5-氮杂胞苷促大鼠MSCs增殖及分化过程中的3种钾电流

目的研究5-氮杂胞苷对大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)增殖及分化过程中延迟整流、瞬时外向和内向整流钾电流(IkDR、Ito、Ik1)的影响。方法按文献方法培养1月龄大鼠MSCs,至第2周时部分MSCs以10μmol/L5-氮杂胞苷(5-Aza)诱导培养4周,以全细胞膜片钳技术检测诱导组第1、2、3和4周IkDR、Ito及Ik1的电流强度,用未诱导组培养6周的检测结果作对照,电流以相应的阻滞剂鉴定。结果各周IkDR、Ito及Ik1检出率相近;诱导组MSCs3种钾电流均随培养时间延长逐渐增强(P<0.05);诱导后第1周MSCs3种钾电流强度与未诱导组比较无明显差异,而从诱导第2周起开始增强(P<0.05),至第4周时进一步增强(P<0.01)。结论5-Aza诱导可促早期MSCs增殖及分化过程中的IkDR、Ito和Ik1增强。

大鼠骨髓间充质干细胞培养4周膜电流研究

目的:研究未经诱导SD大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)培养4周(4～6代)膜电流特性,为移植细胞的选取和细胞移植后心肌电生理研究奠定基础。方法:按文献方法获得和培养MSCs至第4周,利用全细胞膜片钳技术对培养4周的MSCs膜电流进行检测,以各种钾钠钙通道阻滞剂对电流成分进行分析鉴定。结果:本实验成功封接并有电流表达细胞共39例,所有检测到的电流均以相应阻滞剂证实。共有4种钾电流表达即缓慢激活延迟整流钾电流、瞬时外向钾电流、超速激活延迟整流钾电流和内向整流钾电流(Ikir),3种外向钾电流在+60mV时电流峰值均值分别为(0.3894±0.1230)nA、(0.4135±0.1029)nA、(0.2570±0.1135)nA;Ikir在-120mV时电流大小为(0.9613±0.1484)nA;此外在极少数MSCs上检测到河豚毒素敏感的内向钠电流(ITTX.Na),未检测到内向钙电流。结论:培养4周后的MSCs存在钾钠电流的复合表达,从电生理角度看,MSCs有分化成功能性心肌样细胞的离子基础,其可作为体内移植较理想细胞选择。