下调长链非编码RNA FGD5-AS1抑制肾癌细胞增殖和侵袭的机制研究

目的研究lncRNAFGD5-AS1对肾癌细胞增殖、侵袭的影响及分子机制。方法2020年7月至2021年2月,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测FGD5-AS1在肾癌细胞中的表达。以表达最高的肾癌细胞为对象,分别转染小干扰siRNA-FGD5-AS1质粒(实验组)和阴性对照质粒(对照组)。qRT-PCR检测FGD5-AS1和细胞因子信号转导抑制因子6(suppressorof cytokinesignaling 6,SOCS6)mRNA的表达。Westernblotting检测SOCS6和NF-κB信号通路蛋白表达。二苯基溴化四氮唑蓝(MTT)实验和Transwell侵袭实验检测细胞增殖和侵袭。结果肾癌细胞株中FGD5-AS1表达均高于近端肾小管细胞(P<0.01),FGD5-AS1在ACHN细胞中表达最多(P<0.01)。对照组和实验组FGD5-AS1表达分别为(1.01±0.09)和(0.20±0.03),差异有统计学意义(t=8.46,P<0.01);SOCS6 mRNA的表达分别为(0.33±0.05)和(1.02±0.13),差异有统计学意义(t=5.05,P<0.01)。与对照组相比,实验组SOCS6蛋白表达增加,NF-κB信号通路蛋白表达均明显降低,实验组ACHN细胞增殖能力降低(均P<0.05)。对照组和实验组的侵袭细胞数分别为(80.49±10.50)个和(32.29±8.03)个,差异有统计学意义(t=3.65,P<0.05)。结论FGD5-AS1在肾癌细胞株中表达增加,下调FGD5-AS1表达可通过正向调控SOCS6基因表达抑制肾癌细胞的增殖和侵袭。

lncRNA PEBP1P2通过CARD10基因调控NF-κB信号通路对肾细胞癌细胞增殖和迁移的影响

目的:观察长链非编码RNA(lncRNA)PEBP1P2在肾细胞癌组织中的表达及对肾细胞癌细胞增殖和迁移的影响。方法:采用实时定量聚合酶链反应(qPCR)检测51例肾细胞癌组织及肾细胞癌细胞株中PEBP1P2的表达。以PEBP1P2表达最低的A498细胞为转染对象,设转染PEBP1P2质粒的细胞为PEBP1P2组,转染阴性对照质粒的细胞为NC组。qPCR检测两组细胞PEBP1P2的表达。MTT法和Transwell迁移实验检测肾细胞癌细胞的增殖能力和迁移能力。qPCR和Western blotting法分别检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶招募域家族分子10( CARD10)基因及NF-κB通路蛋白的表达。计量资料以均数±标准差(Mean±SD)表示,组间比较采用 LSD- t检验。 结果:肾细胞癌组织中PEBP1P2的表达低于癌旁组织(t=4.89, P<0.01)。肾细胞癌细胞中PEBP1P2的表达低于正常肾小管上皮细胞(P<0.01)。PEBP1P2组和NC组A498细胞中PEBP1P2表达分别为(11.01±1.26)和(1.06±0.19),PEBP1P2组明显高于NC组(t=7.81, P<0.01)。过表达PEBP1P2可显著抑制肾细胞癌细胞的增殖能力(P<0.05)和迁移能力(t=3.65, P<0.05)。过表达PEBP1P2可显著抑制肾细胞癌A498细胞中 CARD10基因的表达(t=6.83, P<0.01),抑制NF-κB信号通路蛋白的转导。 结论:PEBP1P2在肾细胞癌组织表达明显降低,过表达PEBP1P2可显著抑制肾细胞癌A498细胞的增殖和迁移能力,其分子机制可能是PEBP1P2通过下调 CARD10基因表达抑制NF-κB信号通路转导。