肿瘤免疫检查点抑制剂联合过继性细胞免疫治疗研究进展

免疫检查点抑制剂的应用为肿瘤临床治疗提供了新方法,然而,仍有大量患者难以从免疫检查点抑制剂治疗中获益。在免疫检查点抑制剂的基础上探索新的联合治疗方案是当前肿瘤治疗的一大热点,其中,过继性细胞免疫治疗是联合免疫检查点抑制剂治疗肿瘤的重要选择。本文对肿瘤免疫检查点抑制剂联合过继性细胞免疫治疗的最新研究进展进行综述。

胸腔镜肺切除手术,单孔是否较多孔更微创?

随着科技的发展，“微创”这一概念已深入到外科手术的各种领域，其主要优势就是在减少手术损伤的同时实现更好的治疗效果。而手术创伤主要有三个来源，一是切口创伤，二是脏器损伤，三是全身系统性影响。

PD-S15融合蛋白体外特异性靶向PD-1分子并快速扩增NK/T细胞

目的:探讨anti-PD-1(scFv)/IL-15/IL-15Rα-sushi(简称PD-S15)融合蛋白体外特异性结合PD-1的能力及其对NK/T细胞增殖能力的影响。方法:化学合成人anti-PD-1(scFv)基因和人IL-15/IL-15Rα-sushi融合基因,经过酶切连接构建重组表达质粒pUC57-PD-S15,用Lipofectamine^(TM)2000瞬时转染HEK293T细胞,收获细胞培养液上清,用Wb法检测细胞培养液上清中PDS15融合蛋白的表达;用不同配比的PD-S15/X-VIVO^(TM)15培养液对PBMC和TIL分别诱导培养后,用流式细胞术检测PD-S15融合蛋白体外特异性结合PD-1的能力和对PBMC增殖及CD3^+CD8^+、CD3^+CD4^+、CD3^-CD56^+各细胞亚群比例的影响;用细胞计数法检测PD-S15融合蛋白对TIL增殖能力的影响。结果:pUC57-PD-S15表达质粒经双酶切和测序验证构建成功并成功转染HEK293T细胞,目标蛋白相对分子质量大约为55 000,符合预期。PD-S15融合蛋白体外具有PD-1特异性结合能力(P<0.05)及NK/T细胞活化增殖能力(P<0.05);与经典TIL培养方案相比,PD-S15培养方案体外活化扩增T细胞的能力更强(P<0.01)。结论:PD-S15融合蛋白体外能够特异性靶向PD-1分子并快速扩增NK/T细胞,为后续从肿瘤组织内或外周血中选择性扩增CD8^+PD-1^+抗原特异性T细胞奠定了基础。

Claudin-2蛋白在食管鳞癌组织中的表达及其对KYSE-450细胞恶性生物学行为的影响

目的:分析Claudin-2蛋白在食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinomas,ESCC)组织中的表达及其与患者临床病理特征、5年生存率的关系,探索其对ESCC细胞KYSE450的增殖、迁移和侵袭的影响。方法:选取河南省肿瘤医院2010至2013年间初治的ESCC患者手术切除肿瘤组织52例及其中20例对应的癌旁组织标本,采用免疫组化和WB法检测Claudin-2的表达并分析其与患者临床病理特征和5年生存率的关系。WB法检测ESCC细胞(KYSE450、KYSE150、KYSE510、KYSE140)和人永生化食管上皮细胞SHEE中Claudin-2的表达,构建Claudin-2 shRNA慢病毒载体并转染KYSE450细胞构建敲低Claudin-2表达的细胞系,进一步通过克隆形成实验、细胞划痕实验及Transwell实验检测敲低Claudin-2对KYSE450细胞增殖、迁移和侵袭的影响。结果:ESCC组织中Claudin-2阳性率显著高于癌旁组织(P<0.05),ESCC组织中Claudin-2的表达与淋巴结转移有关(P<0.05)。Claudin-2表达阳性患者5年生存率显著低于阴性者(P<0.05)。成功构建敲低Claudin-2表达的KYSE450细胞系。sh-Claudin-2组细胞的克隆形成数、伤口愈合率和侵袭细胞数均显著低于sh-NT组和对照组(P<0.05)。结论:ESCC组织中Claudin-2的表达高于癌旁组织,且与患者5年生存率呈负相关,Claudin-2能够增强KYSE450细胞的增殖、迁移和侵袭能力。

miR-1228-5p在原发性肝细胞癌组织和血清中的表达及意义

目的:探讨mi R-1228-5p在原发性肝细胞癌组织和血清中的表达及意义。方法:采用mi RNA快速提取试剂盒分别抽取患者和健康体检者血清中的总mi RNA及患者肝癌组织和癌旁正常肝组织中的总mi RNA,采用实时荧光定量PCR检测总mi RNA中mi R-1228-5p的相对表达量;分析mi R-1228-5p的相对表达量与患者年龄、性别、家族史、肿瘤最大径和临床分期的相关性;此外,用ROC曲线下面积分析mi R-1228-5p在原发性肝细胞癌和健康人群中的诊断价值。结果:原发性肝细胞癌患者血清中mi R-1228-5P的表达量明显高于健康体检者(P<0.05),并且mi R-1228-5P在原发性肝细胞癌组织中的表达量明显高于其癌旁正常肝组织(P<0.05);mi R-1228-5p表达水平与患者的年龄、性别及家族史无关(P>0.05),而与患者的肿瘤最大径和临床分期有关(P<0.05);mi R-1228-5p鉴别原发性肝细胞癌与健康人群中的敏感度和特异度分别为71%和93%。结论:mi R-1228-5p在肝癌患者中的表达水平高于健康人群,且其在肝癌组织中的表达水平高于癌旁正常肝组织。mi R-1228-5p的表达水平与患者的肿瘤最大径和临床分期相关。此外,mi R-1228-5p具有诊断原发性肝细胞癌的潜在价值。

AJCC/UICC第八版食管及食管胃交界部癌TNM分期解读及中文版主要内容

国际抗癌联盟（UICC）和美国癌症联合会（AJCC）联合发布的第八版食管及食管胃交界部癌TNM分期已经出版,即将施行。一直以来,TNM分期系统在食管及食管胃交界部癌的诊断、治疗及预后的判断中起着重要的作用。新版的TNM分期在原第七版分期的基础上做出了较大改进,但仍存在着一些不足。本文将对这些改进及不足之处进行深入讨论。

日本2015食管癌诊治指南解读:胸段食管癌的外科治疗

日本食管协会2014年底在线发表了食管癌诊治指南，兹将外科部分做一解读。 食管癌治疗策略的制定，需要参考肿瘤位置、病变长度、浸润深度、有无转移、患者身体状况、医疗单位的条件等。有许多治疗选择可以应用。一些治疗措施已经被模式化，并被用于日常临床实践中。还有一些治疗措施尚处于临床研究阶段，需要积累更多经验。

日本食管协会(JES)第11版食管癌TNM分期简介

准确的分期是选择治疗方法和判断预后最重要的影响因素,堪称肿瘤治疗的中心环节。TNM分期系统是目前国际上最为通用的肿瘤分期系统。由于日本食管协会（Japan Esophagus Society,JES）关于食管癌的分期系统对食管癌的手术方式和切除范围的确定有重要的指导价值,因此食管癌学界一直存在国际抗癌联盟/美国癌症联合会（UICC/AJCC）的TNM分期系统与JES的分期系统长期并存的复杂局面。

日本2015食管癌诊治指南解读:食管癌的新辅助治疗和辅助治疗

日本食管协会2014年底在线发表了食管癌诊治指南[1],兹将术前新辅助治疗和术后辅助治疗部分做一解读。1食管癌的术前新辅助治疗1.1概述在可切除的Ⅱ或Ⅲ期胸段食管癌,新辅助治疗联合手术已经被用来和单纯手术比较或和术后辅助治疗作比较,新辅助治疗对Ⅰ期食管癌的价值尚未有评价。

抗人类表皮生长因子受体2/表皮生长因子受体双特异性抗体对人胰腺癌细胞PANC-1的靶向治疗

目的 通过同时靶向人类表皮生长因子受体-2（Her-2）和表皮生长因子受体（EGFR）分子的双特异性抗体抑制人胰腺癌细胞PANC-1体内外增殖.方法 通过基因合成获得曲妥珠单抗和西妥昔单抗的基因序列,经重叠聚合酶链反应（PCR）融合成目的基因,构建入表达载体,转化进毕赤酵母X-33进行表达,获得同时靶向Her-2和EGFR的双特异性抗体CT-BiAb;流式检测CT-BiAb 对胰腺癌细胞系PANC-1的结合能力;MTT法检测CT-BiAb对PANC-1细胞的增殖抑制;通过流式双染法检测给药后PANC-1细胞的凋亡率;建立PANC-1荷瘤小鼠动物模型,检测CT-BiAb的体内抗肿瘤活性.结果 通过毕赤酵母表达及纯化,获得CT-BiAb,经Western blot鉴定验证了CT-BiAb 表达及装配正确.流式细胞术检测CT-BiAb与PANC-1的结合率为50.9%.细胞增殖抑制实验,与PBS组相比,亲本抗体组与CT-BiAb组对PANC-1均有抑制作用,且抑制作用呈浓度依赖性.凋亡实验,CT-BiAb组PANC-1细胞凋亡率[（33.50±7.14）%]高于亲本曲妥珠单抗[（15.86±4.32）%,P=0.022],也高于西妥昔单抗组[（18.64±5.71）%,P=0.048].移植瘤模型实验,CT-BiAb 高剂量组肿瘤抑制率可以达到（73.76±10.21）%,明显优于亲本曲妥珠单抗[（32.55±14.42）%,P=0.001],也明显优于西妥昔单抗组[（52.63±8.47）%,P=0.006].结论 本文构建了CT-BiAb,其具有良好的体内外抗肿瘤活性,有效地抑制PANC-1的体内外增殖,为抗肿瘤治疗提供了新的思路.

阻断转化生长因子β信号通路对树突细胞抗原递呈功能影响的研究

目的 研究阻断Smad信号是否能阻断树突细胞（DC）内的转化生长因子（TGF）β信号通路,及逆转TGF β对DC的免疫抑制作用.方法 用重组腺病毒载体将Smad7基因导入DC,并设对照组、DC＋TGF β组和转染空载体组DC,测定各组DC成熟相关表型的表达、刺激异基因淋巴细胞增殖的能力和诱导的细胞毒T淋巴细胞（CTL）杀伤活性.结果 在存在外源性TGFβ1的情况下,DC-Smad7组仍能高表达成熟相关黏附分子；刺激异基因淋巴细胞增殖的能力显著高于空载体组,差异有统计学意义（P＜0.01）；经小鼠Lewis肺癌细胞株L3-8可溶性抗原冲击致敏后免疫小鼠,得到的脾脏淋巴细胞在效靶比为25∶1、50∶1、100∶1时,CTL杀伤活性分别为21％、41％、59％,显著高于空载体组的15％、21％、34％,差异有统计学意义（均P＜0.01）.结论 阻断Smad信号可阻断TGFβ信号通路,逆转TGF

先断阴道后处理子宫旁组织联合骶前间隙入路行保留肛门的后盆腔脏器切除临床疗效

后盆腔联合脏器切除术多针对来源于直肠或妇科生殖系统的肿瘤，因肿瘤同时侵犯直肠及女性生殖器官，为确保肿瘤根治性切除．术中遂将肿瘤及受侵脏器一并切除。当肿瘤体积较大。且与直肠及女性生殖器官融为一体时，如果将子宫阴道与直肠强行分离并分别切除，将会导致肿瘤破裂、癌细胞种植扩散，影响患者的预后生存。如何保证肿瘤切除的完整性及避免术中两侧输尿管和盆壁血管损伤，成为手术操作进程的难题。我们利用先断阴道后处理子宫间隙联合骶前间隙入路行保留肛门后盆腔脏器切除，能有效降低手术难度，提高肿瘤切除率，缩短手术时间，避免损伤输尿管，现报道如下。

超声内镜对T2期食管癌术前T分期的诊断价值及影响因素

目的探讨术前超声内镜(endoscopic ultrasonography,EUS)对T2期食管癌(esophageal carcinoma,EC)的诊断价值及影响因素。方法回顾性分析我院2015年3月至2016年1月206例EC手术患者术前EUS的检查结果和术后的病理资料,选取未经术前辅助放化疗治疗且术后病理分期为T2期的81例EC患者纳入本研究,其中男59例、女22例,平均年龄63.9岁,中位年龄63.0岁。将EUS检查T分期(c T)与术后病理T分期(p T)进行比较,采用独立样本卡方检验对纳入患者的性别,年龄,肿瘤位置,肿瘤形态,术后病理分化程度,组织学分型,淋巴结转移及术后病理TNM分期等因素进行比较,分析这些因素对T2分期诊断价值的影响。结果 EUS对病理T2期EC术前T分期准确率为61.7%,过高分期率为38.3%。EUS准确分期组与过高分期组在术后病理TNM分期上差异有统计学意义(P=0.023),术后病理TNM分期在过高T分期组较高;而性别,年龄,肿瘤位置,肿瘤形态,术后病理分化程度,组织学分型和淋巴结转移两组差异无统计学意义。结论 EUS对T2期EC术前T分期有过高的分期率,术后病理TNM分期可能是EUS对T2期EC术前过高T分期的一个影响因素。