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Scleraxis慢病毒基因感染人羊膜间充质干细胞向肌腱细胞的定向分化
被引量:
6
1
作者
朱喜忠
刘子铭
+7 位作者
吴术红
熊华章
杨继滨
李豫皖
尤奇
金瑛
左晨
刘毅
《中国组织工程研究》
CAS
北大核心
2017年第33期5382-5387,共6页
背景:Scleraxis作为肌腱细胞特异性表达分子,不仅参与肌腱祖细胞的聚集及分化,还影响肌腱细胞外基质的形成。人羊膜间充质干细胞具有多向分化潜能,在体外不同诱导条件下可分化为骨、软骨及其他结缔组织。目的:探讨Scleraxis慢病毒基因...
背景:Scleraxis作为肌腱细胞特异性表达分子,不仅参与肌腱祖细胞的聚集及分化,还影响肌腱细胞外基质的形成。人羊膜间充质干细胞具有多向分化潜能,在体外不同诱导条件下可分化为骨、软骨及其他结缔组织。目的:探讨Scleraxis慢病毒基因感染人羊膜间充质干细胞能否向肌腱细胞定向分化并观察其分化效果。方法:取足月产胎盘羊膜组织,两步酶消化法分离人羊膜间充质干细胞并采用倒置相差显微镜观察和流式细胞鉴定。取第3代细胞分3组进行培养,单纯人羊膜间充质干细胞培养组为空白组,人羊膜间充质干细胞经Slclerxis基因慢病毒感染后为过表达组,人羊膜间充质干细胞经不携带Scleraxis基因慢病毒感染后为空质粒组。细胞培养7 d内CCK-8法检测各组细胞增殖能力细胞。细胞培养后3 d和7 d,分别进行实时荧光定量PCR和Western Blot检测评价各组细胞向肌腱细胞定向分化的效果。结果与结论:(1)CCK-8检测显示:培养7 d内,过表达组、空质粒组与空白组细胞在增殖能力上无明显差异(P>0.05);(2)Westen blot检测显示:过表达组Scleraxis蛋白表达水平明显高于空质粒组和空白组(P<0.05);(3)实时荧光定量PCR显示:3 d时,过表达组Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、纤连蛋白及肌腱蛋白C m RNA表达水平明显高于空质粒组(P<0.05),而腱调蛋白的表达与空质粒组无明显差异(P>0.05);7 d时,Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、纤连蛋白、肌腱蛋白C及腱调蛋白的表达水平明显高于空质粒组(P<0.05);(4)结果提示:人羊膜间充质干细胞经Scleraxis慢病毒基因感染后可向肌腱细胞定向分化。
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关键词
干细胞
分化
人羊膜间充质干细胞
SCLERAXIS
慢病毒感染
体外诱导
肌腱细胞
定向分化
慢病毒转染
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职称材料
题名
Scleraxis慢病毒基因感染人羊膜间充质干细胞向肌腱细胞的定向分化
被引量:
6
1
作者
朱喜忠
刘子铭
吴术红
熊华章
杨继滨
李豫皖
尤奇
金瑛
左晨
刘毅
机构
遵义医
学院
附属医院
骨
科
重庆医科大学
第一附院关节外科
重庆医科大学生命科学院骨再生与发育研究平台
出处
《中国组织工程研究》
CAS
北大核心
2017年第33期5382-5387,共6页
基金
贵州省科技厅联合基金(黔省专合字(2012)172号
黔科合LH字[2016]7477号
和黔科合支撑[2017]2882号)~~
文摘
背景:Scleraxis作为肌腱细胞特异性表达分子,不仅参与肌腱祖细胞的聚集及分化,还影响肌腱细胞外基质的形成。人羊膜间充质干细胞具有多向分化潜能,在体外不同诱导条件下可分化为骨、软骨及其他结缔组织。目的:探讨Scleraxis慢病毒基因感染人羊膜间充质干细胞能否向肌腱细胞定向分化并观察其分化效果。方法:取足月产胎盘羊膜组织,两步酶消化法分离人羊膜间充质干细胞并采用倒置相差显微镜观察和流式细胞鉴定。取第3代细胞分3组进行培养,单纯人羊膜间充质干细胞培养组为空白组,人羊膜间充质干细胞经Slclerxis基因慢病毒感染后为过表达组,人羊膜间充质干细胞经不携带Scleraxis基因慢病毒感染后为空质粒组。细胞培养7 d内CCK-8法检测各组细胞增殖能力细胞。细胞培养后3 d和7 d,分别进行实时荧光定量PCR和Western Blot检测评价各组细胞向肌腱细胞定向分化的效果。结果与结论:(1)CCK-8检测显示:培养7 d内,过表达组、空质粒组与空白组细胞在增殖能力上无明显差异(P>0.05);(2)Westen blot检测显示:过表达组Scleraxis蛋白表达水平明显高于空质粒组和空白组(P<0.05);(3)实时荧光定量PCR显示:3 d时,过表达组Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、纤连蛋白及肌腱蛋白C m RNA表达水平明显高于空质粒组(P<0.05),而腱调蛋白的表达与空质粒组无明显差异(P>0.05);7 d时,Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、纤连蛋白、肌腱蛋白C及腱调蛋白的表达水平明显高于空质粒组(P<0.05);(4)结果提示:人羊膜间充质干细胞经Scleraxis慢病毒基因感染后可向肌腱细胞定向分化。
关键词
干细胞
分化
人羊膜间充质干细胞
SCLERAXIS
慢病毒感染
体外诱导
肌腱细胞
定向分化
慢病毒转染
Keywords
Cell Differentiation
Amnion
Tissue Engineering
分类号
R394.2 [医药卫生—医学遗传学]
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作者
出处
发文年
被引量
操作
1
Scleraxis慢病毒基因感染人羊膜间充质干细胞向肌腱细胞的定向分化
朱喜忠
刘子铭
吴术红
熊华章
杨继滨
李豫皖
尤奇
金瑛
左晨
刘毅
《中国组织工程研究》
CAS
北大核心
2017
6
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