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双表达骨形态发生蛋白2、9重组腺病毒载体的构建和表达
被引量:
2
1
作者
林春阳
陈亮
+1 位作者
罗进勇
邓忠良
《中国微生态学杂志》
CAS
CSCD
2011年第7期593-596,共4页
目的构建双表达骨形态发生蛋白(Bone morphogenic protein,BMP)2、9腺病毒重组体并进行鉴定。方法自单一表达的BMP2或BMP9 AdEasy质粒上扩增BMP2和BMP9片段,先后亚克隆至穿梭质粒pASG2,获得双表达穿梭质粒pASG2-BMP2、9。酶切及PCR鉴定...
目的构建双表达骨形态发生蛋白(Bone morphogenic protein,BMP)2、9腺病毒重组体并进行鉴定。方法自单一表达的BMP2或BMP9 AdEasy质粒上扩增BMP2和BMP9片段,先后亚克隆至穿梭质粒pASG2,获得双表达穿梭质粒pASG2-BMP2、9。酶切及PCR鉴定确认、测序正确后同源重组获得双表达BMP2、BMP9腺病毒质粒,转染至HEK-293细胞中包装和扩增得到高滴度双表达BMP2、BMP9腺病毒,体外感染C3H10细胞,RT-PCR鉴定并观察其早期诱导成骨情况。结果成功构建双表达BMP2、BMP9的腺病毒,滴度约为1010IU/mL,RT-PCR证实双表达腺病毒在C3H10细胞中表达,其感染的C3H10细胞早期碱性磷酸酶含量较单一表达的BMP2或BMP9腺病毒组增加。结论成功构建双表达BMP2、9的重组腺病毒载体,为进一步研究BMP2和BMP9的协同成骨作用和制备高效的组织工程人工骨提供了有利的工具。
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关键词
双表达BMP2-BMP9载体
重组腺病毒
载体构建
表达
原文传递
题名
双表达骨形态发生蛋白2、9重组腺病毒载体的构建和表达
被引量:
2
1
作者
林春阳
陈亮
罗进勇
邓忠良
机构
重庆医科大学
附属第二医院骨科
重庆医科大学检验系分子医学实验室
出处
《中国微生态学杂志》
CAS
CSCD
2011年第7期593-596,共4页
基金
国家高技术研究发展(863)计划(2007AA02Z4B5)
国家自然科学基金(31000434)
文摘
目的构建双表达骨形态发生蛋白(Bone morphogenic protein,BMP)2、9腺病毒重组体并进行鉴定。方法自单一表达的BMP2或BMP9 AdEasy质粒上扩增BMP2和BMP9片段,先后亚克隆至穿梭质粒pASG2,获得双表达穿梭质粒pASG2-BMP2、9。酶切及PCR鉴定确认、测序正确后同源重组获得双表达BMP2、BMP9腺病毒质粒,转染至HEK-293细胞中包装和扩增得到高滴度双表达BMP2、BMP9腺病毒,体外感染C3H10细胞,RT-PCR鉴定并观察其早期诱导成骨情况。结果成功构建双表达BMP2、BMP9的腺病毒,滴度约为1010IU/mL,RT-PCR证实双表达腺病毒在C3H10细胞中表达,其感染的C3H10细胞早期碱性磷酸酶含量较单一表达的BMP2或BMP9腺病毒组增加。结论成功构建双表达BMP2、9的重组腺病毒载体,为进一步研究BMP2和BMP9的协同成骨作用和制备高效的组织工程人工骨提供了有利的工具。
关键词
双表达BMP2-BMP9载体
重组腺病毒
载体构建
表达
Keywords
Co-expression of BMP2 and BMP9; Recombinant adenovirus; Construction; Expression;
分类号
R34 [医药卫生—基础医学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
双表达骨形态发生蛋白2、9重组腺病毒载体的构建和表达
林春阳
陈亮
罗进勇
邓忠良
《中国微生态学杂志》
CAS
CSCD
2011
2
原文传递
已选择
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参考文献
引证文献
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