA）二者联合检测在胰腺癌预后判断中的价值。方法采用免疫组织化学二步法检测63例手术切除的原发性胰腺癌组织中MMP-9、uPA的表达，分析二者对预后的价值。结果 MMP-9与uPA的表达呈正相关（ r＝0.573， P＝0.000），MMP-9和uPA表达与胰腺癌的分化程度（r＝－0.271，P＝0.032；r＝－0.333，P＝0.008）、TNM分期（r＝－0.449，P ＝0.000；r ＝－0.430，P ＝0.000）及淋巴结转移（ r ＝0.329，P ＝0.009；r ＝0.400，P＝0.001）相关，而 MMP-9与肿瘤大小（ r ＝－0.297，P＝0.018，）及远处转移（ r＝0.320，P ＝0.011）也存在明显相关性。单因素预后分析结果显示，肿瘤大小（χ2＝8.766，P ＝0.012）、分化程度（χ2＝29.050，P＝0.000）、临床分期（χ2＝24.940，P＝0.000）、远处转移（χ2＝12.846，P＝0.000）、淋巴结转移（χ2＝15.457，P＝0.000）、MMP-9（χ2＝32.700，P＝0.000）及uPA（χ2＝41.495，P＝0.000）与预后密切相关。Kaplan-Meier法生存分析表明，MMP-9阳性表达及阴性表达患者1年累计生存率（χ2＝32.700， P＝0.000）与uPA阳性表达及阴性表达患者1年累计生存率差异均有统计学意义（χ2＝41.495，P＝0.000）；MMP-9阴性并uPA阴性组患者1年累计生存率（100%）明显高于其他组，差异有统计学意义（χ2＝54.892，P＝0.000）。多因素分析结果表明，分化程度（ RR＝2.315，P＝0.004）、临床分期（ RR＝1.694，P＝0.002）、MMP-9（RR＝0.165，P＝0.000）及uPA过表达（RR＝0.244，P＝0.007）是胰腺癌预后相关的独立影响因子。结论胰腺癌侵袭转移过程中MMP-9和uPA蛋白之间存在某种协同关系，uPA可能通过激活MMP-9加强胶原及弹性蛋白等的降解而促进胰腺癌细胞侵袭和转移，不利于胰腺癌预后。MMP-9和uPA的联合表达模式更准确反映胰腺癌的预后，可以作为分化程度、临床分期判断胰腺癌预后的有益补充。

根治性切除胰头癌患者临床病理资料与预后的关系

目的探讨根治性切除胰头癌患者的临床病理因素与预后的关系。方法回顾性分析兰州军区乌鲁木齐总医院2000年1月1日至2007年12月1日期间38例行根治性手术的原发性胰头癌患者的临床病理资料,采用SPSS 17.0软件进行统计学处理,分析临床病理特征间的相关性及其与预后的关系。结果 1本组38例胰头癌患者中有31例获得随访,随访率为81.6%,1年累积生存率为38.7%,2年累积生存率为12.9%。2 Spearman相关性分析各临床病理因素的关系发现,远处转移与肿瘤大小(rs=0.421,P=0.008)及TNM分期(rs=0.746,P=0.000)有关,淋巴结转移与TNM分期有关(rs=0.543,P=0.001),肿瘤大小也与TNM分期有关(rs=0.475,P=0.003)。3单因素分析影响胰头癌患者预后的临床病理因素结果表明,性别(P=0.045)、肿瘤大小(P=0.004)、分化程度(P=0.003)、TNM分期(P=0.000)、远处转移(P=0.002)及淋巴结转移(P=0.001)与胰头癌根治性手术后的预后有关,进一步多因素分析结果表明,TNM分期(P=0.001)、分化程度(P=0.003)及淋巴结转移(P=0.007)为胰头癌根治性手术后患者的预后影响因素。4 Kaplan-Meier法分析生存率的结果显示,中、高分化患者预后明显优于低分化患者(χ2=11.356,P=0.003);TNMⅠ+Ⅱ期患者的预后明显好于Ⅲ+Ⅳ期患者(χ2=15.970,P=0.000);无远处转移患者的预后明显好于有远处转移患者(χ2=9.248,P=0.002);无淋巴结转移患者的的预后明显好于有淋巴结转移患者(χ2=10.144,P=0.001)。结论淋巴结转移与TNM分期关系密切,而与分化程度无明显相关性;淋巴结转移、分化程度及TNM分期为胰头癌根治性手术后患者的预后影响因素。

存活素和尿激酶型纤溶酶原激活剂联合检测对胰腺癌预后判断价值

目的存活素（Survivin）和尿激酶型纤溶酶原激活剂（urokinase plasminogen activator,uPA）在胰腺癌侵袭转移过程中发挥重要作用。本研究通过联合检测Survivin和uPA在胰腺癌中的表达,探讨两者在评估胰腺癌预后的临床价值。方法选取2000-01-01-2007-12-01兰州军区乌鲁木齐军区总医院肝胆外科手术切除的63例原发性胰腺癌组织作为样本。采用免疫组化法检测Survivin和uPA蛋白在胰腺癌组织中的表达,并分析其与胰腺癌患者临床病理特征和预后的相关性。结果 Survivin和uPA蛋白与患者分化程度（χ-2=20.607,P〈0.001;χ-2=11.529,P=0.003）、TNM分期（χ-2=8.679,P=0.034;χ-2=15.166,P=0.002）及是否淋巴结转移（χ-2=5.377,P=0.020;χ-2=10.101,P=0.001）均有关。Survivin与uPA的表达呈正相关（r=0.389,P=0.002）。Kaplan-Meier生存曲线结果显示,Survivin（-）组患者1年累计生存率（86.7%）及中位生存期（21个月）均高于Survivin（＋）组患者（22.0%,9个月）,差异有统计学意义,χ-2=29.893,P〈0.001。uPA（-）组患者1年累计生存率（90.0%）及中位生存期（18个月）均高于uPA（＋）组患者（5.9%,9个月）,差异有统计学意义,χ-2=41.495,P〈0.001。Survivin（-）/uPA（-）组患者术后生存期均高于其他组,差异有统计学意义,χ-2=52.453,P〈0.001。Cox多因素分析结果表明,淋巴结转移（P=0.018）、Survivin（P〈0.001）和uPA过表达（P〈0.001）是影响胰腺癌预后的独立相关因子。结论在胰腺癌发生发展侵袭和转移过程中Survivin与uPA蛋白之间存在某种协同关系,联合检测两者的表达可能更确切反映胰腺癌的预后及作为淋巴结转移判断胰腺癌预后的补充。

肿瘤抑素相关肽T42肽的构建、纯化及其抗肝癌细胞活性

目的 采用基因工程技术成功构建出肿瘤抑素相关肽T42肽,然后用基因工程重组菌pgex-4t-t使其高效表达,并提取纯化T42肽,观察其抗肝癌细胞活性.方法 用人工合成T42基因,将其链接到pgex-4t-1表达载体中,构建表达载体pgex-4t-t42,将该质粒转化到大肠杆菌BL21（DE3）菌株中培养,采用几丁质柱亲和层析纯化T42肽.在体外对肝癌细胞进行噻唑蓝（MTT）实验,实验分4组：T42肽组、磷酸盐缓冲液（PBS）阴性对照组、氟尿嘧啶阳性对照组和空白对照组.T42肽组与氟尿嘧啶组分别加入不同浓度的肿瘤抑素T42肽和氟尿嘧啶,浓度梯度为10、20、30、40、50 mmol/L,PBS组加入等体积的PBS,比较不同浓度T42肽作用下细胞存活率的变化,观察T42肽对人肝癌HepG2细胞、LO2细胞活性的影响.结果 成功提取纯度在90％以上的T42肽,其相对分子质量与理论值基本一致.MTT实验结果显示：PBS对照组细胞的存活率为（96.86±1.12）％,T42肽组及氟尿嘧啶组的细胞存活率明显高于与PBS组,差异均有统计学意义（P＜0.01）,而T42肽组与氟尿嘧啶组间的差异无统计学意义（P＞0.05）.随着T42肽药物浓度的升高HepG2细胞的存活率逐渐下降.吖啶橙/溴化乙锭（AO/EB）荧光染色结果显示,浓度为30 mmol/L的T42肽作用48 h后,HepG2细胞出现核皱缩、胞膜受损等细胞凋亡的特征性变化.结论 T42肽可明显抑制人肝癌细胞HepG2的生长增殖,并促进其凋亡,显示出较强的抗肿瘤细胞活性.

miR-4695-5p在结直肠癌患者血清中的表达及其对结直肠癌细胞增殖和侵袭的作用机制研究

目的探讨微小RNA(microRNA)-4695-5p在结直肠癌患者血清中的表达及其对结直肠癌CACO-2细胞增殖与侵袭的影响。方法选取2018年3月—2021年11月郑州大学附属洛阳市中心医院胃肠外科收治的结直肠癌患者血清标本43例,以43例门诊体检健康者的血清为对照。采用实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测结直肠癌患者血清和体检健康者血清中的相对表达量。将miR-4695-5p过表达质粒或阴性对照质粒转染CACO-2细胞,即miR-4695-5p组和对照组,qRT-PCR验证转染效率。CCK8法及Transwell实验分别检测过表达miR-4695-5p对CACO-2细胞增殖及侵袭能力的影响。双荧光素酶报告基因实验验证miR-4695-5p与Ras相关的C3肉毒素底物1(RAC1)的靶向结合关系。qRT-PCR和Western blotting分别检测过表达miR-4695-5p对RAC1基因及Wnt/β-Catenin信号通路蛋白表达的影响。采用SPSS 28.0软件进行统计分析。正态分布的计量资料以均数±标准差(±s)表示,组间比较采用t检验,多组间比较采用方差分析。结果结直肠癌患者血清中miR-4695-5p表达水平明显低于体检健康者(P<0.01)。对照组和miR-4695-5p组中miR-4695-5p相对表达量分别为1.09±0.65和8.83±2.03,miR-4695-5p组CACO-2细胞中miR-4695-5p表达水平是对照组的8.10倍,过表达miR-4695-5p的CACO-2细胞构建成功(P<0.01)。与对照组比较,miR-4695-5p组CACO-2细胞的增殖能力明显下降(P<0.05),CACO-2细胞的侵袭能力明显降低(P<0.01)。生物信息学工具和双荧光素酶报告基因实验证实miR-4695-5p能够与RAC1靶向结合(P<0.01)。与对照组相比,miR-4695-5p组RAC1基因表达明显下降(P<0.01),Wnt/β-Catenin信号通路蛋白Wnt3a、β-catenin、c-MYC表达显著下降。结论miR-4695-5p在结直肠癌患者血清中呈低表达状态,miR-4695-5p通过靶向抑制RAC1基因表达下调Wnt/β-Catenin信号通路活性,从而抑制结直肠癌CACO-2细胞的增殖与侵袭。