LINC00174对多发性骨髓瘤恶性增殖的影响及其相关作用机制研究

目的:探讨LINC00174在多发性骨髓瘤(MM)中的生物学功能。方法:实时荧光定量聚合酶链反应(RT-q PCR)检测MM患者外周血和MM细胞系中LINC00174、mi R-150的表达。Ed U染色和流式细胞术检测LINC00174和mi R-150对MM细胞U266增殖和凋亡的影响。Western blot检测细胞中增殖标志物细胞核相关抗原Ki67、凋亡相关蛋白cleaved caspase-3以及叉头框转录因子P1(FOXP1)蛋白的表达。利用生物信息学、双荧光素酶报告基因实验来验证LINC00174和mi R-150之间的靶向关系以及mi R-150和FOXP1之间的靶向关系。结果:LINC00174水平在MM患者外周血和MM细胞系中显著升高(P<0.05)。与NC-si RNA组比较,LINC00174-si RNA组中LINC00174的表达显著降低,U266细胞增殖减少,细胞凋亡率显著升高,Ki67蛋白水平降低,cleaved caspase-3蛋白水平升高(均P<0.05)。LINC00174靶向调控mi R-150的表达:与LINC00174-si RNA+NC inhibitor组比较,LINC00174-si RNA+mi R-150 inhibitor组U266细胞中mi R-150的表达显著降低,细胞增殖能力增强,细胞凋亡率降低,Ki67蛋白水平升高,cleaved caspase-3水平降低(均P<0.05)。FOXP1是mi R-150的靶基因:与NC mimic组比较,mi R-150 mimic组细胞中的FOXP1蛋白表达显著降低,细胞增殖减少,细胞凋亡率显著升高,Ki67蛋白水平降低,cleaved caspase-3水平升高;与mi R-150 mimic+Vector组比较,mi R-150 mimic+pc DNA-FOXP1组细胞中FOXP1蛋白的表达显著升高,细胞增殖能力增强,细胞凋亡率降低,Ki67蛋白水平升高,cleaved caspase-3水平降低(均P<0.05)。结论:LINC00174通过调控mi R-150/FOXP1轴促进多发性骨髓瘤细胞增殖,抑制细胞凋亡。

香菇多糖对甲状腺癌荷瘤小鼠肿瘤生长抑制作用研究

目的研究香菇多糖对甲状腺癌荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用及对Wntβ-catenin信号通路的调控。方法C57BL/6小鼠随机分为模型组、实验组和对照组,每组15只,各组小鼠均于背部注射甲状腺癌TT细胞悬液0.1 m L,肿瘤体积长至80 mm3时进行相关实验。实验组和对照组分别给予尾静脉注射香菇多糖(20 mg·kg^-1)、阿霉素(20 mg·kg^-1),模型组尾静脉注射0.9%Na Cl 100μL,每2 d药物干预1次,均连续干预20 d。计算肿瘤体积比,统计小鼠存活时间,以MTT实验检测小鼠脾T、B淋巴细胞增殖水平,以蛋白质印迹(WB)法检测甲状腺癌荷瘤小鼠中肿瘤组织中Wnt/β-catenin信号通路蛋白表达情况。结果干预后21 d,模型组、实验组和对照组小鼠肿瘤体积比分别为23.05±4.26,16.45±2.39,12.36±3.09,中位存活时间分别为23.46,36.05,39.52 d,脾指数(SI)分别为(4.65±1.13),(5.96±1.02),(3.54±1.05)mg·g^-1,T细胞增殖活性分别为0.46±0.04,0.63±0.14,0.39±0.02,B细胞增殖活性分别为0.43±0.07,0.58±0.03,0.34±0.04,WB检测显示,模型组、实验组和对照组小鼠肿瘤组织中β-catenin蛋白相对表达量分别为1.53±0.26,0.63±0.12,0.58±0.09;c-Myc蛋白相对表达量分别为0.96±0.08,0.39±0.05,0.33±0.06,Axin2分别为1.06±0.10,0.46±0.08,0.23±0.09,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论香菇多糖通过调控Wnt/β-catenin信号通路抑制甲状腺癌荷瘤小鼠肿瘤生长,同时改善了小鼠的免疫功能。