留学生局部解剖学教学特点分析

针对留学生局部解剖学教学在学生教育背景、教学实施、教材使用等环节出现的特点及问题进行分析,并探讨其应对措施,以期为提高留学生局部解剖学教学质量提供有益的经验。

Notch-1对大鼠嗅球成鞘细胞神经生长因子表达的影响

目的观察Notch-1对嗅球成鞘细胞(olfactory ensheathing cells,OECs)神经生长因子(nerve growth factor,NGF)表达的影响。方法原代培养大鼠OECs,用有活性的Notch质粒(NotchICV),无活性的Notch质粒(NotchVK)以及空质粒分别转染OECs,将实验对象分成NotchICV转染组,NotchVK转染组和空白质粒组,应用免疫荧光双标、Western blot及RT-PCR技术,检测各组OECs中NGF及其mRNA的表达变化。结果转染Notch-1后,OECs中NGF的表达明显增高。免疫荧光双标结果显示,NotchICV转染组OECs中NGF的表达较NotchVK转染组和空白质粒组均明显增高(P<0.05);RT-PCR结果显示,NotchICV转染组OECs中NGF mRNA的表达(0.4961±0.0269)均高于NotchVK转染组(0.2445±0.0134)及空白质粒组(0.2459±0.0160)(P<0.01);Western blot结果显示,NotchICV转染组OECs中NGF的表达(0.8875±0.0166)均高于NotchVK转染组(0.6862±0.0592)和空白质粒组(0.6821±0.0670)(P<0.01)。结论 Notch-1转染OECs后,其NGF的表达上调,提示Notch-1能增强OECs中NGF的合成。

Notch-1对嗅成鞘细胞脑源性神经营养因子表达的影响

目的：观察Notch-1对嗅成鞘细胞（OECs）脑源性神经营养因子（BDNF）表达的影响,为增强OECs对中枢神经系统损伤的修复能力提供实验基础.方法：将有活性的Notch质粒（NotchICV）,无活性的Notch质粒（NotchVK）以及空白质粒转入OECs中,将实验对象分成活性质粒组、非活性质粒组和空白组,通过免疫荧光双标、RT-PCR及免疫印迹技术检测各组OECs中BDNF的表达变化.结果：活性质粒组OECs中BDNF及其mRNA的表达较非活性质粒组和空白组均增高,而非活性质粒组和空白组比较无差异.结论：Notch-1转染OECs后,其BDNF的表达上调,提示Notch-1能增强OECs中BDNF的合成.

Aβ对阿尔茨海默病模型小鼠脑神经元及小胶质细胞内溶酶体的影响

目的:探讨β-淀粉样蛋白(amyloidβpeptide,Aβ)对阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)模型小鼠脑神经元及小胶质细胞内溶酶体的影响。方法:取6月龄APP/PS1双转基因AD模型小鼠和同窝野生型小鼠各6只,免疫荧光染色观察脑内神经元和小胶质细胞表达以及和溶酶体共表达情况;Western blot检测小鼠脑内自噬相关蛋白表达。用Aβ25-35处理SH-SY5Y细胞后,转录因子EB(transcription factor EB,TFEB)过表达腺病毒干预细胞72 h,Western blot检测TFEB和溶酶体标志物水平。结果:与野生型组小鼠比较,6月龄AD转基因组小鼠LC3、p62蛋白表达增加(t=4.976,P=0.008;t=4.463,P=0.011),溶酶体标志蛋白LAMP1明显减少(t=14.91,P=0.000 1)。AD模型组小鼠海马区神经元明显丢失,小胶质细胞明显增生,溶酶体表达均明显减少。与野生型组小鼠比较,AD转基因组小鼠磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mammalian target of rapamycin,p-mTOR)/mTOR蛋白表达量明显升高(t=5.501,P=0.005),TFEB蛋白表达水平明显降低(t=5.899,P=0.004)。Aβ25-35处理使SH-SY5Y细胞TFEB和Lamp1蛋白水平均下调(t=10.94,P<0.001;t=17.22,P<0.001),过表达TFEB后,溶酶体标志物Lamp1蛋白水平明显升高(t=5.136,P<0.01)。结论:Aβ引起AD转基因小鼠脑内神经元和小胶质细胞内溶酶体均减少,可能通过抑制mTOR/TFEB信号通路发挥作用。