单羧酸转运蛋白基因过表达对MDA-MB-231乳腺癌细胞生物学行为的影响

目的研究单羧酸转运蛋白(MCT)基因过表达对乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡、细胞周期、侵袭和转移能力的影响。方法将真核表达质粒pcDNA3.1/MCT及空质粒pcDNA3.1分别转染乳腺癌MDA-MB-231细胞。采用实时定量PCR(qRTPCR)和Western blot法分别检测转染后细胞内MCT基因的表达。Annexin V-FITC/PI染色和PI单染色结合流式细胞术检测MCT基因过表达对乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡、细胞周期的影响,Transwell实验检测MCT基因过表达对乳腺癌MDA-MB-231细胞侵袭能力的影响,划痕实验检测MCT基因过表达对乳腺癌MDA-MB-231细胞迁移能力的影响。结果实验组MCT的mRNA和蛋白水平明显高于转染空质粒的阴性对照组和未处理组;MCT过表达能促进乳腺癌MDA-MB-231细胞的凋亡,G2期细胞减少、S期细胞增多,同时能抑制癌细胞的侵袭和迁移能力。结论 MCT基因过表达能促进MDA-MB-231细胞的凋亡、调节细胞G2/M期检控点,抑制细胞的侵袭和迁移能力。

干细胞因子在消化系统肿瘤细胞中的表达及意义

以SGC7901、SW480、HepG2 3种细胞株为研究对象,分析顺铂(CDDP)对干细胞因子(stem cell factor,SCF)基因和蛋白质表达的影响,探讨SCF与消化系统肿瘤的关系。采用MTT方法筛选药物半数抑制浓度,用RT-PCR方法检测SCFmRNA表达量,并用Western Blotting方法检测SCF蛋白质表达水平。结果表明,CDDP可以抑制SCF mRNA在3种细胞株中的表达,差异均有统计学意义(P<0.05)。SCF蛋白质在SGC7901细胞实验组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);SW480、HepG2细胞实验组与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。因此,SCF在消化系统肿瘤细胞增殖过程中可能起重要作用。

双歧杆菌表达ETEC CFA/I的免疫电镜定位分析

目的研究双歧杆菌表达的CFA／I在细胞中的分布。方法将培养8～10h的重组双歧杆菌固定后制作电镜切片，镜检合格后用镍网捞取3-5个切片与金标抗体作用，镜检CFA／I在双歧杆菌中的表达分布。结果自制的胶体金颗粒均匀，与抗体结合后能够示踪CFA／I在双歧杆菌中的表达分布。结论双歧杆菌表达的CFA／I主要集中在靠近细胞膜的周质腔一侧，利于向外分泌和释放。