miR-186-5p通过靶向TFAM增强乳腺癌细胞对5-Fu的化疗敏感性

目的:探讨miR-186-5p对乳腺癌MCF-7细胞化疗敏感性的影响及分子机制。方法:采用梯度5-fluorouridine(5-Fu)处理MCF-7细胞建立耐药细胞株MCF-7/5Fu,实时荧光定量PCR(qPCR)检测细胞中miR-186-5p表达;脂质体介导法分别将miR-186-5p inhibitor、miR-186-5p mimic及阴性对照转染至MCF-7细胞或MCF-7/5Fu细胞;qPCR检测细胞中miR-186-5p表达,CCK-8法检测细胞活性,流式细胞术检测细胞凋亡,双荧光素酶报告基因实验检测miR-186-5p和线粒体转录因子A(TFAM)的靶向关系,qPCR检测TFAM表达变化。结果:与MCF-7细胞比较,miR-186-5p在MCF-7/5Fu细胞中的表达水平显著下降(P<0.05)。与NC mimic组比较,MCF-7/5Fu细胞转染miR-186-5p mimic后,细胞中miR-186-5p表达水平升高(P<0.05),不同浓度5-Fu处理后细胞活性降低,IC50下降(P<0.05),细胞凋亡增加(P<0.05)。TFAM-WT中miR-186-5p inhibitor组MCF-7细胞荧光素酶活性较NC inhibitor组增强(P<0.05),而miR-186-5p mimic组MCF-7/5Fu细胞荧光素酶活性较NC mimic组下降(P<0.05),且MCF-7细胞中miR-186-5p inhibitor组TFAM的相对表达量较NC inhibitor组升高(P<0.05);MCF-7/5Fu细胞中miR-186-5p mimic组TFAM的相对表达量较NC mimic组显著下降(P<0.05)。结论:miR-186-5p通过靶向调控TFAM表达增强乳腺癌细胞对5-Fu化疗敏感性。