综合性机能实验室建设与管理探索

传统的实验教学模式的弊端日趋凸现，建设综合性实验室是高校实验教学改革的一项重要内容。经过近些年组建综合性机能实验室的实践，从实验室管理模式、规划建设、实验项目确立与教学过程管理、仪器设备管理、化学药品管理等几个方面做了些有益的探索，对实验教学逐步适应现代医学教育的需要发挥了积极的作用。

机能实验室仪器设备的管理探讨

医学院校综合性机能实验室仪器设备的管理与维护是实验室管理的重要内容之一,管理与维护的好坏程度将直接影响实验教学质量和办学效益.从仪器设备的购置计划、验收、管理、使用、维修、功能扩充等几个方面谈了科学规范化管理仪器设备的粗浅体会,以及新形势下仪器设备网络化管理的思路.

医学机能实验教学改革的初步尝试

更新教学观念，优化精简医学机能实验教学内容，有利于培养学生科学观察、分析解决问题的能力和创新精神；加强实验师资队伍建设，有利于提高实验教学质量。

机能实验教学改革实践与思考

该文介绍了学校机能实验教学改革所取得的成果,讨论了在改革中所领悟到的问题,探讨这些问题将有益于进一步深化教学改革。

机能实验教学与管理探讨

医学实验教学的目的在于通过循序渐进的实验教学来验证和巩固学生所学的理论知识，培养学生实事求是、严谨的科学态度和科学的思维方法。而先进的管理方法又能优化实验教学资源、提高教师的业务水平并进一步提高实验教学效率，两者相得益彰，将其有机地结合在一起会起到事半功倍的效果。我们在实际工作中如何把握好这一主题，其关键在于有一整套完备合理的实验教学方法与管理方法。笔者经几年的实验教学工作实践总结出以下几点经验，仅与同行商榷。

发挥生物机能实验系统作用提高机能实验教学效果

高校实验室是培养高素质创新人才的重要场所,对培养学生的科学思维、实践能力和创新精神有着不可替代的作用。在现代电子技术和计算机技术快速发展的今天,实验仪器的微机化、数字化是仪器的发展趋势。

多媒体在机能实验教学中的应用

拓展新的机能实验教学思路和方法，利用新组建的开放实验室开展学生科研，培养学生的科研意识和科研设计能力。开发多媒体机能学综合实验室实验教学管理系统并应用于机能实验教学，取得了较好的教学效果。

基于BL-410生物机能实验系统改进前后负荷对心脏功能影响实验

目的:改进前、后负荷对心输出量影响的实验方法。方法:制备蟾蜍离体在位心脏标本,用BL-410生物机能实验系统,记录分析前、后负荷改变对正常、心衰的心脏功能的影响以及异丙肾上腺素纠正心衰的作用。结果:能同步实时显示心输出量、心肌收缩力、心率、前负荷、后负荷、心电图等指标,结果符合心泵功能的自身调节机制和心肌内在收缩机制的规律。结论:该本实验方法直观性强,且结果更具客观性。有利于培养学生掌握和运用现代化实验技术和方法的能力、多学科知识综合运用能力。

蟾蜍高钾血症动物模型实验方法的研究

目的利用在体蟾蜍心脏建立模拟高钾血症(hyperkalemia)动物模型,观察高血钾对蟾蜍Ⅱ导联心电图(electrocardio-graph,ECGⅡ)及心室肌单向动作电位(monophasic action potential,MAP)的影响。方法本实验经咽淋巴囊注射10%氯化钾(KCl)使蟾蜍心肌细胞外液中钾含量急剧升高,同步记录MAP和ECGⅡ。结果注射10%KCl10min后MAP的二相(坪)动作电位时程延长,心率减慢,ECG显示P-R间期延长,QRS波群增宽变低,T波明显高尖,部分动物T波变低或消失。与给药前相比各记录指标差异显著(P<0.05)。结论咽淋巴囊注射10%KCl可致蟾蜍急性高钾血症且ECG改变与哺乳动物高钾血症有相似之处。

微机实验系统记录分析前后负荷对心脏功能影响的综合实验研究

目的改进前、后负荷对心输出量影响的实验方法,形成综合性实验。方法制备蟾蜍离体在位心脏标本,用BL-410生物机能实验系统,记录分析前、后负荷改变对正常、心衰的心脏功能的影响以及异丙肾上腺素纠正心衰的作用。结果能同步实时显示心输出量、心肌收缩力、心率、前负荷、后负荷、心电图等指标,结果符合心泵功能的自身调节机制和心肌内在收缩机制的规律。结论本实验方法直观性强,且结果更具客观性。有利于培养学生掌握和运用现代化实验技术和方法的能力、多学科知识综合运用能力。

不同原因致家兔实验性肺水肿动物模型的对比研究

目的寻找一种能较好符合临床肺水肿病理生理特征的实验性肺水肿动物模型。方法 28只家兔随机分为油酸组、肾上腺素组、切断颈部两侧迷走神经组及生理盐水(NS)组,每组7只。测量家兔动脉血氧分压(PaO2)、动脉血二氧化碳分压(PaCO2)、肺泡-动脉氧分压差值(A-aPO2)、心率、呼吸频率、肺系数及死亡时间。结果油酸复制肺水肿动物模型中PaO2、PaCO2、A-aPO2、心率、呼吸频率、肺系数指标明显优于其他组,而死亡时间则低于肾上腺素复制模型。结论油酸复制肺水肿动物模型更接近真实的临床肺水肿,在实验性肺水肿动物模型中可考虑首选方案。

硝苯吡啶与维生素K_3对家兔输尿管动作电位和尿流量影响的实验研究

目的:探讨硝苯吡啶与维生素K3对输尿管动作电位和尿流量的影响。方法:采用在体电活动记录观察实验前后输尿管平滑肌动作电位变化及尿流量变化。结果:硝苯吡啶与维生素K3均能显著降低输尿管电活动的频率,而对尿量的影响两药则有相反作用,维生素K3可使尿流量增加,而硝苯吡啶使尿流量减少。结论:硝苯吡啶与维生素K3对兔输尿管平滑肌有明显的舒张作用,而这些有助于输尿管结石的排出。

川芎嗪对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的影响

目的观察川芎嗪对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的影响。方法大鼠随机分为假手术组(Sham)、缺血再灌注组(IR)、川芎嗪组(TMP)。采用经大鼠右侧翼腭动脉线栓Willis环30min后再灌注的方法,建立大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的动物模型。动态观测局部脑血流(rCBF)及脑电图(EEG)的变化。测定血清丙二醛(MDA)、ATP酶(ATPase)、内源性超氧化物歧化酶(SOD)含量。结果与缺血再灌注组相比,川芎嗪组异常增高的MDA显著降低(P<0.05),血清和脑组织中SOD含量增加,ATP酶活性提高(P<0.05);川芎嗪组脑血流量(rCBF)提高,脑电图恢复至正常水平时程缩短。结论川芎嗪对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠有保护作用,其作用机制可能是减少大鼠局灶性脑缺血再灌注脂质过氧化、清除氧自由基、扩血管等作用。

腹主动脉狭窄致左室肥厚动物模型制备

目的 腹主动脉环扎缩窄术建立左室肥厚 (LVH)动物模型。方法 于大鼠左肾上 0 .5cm处行腹主动脉环扎缩窄术造成心脏后负荷增加 ,术后 8周称全心重 (HW )、左室重 (LVW )、计算全心重 体重 (HW BW )及左室重 体重 (LVW BW )。测定心肌丙二醛 (MDA )及血清乳酸脱氢酶 (LDH )、肌酸激酶 (CPK)的含量 ,并以此作为判断模型是否建立的指标。结果 模型组大鼠心肌重量指数 (HW、LVW、HW BW、LVW BW )及心肌MDA含量、血清CPK、LDH活性均明显高于伪手术组 (P<0 .0 1)。结论 腹主动脉环扎缩窄术可成功建立大鼠LVH动物模型。

hSDF-1α/CXCR4介导骨髓源间充质干细胞迁移的信号转导

目的:利用Boyden chamber体外迁移体系初步探索基质细胞衍生因子-1(SDF-1)在骨髓源间充质干细胞(MSC)迁移中的作用及其信号转导机制.方法:采用经典的全骨髓贴壁法培养MSC,通过成骨、成脂肪等多向诱导分化以及流式细胞仪分析其表面标记(CD133,CD34,CD90,CD105)等鉴定MSC特征;以P3-MSC为实验材料,利用Boyden chamber体外迁移体系,观察不同浓度的hSDF-1对MSC迁移的影响,以50nmol渥曼青霉素,10mmol LY294002,50mmol PD98059,10mmol U73122,0.1g/L AMD3100等不同处理P3-MSC,观察最适宜浓度的hSDF-1对MSC迁移影响的信号转导机制.结果:培养的MSC呈现出CD90,CD105强阳性,具有成骨、成脂肪等多向分化能力;MSC体外迁移能力随着hSDF-1α浓度(1,10,100,500μg/L)的递增而逐渐增强,并且hSDF-1α浓度在100μg/L时,MSC迁移到滤膜上的细胞数接近于峰值;渥曼青霉素,LY294002,PD98059,U70312,AMD3100,维拉帕米对MSC迁移均有影响,其中U73122,AMD3100对MSC迁移阻断的效应最显著.结论:SDF-1/CXCR4所介导的MSC迁移与丝裂原活化蛋白激酶(MAPK),磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C和蛋白激酶C(PKC)等信号途径有关,且PKC途径可能处于中心环节.

吡咯喹啉醌对D-半乳糖致衰老大鼠学习记忆能力的影响

目的观察吡咯喹啉醌(PQQ)对D半乳糖致衰老大鼠学习记忆的影响。方法用大剂量D半乳糖致大鼠脑老化模型,侧脑室注射PQQ,8周后用水迷宫仪观察大鼠学习记忆能力,并检测各实验组脑组织自由基、SOD、脂竭素、胆碱乙酰基转移酶(CHAT)的含量。结果经PQQ处理后大鼠学习找平台所需的次数[(3.90±1.20)s]和找平台所需的时间[(53.88±18.58)s]显著短于D半乳糖处理组[(5.90±1.20)s,(74.42±21.74)s,P<0.05];PQQ处理组鼠在平台所在处搜索的时间显著长于D半乳糖处理组;PQQ能显著降低由D半乳糖引起的自由基和脂竭素的增加,提高SOD和CHAT(D半乳糖组:242.22nmol·mgpro-1;PQQ处理组:268.43nmol·mgpro-1)的活力。结论PQQ能降低衰老鼠自由基的产生,增加其学习记忆的能力。

吡咯喹啉醌对NMDA诱发大鼠海马神经元损伤的影响

目的探讨吡咯喹啉醌(PQQ)对N甲基D天冬氨酸(NMDA)诱发海马神经元损伤的影响。方法体外原代培养新生大鼠海马神经元,毒性剂量的NMDA诱致海马神经元损伤,预加PQQ,镜下观察神经元的形态变化,琼脂糖凝胶电泳观察细胞的死亡情况,激光共聚焦显微镜观察细胞内Ca2+浓度的变化。结果体外培养8d的海马神经用0.1mmol/LNMDA处理后,细胞内Ca2+快速增加,细胞以坏死和凋亡两种形式死亡,细胞的存活率降低;预先给予PQQ可明显减少细胞内Ca2+的增加,减少细胞死亡。结论PQQ对NMDA诱发的海马神经元损伤具有保护作用。

线刺法蛛网膜下腔出血动物模型制备

[目的 ]线刺法建立可真实模拟蛛网膜下腔出血 (SAH )的动物模型。 [方法 ]大鼠经右侧翼腭动脉线刺法刺破Willis环的血管分叉处 ,造成Willis环血管破裂出血后动态观测局部脑血流(rCBF)及脑电图 (EEG)的变化。 [结果 ]蛛网膜下腔出血 (SAH )后rCBF及EEG幅度急剧下降 ,分别下降为 4 0 .5 %和 6 8.6 % ,30minSAH组rCBF下降幅度最大 (6 2 .3% ) ,EEG 1 5min下降幅度最大 (89.5 % )。rCBF下降持续 4 8h ,颅底解剖学检查发现Willis环的血管分叉处有陈旧性出血。 [结论

红花甙对小鼠脑缺血再灌注后记忆行为的影响

目的观察红花甙对小鼠脑缺血后记忆行为的影响。方法用昆明系小鼠夹闭双侧颈总动脉,脑缺血15min后建立再灌注模型。按组分别腹腔注射红花甙2mg·kg-1·d-1,尼莫地平2mg·kg-1·d-1及对照组生理盐水10ml·kg-1·d-1。人工常规饲养1周后,检测开场行为、回避反应和水迷宫试验以观察小鼠记忆行为的改变。结果红花甙组首次检测结果与24h后再次检测结果比较均有显著差异,而对照组则均无显著改变。红花甙组首次检测结果与24h后再次检测结果比较均有显著差异,而对照组则均无显著改变。结论结果表明脑缺血再灌注损伤可导致记忆障碍,红花甙对小鼠脑缺血后的记忆保持有较好的改善作用。