HIV TAT——一种生物大分子的运载体

人工合成编码TAT蛋白转导区核心区域11个氨基酸的双链寡核苷酸,构建pET28a-TAT-LacZ表达子,转化大肠杆菌,得到高表达的TAT-β-Gal融合蛋白。TAT-β-Gal加入体外培养的平滑肌细胞中,15min细胞即出现蓝染,1h TAT-β-Gal 100％进入细胞。该融合蛋白ip到Wistar大鼠体内,30min各组织出现蓝染,4h光密度值达高峰。实验证明TAT蛋白可有效携带大分子物质穿过生物膜,是一良好的生物大分子运载体。

不同胎龄人脐血管的生物力学特性及其临床意义

为人脐血管的临床应用从生物力学性质上提供理论依据。采用胎龄在 2 4～ 4 2周流产及自然分娩正常胎儿脐动脉和脐静脉 5 0例 ,测定其压力 -容积关系 ,并求出其顺应性。发现脐动脉和脐静脉的 P- V曲线可用抛物线来拟合。获得了脐动脉和脐静脉顺应性随胎龄增加而增大 ,但 3 9周以后又降低的变化规律。脐静脉顺应性是脐动脉的 2～ 3倍。人脐动脉和脐静脉是动脉移植物的良好替代材料 ,在移植时除了考虑脐血管与宿主动脉顺应性相匹配外 ,还应注意其顺应性与胎龄的关系 ,建议选用胎龄在 3 7～ 4 0周之间的脐动脉和脐静脉作为移植材料。

TAT-β-半乳糖苷酶对小鼠生物膜穿透性的研究

为寻找介导外源蛋白质进入组织细胞的生物学方法 ,本研究构建了pET2 8a TAT LacZ重组表达子 ,纯化得到TAT β Gal融合蛋白 ,通过腹腔注射到小鼠体内观察TAT β Gal能否穿过各组织生物膜及达到各组织的时间、浓度。结果发现TAT β Gal在短时间内可到达各组织。该研究证明在生物大分子的N 末端加上TAT具有穿透力的蛋白转导区肽段形成的融合蛋白可穿过生物膜到达各组织 ,这一发现为肽类。

生物化学实验教学的优化

生物化学是医学教育的基础课,实验是生化教学的一个重要环节,其目的是培养学生的动手能力及分析问题、解决问题的能力,激发学生对本学科的兴趣.为了提高生物化学实验课的教学质量,对实验中存在的一些问题提出了一些见解,并在优化教学环节上做了一些有益的尝试.

浅谈生物化学的实验教学

生物化学是一门重要的医学基础学科 ,其实验技术和方法的迅速发展 ,为生命科学 ,特别是分子生物学的研究创造了必要条件 ,同时生化实验方法和研究技术已经成为生物学科以及其它有关领域中一个非常重要和强有力的工具。实验课教学的主要目标是使学生掌握和了解本学科研究的主要方法和手段 ,掌握基本技能和基本原理 ,培养学生的动手能力。

生物化学与分子生物学教学中应用多媒体教学的几点体会

以多媒体为主体的教学方法已成为高校课堂主要的教学模式,具有传统的教学方法无法比拟的优越性,但多媒体教学也需要不断完善.就多媒体教学中如何扬长避短,从认真备课,精心组织教学,注重课堂教学,优化教学环节,加强课后辅导几个方面抓起,受到学生的好评.

浅谈列表比较法在细胞生物学教学中的应用

细胞生物学是医学院校的重要基础课，它的主要任务是阐明组成生命的基本单位——细胞的各组成部分的结构及其功能的相互关系．研究细胞总体的和动态的功能活动以及细胞生命活动的相互关系及功能活动的分子基础。学好这门课程．从而达到从细胞及分子水平了解人体的生命活动及规律。但由于它属于微观领域．抽象的理论知识较多．所以在教学过程中有一定的难度。我们在细胞生物学的教学实践中，经常采用列表比较法，获得了比较好的效果。

生物化学实验课教学效果初探

为了提高生物化学实验课的教学效果,本文对实验内容、教学方法及考核办法进行了探讨.

细胞生物学多媒体课件制作及教学体会

本文简要介绍了自制"细胞生物学多媒体课件"的内容体系和特点,分析了多媒体教学过程中教师需注意的几个方面:(1)课件的版面设计简洁与内容讲授丰富相结合;(2)课件内容的生动性与授课的技巧相结合;(3)知识的科学性与讲授的灵活性相结合;(4)课件良好的交互性与教师一定的电脑知识相结合.

用Flash制作生物课件组件的原则

用Flash 制作生物课件,就是利用Flash 的优点来提高生物学的教学效果.利用它可以很方便地制作位移动画和变形动画.把变形动画做成组件以后,再用该组件做位移动画,则可以制作各式各样的运动画面.生物学的内容涵盖面广,有形态描述方面的,有机能演义方面的,以及化学反应和分子结构方面的内容.用Flash能很好地完成生物课件和课件组件的制作.

血平板分离培养细菌L型的生物学特性

目的了解血平板分离培养细菌L型的特性及其漏检原因。方法201份标本直接接种于血平板培养,盲刮盲扩后取针尖样或云雾状菌落,干片固定观察菌落特征;常规法鉴定L型及其生化特性。结果分离出102株L型(50.7%),针尖样菌落57份,云雾状菌落45份,L型多为颗粒型(G型)菌落(81%),易回复(88%);超薄切片细胞壁缺失;生化反应减弱;金黄色葡萄球菌L型居首位(50%)。结论血平板可直接用于分离培养L型,能保持传统培养L型的多种特性,有利于临床标本同时检出细菌型和L型,可提高L型的检出率。

生物化学教学过程中学生存在的问题及对策

对生物化学教学过程中存在于学生之中的诸多心理问题进行探讨和研究,使教师对学生心理有充分认识,以科学的态度和方法改进生物化学教学,提高教学质量.

CEA-重组痘苗病毒预防CEA阳性肿瘤的动物实验研究

目的：探讨 Ｃ Ｅ Ａ重组痘苗病毒对 Ｃ Ｅ Ａ 阳性肿瘤的预防作用。方法：构建 Ｃ Ｅ Ａ 阳性小鼠 Ｈｅｐａ 肝癌细胞模型（ Ｈｅｐａ Ｃ Ｅ Ａ＋ ） 。将实验鼠分为４ 组，先分别皮下接种痘苗病毒（ 野生型 Ｗ Ｖ Ｖ 或重组型 Ｃ Ｅ Ａｒ Ｖ）３ 次，再分别颈背部皮下注射 Ｃ Ｅ Ａ 阳性或 Ｃ Ｅ Ａ 阴性同源鼠 Ｈｅｐａ 肝癌细胞。观察动物反应并在接种癌细胞后每周测量一次肿瘤大小。结果：３ 个对照组各鼠颈背部皮下均可见有瘤块形成，并且以相近速率快速增长，３ 组之间无统计学上的显著差异，而接种 Ｃ Ｅ Ａｒ Ｖ／ Ｈｅｐａ Ｃ Ｅ Ａ＋ 组各鼠在观察期限内均无肿瘤形成。整个实验过程中实验鼠未表现有毒副反应。结论： Ｃ Ｅ Ａｒ Ｖ 通过诱导机体的免疫系统产生 Ｃ Ｅ Ａ 特异性的细胞和体液免疫应答反应，能有效预防小鼠移植性 Ｃ Ｅ Ａ 阳性肿瘤的形成。

骨髓基质干细胞的分离纯化及培养

目的 建立骨髓基质干细胞(MSCs)良好的分离纯化和培养方法。方法 将小鼠骨髓基质干细胞自股骨中分离,应用贴壁选择法结合细胞克隆挑选法进行分离纯化,应用细胞生长因子(EGF和PDGF-BB)刺激法进行MSCs的体外培养和传代,倒置显微镜下观察分离培养的细胞并照像记录。结果,培养获得了纯化的呈梭形成纤维样细胞的骨髓基质干细胞。在生长因子EGF和PDGF-BB的共同作用下,传代MSCs生长旺盛,形态均一。结论 该方法是简便高效的骨髓基质干细胞的分离纯化和培养方法。

1，25-二羟维生素D3对人胃腺癌细胞诱导分化的实验研究

目的观察1,25-二羟维生素D3对胃腺癌MGC-803细胞的诱导分化作用。方法1,25-二羟维生素D3(10-6、10-5、10-4mmol.L-1)作用于MGC-803细胞后,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞增殖能力、平板克隆试验测定细胞集落形成率、流式细胞仪测定细胞周期、TRAP-银染法测定端粒酶活性。结果1,25-二羟维生素D3作用24、48、72和96h后胃腺癌细胞生长均明显受抑制,48h后细胞周期出现向G0/G1期移行的特征性动力学改变,端粒酶活性明显受到抑制。细胞集落形成率明显下降(P<0.05)。结论1,25-二羟维生素D3对人胃腺癌细胞有诱导分化作用。

EBV－DNA酶全基因扩增克隆和鉴定

根据Ｂｅａｒ的ＥＢ病毒（ＥＢＶ）基因全序列，设计包括ＥＢＶ特异性ＤＮＡ酶全基因的一对引物，在引物上设计有一个ＳａｌⅠ切点，以便于克隆。选用蛋白酶Ｋ裂解的Ｒａｊｉ细胞ＤＮＡ为模板，扩增出一条１４６０ｂｐ的特异条带，纯比后经ＴａｑⅠ酶切形成１１９８ｂｐ和２６２ｂｐ的两个片段，证实该扩增片段即为ＥＢＶ特异性ＤＮＡ酶的全基因片段。以ＪＭ１０３为宿主菌，以高效表达质粒ＰＢＶ２２１为载体，按常规方法作酶切、连接、转化，最后在含氨中青霉素的培养基上挑取单菌落扩大培养，用快速法少量制备质粒ＤＮＡ。根据质粒电泳结果粗筛，再行ＢａｍＨⅠ酶切初步鉴定，确定质粒大小为５１１７（１４５１＋３６６６）ｂｐ的菌落为阳性克隆。先后用ＢａｍＨⅠ和ＴａｑⅠ消化阳性重组体，以形成１２００ｂｐ和３９１７ｂｐ两片段的确定为正向连接重组体。

pET28a-TAT-LacZ重组子的构建

为了构建高表达pET28a-TAT-LacZ重组子,观察表达的融合蛋白TAT-β-Gal能否穿过生物膜,使用人工合成编码TAT蛋白转导区的DNA片段,插入载体pET28a组氨酸编码区后再连接lacZ基因,组成pET28a-TAT-LacZ重组表达子,转化大肠杆菌,利用组氨酸亲和层析柱纯化TAT-β-Gal融合蛋白,将融合蛋白加入培养的平滑肌细胞。得到高度纯化的、有活性的TAT-β-Gal融合蛋白,TAT-β-Gal在短时间内进入体外培养平滑肌细胞,成功地构建了高表达pET28a-TAT-LacZ重组子,并在体外培养的细胞中证实TAT-β-Gal融合蛋白穿透生物膜的能力,为肽类、生物大分子药物进入组织细胞内发挥治疗作用提供了理论基础。

不同剂量的He—Ne激光对Raji细胞膜脂流动性的影响

本文采用荧光偏振法检测了不同剂量的Ｈｅ—Ｎｅ激光照射对Ｒａｊｉ细胞膜脂流动性的影响，发现０．０１Ｊ／ｃｍ２和０．５１Ｊ／ｃｍ２两剂量可使膜脂微粘度降低（Ｐ＜０．０５），即其膜脂流动性升高；１．０Ｊ／ｃｍ２和２．０Ｊ／ｃｍ２的剂量对膜脂微粘度无明显影响，即其膜流动性无明显化（Ｐ＞０．０５）；而６．０２Ｊ／ｃｍ２的剂量可使膜脂微粘度明显上升（Ｐ＜０．０５）。

旋毛虫幼虫形态显微测量方法分析

通过用显微测微尺、图像分析仪和图像手工测量3种显微测量方法测量旋毛虫幼虫,分析了3种方法的精度、误差、可靠性及适用性。结果在可靠性和综合效力方面,图像手工测量和图像分析仪具有较大优势。对于微小标本的不规则图形的长度测量,适合用图像手工测量方法;对于微小标本的规则图形或直线距离,3种方法相当,但图像分析仪和图像手工测量的精度要高一些。