百合地黄汤加味用于卒中后抑郁症的潜在作用靶点及机制

目的探讨百合地黄汤加味(MBD/BDD)用于卒中后抑郁症(PSD)的潜在作用靶点及机制。方法通过网络药理学方法挖掘MBD/BDD治疗PSD的潜在靶点和关键途径。以局灶性脑缺血手术结合慢性不可预见的温和应激建立PSD模型大鼠,并随机分为PSD模型组、MBD/BDD组(12.6 g/kg,以生药总量计)、盐酸氟西汀(FLX)组(阳性对照,2.3 mg/kg),另设空白对照组,每组8只。各药物组大鼠灌胃相应药液,每天1次,连续21 d。通过旷场实验、强迫游泳实验评价MBD/BDD对模型大鼠抑郁样症状的干预效果;剖取各组大鼠脑组织并提取总RNA,进行转录组测序和生物信息学分析,并基于上述结果对变化显著的基因和常见神经营养因子进行mRNA和蛋白水平表达验证。结果共获得MBD/BDD抗抑郁相关靶基因131个(如IL1B、AKT1等),涉及神经活性配体-受体相互作用、环磷酸腺苷等信号通路。MBD/BDD可显著延长或增加PSD模型大鼠在中心方格花费的总时间及行进的总距离,显著缩短累计不动时间(P<0.05)。经MBD/BDD干预后,大鼠脑组织中发生变化的基因远多于FLX组,且PSD模型组、MBD/BDD组、FLX组的基因谱存在明显差异;MBD/BDD组与PSD模型组之间的差异表达基因(DEGs)共1351个,其中178个显著下调、1173个显著上调(P<0.05);这1351个DEGs涉及神经元分化、化学突触传递调节等,并在轴突引导、胆碱能突触和神经活性配体-受体相互作用方面显著富集;MBD/BDD组大鼠脑组织中上调幅度排名前30位的基因均与神经元增殖、发育、分化和迁移有关。经MBD/BDD干预后,大鼠脑组织中Fezf2、Arx、Ostn、Nrgn基因和脑源性神经营养因子、酪氨酸激酶受体B蛋白的相对表达量均显著升高(P<0.05)。结论MBD/BDD的抗PSD作用可能与上调神经元增殖、发育、分化和迁移相关基因的表达,促进神经结构和功能的修复有关。

痰湿阻肺型COPD大鼠模型的构建及代谢组学分析

目的构建痰湿阻肺型COPD大鼠模型,并应用代谢组学技术揭示其代谢特征。方法采用烟熏联合LPS气道滴注、强迫游泳和隔日禁食的方式构建痰湿阻肺型COPD大鼠模型,通过观察大鼠行为变化,测定体重、肛温、血液指标、IL-6、IL-1β、TNF-α含量,观察组织病理形态学变化对该模型进行评价;应用LC-MS技术检测并筛选出正常组与模型组大鼠的血浆差异代谢物,进行通路富集分析。结果与正常组相比,模型组大鼠出现不同程度的咳嗽、喘息、精神萎靡、行为倦怠、毛色干枯、体重减轻、饮水增加、体温升高、粪便稀溏、舌苔肥大白滑;外周血中白细胞数和淋巴细胞数显著升高;BALF中IL-6、IL-1β、TNF-α含量显著升高;肺组织中炎性细胞浸润明显、肺泡腔体大小不一,结肠、十二指肠、回肠粘膜局部脱落;正常组与模型组间共有116个差异代谢物,主要涉及氨基酸生物合成和代谢、维生素消化吸收与代谢、脂质及类脂质合成与代谢等代谢通路。结论本研究提供了一种成功构建痰湿阻肺型COPD大鼠模型的方法及其相应评价体系,并初步揭示了该模型的主要代谢特征。

药用植物学试卷分析对线上线下混合式教学改革的启示

目的明确以线下课堂教学为主和线上线下混合式教学的教学结果差异,为药用植物学教学改革提供科学依据。方法定量分析重庆医科大学以线下教学为主的2017级和线上线下混合式教学的2018级中药学本科药用植物学课程结业试卷。结果2个年级学生试卷共63份,考试成绩均成呈偏正态分布,2017级成绩为(84.9±9.1)分,信度系数0.8565,2018级成绩为(89.21±8.39)分,信度系数0.8690。结论试卷设计信度较高,但2018级试卷成绩明显高于2017级,证明线上线下混合式教学质量可靠。

甘草汁炮制半夏对毒性成分凝集素蛋白的影响

目的:研究法半夏炮制过程中炮制辅料甘草汁浸泡对其毒性成分凝集素蛋白的影响。方法:以WesternBlot法考察甘草汁(醇沉上清液、醇沉沉淀、甘草酸溶液)浸泡对凝集素蛋白含量的影响。采用SDS-PAGE法结合银染技术测定甘草汁及甘草酸溶液浸泡凝集素蛋白后上清液与沉淀中的蛋白组成;以MALDITOF MS/MS技术检测甘草汁及甘草酸溶液浸泡凝集素蛋白后上清液及沉淀中肽段分子量分布;以等电点沉淀法测定凝集素蛋白等电点,并测定其Zeta电位变化考察甘草汁及甘草酸溶液浸泡凝集素蛋白后对其等电点的影响;同时,采用透射电镜观察甘草汁及甘草酸溶液浸泡对凝集素蛋白聚合作用的影响。结果:甘草汁、甘草汁醇沉上清液及甘草酸溶液浸泡均可使凝集素蛋白含量显著降低(P<0.05)。甘草汁及甘草酸溶液浸泡凝集素蛋白后的上清液和沉淀均在12 kDa位置出现凝集素蛋白对应的条带,且上清液对应的凝集素蛋白条带与沉淀对应的凝集素蛋白条带相比明显变浅。凝集素蛋白的等电点pH约为5~6,甘草汁及甘草酸溶液的pH分别为5.25、5.62。甘草酸溶液浸泡凝集素蛋白后其Zeta电位接近于0,达到等电点而沉淀。甘草汁、甘草酸溶液及甘草汁石灰水共同浸泡凝集素蛋白后出现大量聚集体,形成超分子自组装复合物结构而加速其沉淀。结论:甘草汁在法半夏炮制过程中解毒机制为甘草汁中甘草酸浸泡凝集素蛋白可使其达到等电点,促进其超分子自组装,改变溶解度而沉淀。甘草汁与石灰水在炮制过程中以协同作用形成超分子自组装复合物而解毒。