miR-23a-3p靶向SMC1A调控急性髓系白血病细胞的增殖迁移和凋亡能力及其作用机制

目的探讨miR-23a-3p靶向SMC1A调控人急性髓系白血病(AML)细胞的增殖、迁移和凋亡及其作用机制。方法微阵列分析筛选人AML细胞U937中差异表达的微小RNA和信使RNA,实时荧光定量PCR法检测miR-23a-3p和SMC1A在人AML细胞U937中的表达,TargetScan数据库分析miR-23a-3p与SMC1A的相关性,双荧光素酶报告基因检测miR-23a-3p与SMC1A的相互作用,克隆形成实验检测miR-23a-3p的表达对U937细胞增殖能力的影响,细胞划痕实验检测miR-23a-3p的表达对U937细胞迁移能力的影响,流式细胞术检测miR-23a-3p的表达对U937细胞的凋亡能力、凋亡周期和caspase-3活性的影响,Western blot法检测miR-23a-3p的表达对U937细胞中Bax和Bcl-2蛋白表达的影响。结果与人正常单核细胞SC(1.00)比较,U937细胞中miR-23a-3p的表达(2.56±0.78)上调(P<0.01),SMC1A的表达(0.48±0.56)下调(P<0.01);miR-23a-3p与SMC1A 3′UTR特异性结合,调控SMC1A的表达活性。miR-23a-3p过表达促进U937细胞增殖和迁移,抑制U937细胞的凋亡;而SMC1A上调抑制U937细胞的增殖和迁移,促进了U937细胞的凋亡。阴性对照组中G0/G1期、G2/M期和S期细胞比例分别为(37.48±0.21)%、(16.78±0.18)%和(45.74±0.15)%,miR-23a-3p mimics组分别为(19.96±0.11)%、(41.69±0.24)%和(38.24±0.34)%,差异均有统计学意义(均P<0.05)。miR-23a-3p mimics+pcDNA3.1-SMC1A组中G0/G1期、G2/M期和S期细胞比例分别为(36.88±0.21)%、(30.44±0.33)%和(32.88±0.16)%,与miR-23a-3p mimics组比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。阴性对照组中Bax和Bcl-2蛋白的相对表达水平分别为0.55±0.45和0.31±0.54,miR-23a-3p过表达抑制U937细胞中Bax蛋白的表达(0.23±0.13,P<0.001),促进Bcl-2蛋白的表达(0.50±0.23,P<0.01),而SMC1A上调促进U937细胞中Bax蛋白的表达(0.40±0.11,P<0.01),抑制Bcl-2蛋白的表达(0.37±0.15)。阴性对照组中caspase-3的活性为(25.82±0.89)%,miR-23a-3p过表达抑制U937细胞中caspase-3的活性[(3.64±0.56)%,P<0.01],而SMC1A上调促进U937细胞中caspase-3的活性[(15.29±0.85)%,P<0.01]。结论miR-23a-3p通过靶向SMC1A抑制人AML细胞的增殖和迁移,促进其凋亡。