内质网应激通过JNK-c-Jun通路调节人乳腺癌细胞生长、自噬和凋亡的分子机制

目的探讨内质网应激通过抑制JNK-c-Jun通路诱导人乳腺癌细胞自噬和凋亡的机制。方法将不同浓度衣霉素不同时间作用于人乳腺癌细胞,确定最佳作用浓度。细胞分组为内质网激活组、内质网激活+SP600125(JNK抑制剂)组、对照组(未做任何处理的常规培养细胞)。使用四甲基偶氮唑蓝法、单丹磺酰尸胺法和流式细胞术分别检测细胞存活、自噬、凋亡;用Western blot分析内质网应激相关蛋白GRP78、CHOP,JNK-c-Jun信号通路相关蛋白JNK、c-Jun,自噬相关蛋白Beclin1,及凋亡相关蛋白Bax、Caspase-3、Caspase-12的表达水平。结果衣霉素对人乳腺癌细胞的最佳作用浓度为100 ng/ml,作用时间为72 h。在此作用条件下,内质网激活相关因子GRP78和CHOP的表达水平较处理前增加(P均<0.05)。与内质网激活+SP600125组和对照组比较,内质网激活组JNK和c-Jun表达水平均上升(P均<0.05)。对照组与内质网激活+SP600125组比较,内质网激活组细胞生长活性明显受到抑制,MDC荧光强度值及细胞凋亡率均增加(P均<0.05)。同时,与内质网激活+SP600125组和对照组比较,内质网激活组中凋亡关键因子Bax、Caspase-3、Caspase-12被激活表达水平均升高(P均<0.05)。结论内质网应激可能通过激活JNK-c-Jun信号通路,降低乳腺癌细胞存活率,进而诱导乳腺癌细胞自噬并促进细胞凋亡。