重组人脂联素基因在L02细胞中的表达及其对肝脂肪变的预防作用

目的观察携带人脂联素（AdipoQ）基因真核表达载体是否能在人正常肝细胞株L02中表达，并探讨其对体外诱导肝细胞脂肪变的预防作用及其意义，为AdipoQ在非酒精性脂肪肝病的基因治疗中奠定基础。方法将构建含人AdipoQ重组载体pEGFPN1AdipoQ转染L02细胞（L02／pEGFPN1AdipoQ组，力=10），与pEGFP—N1空质粒转染L02细胞（L02／pEGFP—N1组，力=10）以及L02正常细胞株（L02组，力=10）为对照，分别加入浓度为20μg／ml的油酸进行培养72h，用油红O染色观察细胞内脂滴，并检测细胞内甘油三酯（TG）、游离脂肪酸（FFA）和甘油的含量。采用SAS8．2软件进行统计分析，3组之间总体差异的检验采用单因素方差分析，3组之间两两比较采用SNK—q检验。结果含人AdipoQ重组载体pEGFP—N1-AdipoQ能够在L02细胞株中表达，油红O染色显示72hL02组和L02／pEGFP-N1组分别比L02／pEGFP-N1-AdipoQ组脂肪变性更为明显。L02组、L02／pEGFP—N1组和L02／pEGFP—N1一AdipoQ组，TG含量分别为（89．23±18．45）μmol／L、（78．66±16．38）mol／L和（26．58±7．65）μmol／L，FFA含量分别为（85．39±17．26）mol／L、（75．63±12．25）μmol／L和（25．37±8．73）mol／L，甘油含量分别为（62．29±13．59）umol／L、（57．35±18．43）μmol／L和（15．37±7．53）μmol／L，F值分别为50．58、59．37、34．32，雅均〈0．01。在L02／pEGFP-N1组中TG、FFA和甘油含量均明显高于L02／pEGFP-N1-AdipoQ组，t值分别为7．81、8．50、6．75，尸值均〈0．01。在L02组中TG、FFA和甘油含量均显著高于L02／pEGFP-N1-AdipoQ组，t值分别为9．39、10．15、7．54，尸值均〈0．01。TG、FFA和甘油含量在L02／pEGFPN1组和L02组之间，差异无统计学意义。结论携带人脂联素基因真核表达载体能够在L02细胞株中表达，而且具有预防肝脂肪变性的作用。