喉癌和鼻咽癌体外药敏试验AgNOR法的实验及临床研究

目的 :用嗜银蛋白检测技术 (AgNOR)分析喉癌和鼻咽癌对 8种常用化疗药物的敏感性。 方法 :从 5 6例喉癌和鼻咽癌患者获取新鲜肿瘤组织标本 ,采用单纯机械分离法制备单细胞悬液 ,加入抗癌药物后培养 36h ,细胞悬液涂片、银染 ,计数银染颗粒后计算均值下降率 ;12例患者同期行化疗。结果 :5 1例肿瘤获得实验成功 ,可评价率为 91.1% ;AgNOR颗粒均值下降率从 0～ 6 3% ,在 8种单一药物中 ,对DDP的敏感率最高 ,其它较为敏感的药物为VCR、5 -FU、PYM ;鼻咽癌对抗癌药物的敏感性显著高于喉癌对抗癌药物的敏感性 ;体外药敏与体内疗效的总符合率为 80 %。结论 :AgNOR技术简便易行 ,与临床相关性好 ,是一种有应用前景的体外药敏筛选方法。

输入供体血对延长大鼠移植胰腺功能存活的初步研究

目的 探索供体血输入同种大鼠对诱导胰腺移植耐受的可能性。方法 用雄性Wistar大鼠作为实验的供受体 ,胰腺移植当天取供体大鼠全血 1ml ,注入糖尿病受体大鼠腹腔 ,辅以短期的硫唑嘌呤 (Aza)。结果 移植胰腺功能存活时间为 2 8～ 112天 (平均 64 .2天 ) ,与单纯用硫唑嘌呤组 ( 10 .2天 )或单纯输入供体血液组 ( 9.8天 )相比 ,移植胰腺功能存活时间显著延长 (P<0 .0 1)。结论 移植前短期使用免疫抑制剂以及移植当天输入供体血液 ,能延长大鼠移植胰腺功能存活时间。

改良袖套法建立异种心脏颈部移植模型

目的 :采用改良Heron袖套法建立小鼠→大鼠异种心脏颈部移植模型。方法 :选择NIH小鼠和Wistar大鼠分别作为供体和受体。用聚乙烯套管将小鼠升主动脉与大鼠右颈总动脉端端套入吻合 ,同法将小鼠肺动脉与大鼠右颈外静脉端端套入吻合 ,以建立小鼠→大鼠颈部异位心脏移植模型。结果 :进行移植手术 30次 ,成功率 93.3%。移植后心脏平均存活时间2 .13± 0 .8天。结论 :改良袖套法操作简单、迅速、稳定、便于观察 ,是较理想的动物模型。

小鼠→大鼠异位心脏移植模型的建立

目的：建立小鼠→大鼠异种心脏移植动物模型。方法：选择NIH小鼠和Wistar大鼠分别作为供体和受体。小鼠升主动脉与大鼠右颈总动脉端端吻合，小鼠肺动脉与大鼠右颈外静脉端端吻合以建立小鼠→大鼠颈部异位心脏移植模型。排斥后取移植心脏作病理学检查。结果：移植成功率87%(13/15)。移植心脏平均存活时间2.15±0.90天。病理检查发现排斥心脏中广泛血管内血栓形成，出血及炎症细胞浸润，部分心肌有局灶性梗塞和凝固性坏死。结论：本模型容易操作，易于观察，稳定可靠，是研究异种移植较理想的动物模型。

LAMS抑制肝癌细胞增殖和促凝活性的实验研究

目的：观察ＬＡＭＳ抑制肝癌细胞增殖和促凝活性的效果。方法：比较ＬＡＭＳ处理的肝癌细胞生长曲线、ＡｇＮｏＲｓ含量变化；用一步法ＡＰＴＴ测定ＬＡＭＳ拮抗肝癌细胞分泌物的促凝血作用。结果：ＬＡＭＳ处理后的肝癌细胞增殖受抑制、ＡｇＮｏＲｓ数量减少，ＬＡＭＳ能拮抗肝癌细胞分泌物对ＡＰＴＴ的影响。结论：ＬＡＭＳ可有效地抑制肝癌细胞增殖和促凝活性。

输入供体血对大鼠移植胰腺白介素-2和TNF-α的影响

目的：了解输入供体血延长大鼠移植胰腺功能存活的机制。方法：取封闭群健康wistar大鼠作为供受体。制成糖尿病模型的受体大鼠分为对照和输入供体血二组。采用胰管开放全胰腺腹腔内移植。术后7天处死动物，取移植胰腺作HE染色和胰岛gomori改良醛复红染色，碱性磷酸酶桥联酶标法检测淋巴细胞和细胞因子。结果：输入供体血组的移植胰腺腺泡和胰岛结构正常，CD+4T细胞显著增高。对照组胰腺腺泡和胰岛结构破坏，CD+8T细胞，IL-2，TNF-α显著增高。对照组CD+3T细胞、NK细胞均比输入供体血组高，但无显著差异。结论：输入供体血延长大鼠移植胰腺功能存活与IL-2，TNF-α降低有关。

LAMS对肝癌细胞株Bcl-2、BaX基因蛋白的影响

目的：研究ＬＡＭＳ对肝癌细胞株的Ｂｃｌ－２、ＢａＸ基因蛋白影响。方法：用ＭＴＴ法测定不同浓度ＬＡＭＳ对肝癌细胞株增殖的抑制作用；用ＴＵＮＥＬ法和免疫组化法测定不同抑制程度下凋亡细胞量和Ｂｃｌ－２、Ｂａｘ基因蛋白的变化。结果：ＬＡＭＳ浓度与肝癌细胞增殖的抑制程度、凋亡细胞数、Ｂｃｌ－２基因蛋白表达减少及ＢａＸ基因蛋白表达增加呈正相关。结论： ＬＡＭＳ可通过影响Ｂｃｌ－２、ＢａＸ基因蛋白的表达促使肝癌细胞凋亡。

A_(549)细胞免疫抑制因子及香菇多糖对T细胞增殖的影响

目的 :研究A54 9人肺腺癌细胞产生的免疫抑制因子及香菇多糖对T细胞转化的影响。方法 :以MTT法测定加A54 9细胞免疫抑制因子及香菇多糖后T细胞的转化率。结果 :T细胞的转化受该免疫抑制因子抑制 ,且抑制程度与免疫抑制因子浓度成正相关。适当浓度的香菇多糖能有效地拮抗此抑制。结论 :A54 9细胞产生的免疫抑制因子可抑制T细胞转化 。

来氟米特延长大鼠异种移植心脏存活时间的实验研究

目的 利用小鼠→大鼠心脏移植模型 ,研究来氟米特 (Lef)对异种移植排斥反应的作用。方法 动物随机分成 8组 :A组 :对照组 ,n =6 ;B组 :环孢素A(CsA)组 ,n =6 ;C组 :环磷酰胺(CTX)组 ,n =6 ;D组 :Lef组 ,n =5 ;E组 :CsA +CTX组 ,n =5 ;F组 :Lef +CsA组 ,n =5 ;G组 :Lef +CTX组 ,n =6 ;H组 :Lef+CsA +CTX组 ,n =5。用免疫组织化学法检测各组的C3、IgG和CD6 8。 结果 单用CsA或CTX不能显著延长移植心脏存活时间 ,但单用Lef可显著延长移植心脏存活时间达(4 .2± 1.48)d ,与A组比较 ,P <0 .0 5。Lef与CsA联合应用使移植心脏存活 (6 .4± 2 .0 7)d ,与A、B、C和D组比较 ,均P <0 .0 5。Lef与CsA和CTX联合应用使移植心脏存活 (7.6± 1.82 )d ,与A、B、C、D和E组比较 ,均P <0 .0 5。各组被排斥的心脏均未见C3沉积 ,使用抗B细胞的免疫抑制剂如Lef和CTX ,IgG沉积降低 ,但差异无显著性 ,P >0 .0 5。结论 Lef可显著延长小鼠→大鼠移植心脏存活时间 。

昆布多糖硫酸酯对急性髓性白血病HL-60细胞的调控

目的 :研究昆布多糖硫酸酯 (LAMS)对急性髓性白血病HL - 6 0细胞株的调控作用。方法 :用MTT法测定不同浓度LAMS对HL - 6 0细胞株的增殖抑制作用 ;流式细胞仪分析不同浓度作用下细胞凋亡率 ;免疫组化法测定LAMS对HL - 6 0细胞株NF -κB家族P6 5亚单位的作用。结果 :HL - 6 0细胞增殖抑制程度与昆布多糖硫酸酯的浓度呈正相关 ;HL - 6 0细胞凋亡率随药物浓度的增加而升高 ;在LAMS浓度为 0 .75 μg/ml作用下 ,P6 5在 12h表达呈强阳性 ,2 4h几乎不表达 ,而IKbα在6h表达呈强阳性。结论 :LAMS可以诱导体外HL - 6 0细胞凋亡 ,其中对凋亡的调控作用可能为负调控 ;LAMS能够调控NF-κB的表达 ,其表达有时间差异性。说明LAMS已作用于分子水平。

昆布多糖硫酸酯对化疗药物治疗肝癌细胞的增敏作用

目的 :探讨LAMS对肝癌细胞化疗的增敏作用。方法 :以免疫组化法测定用LAMS前后肝癌细胞Bcl -2基因蛋白含量 ,以MTT法分别测定5 -Fu、MTX、MMC、ADM、CTX与LAMS联合及单独治疗肝癌细胞的IC50 以及有效作用时间。结果 :LAMS使肝癌细胞Bcl-2基因蛋白表达下降 ,并使肝癌细胞对5 -Fu、MTX、MMC、ADM、CTX的敏感性增加 ,有效作用时间延长。结论 :LAMS可有效地增加肝癌细胞对5 -Fu、MTX、MMC、ADM。